Murine model af central venøs stenose ved hjælp af aortocaval fistel med en udstrømning stenose

Summary

En aortocaval fistel blev skabt ved at punktere murine infra-renal aorta gennem begge vægge ind i den ringere Vena cava og blev efterfulgt af skabelsen af en stenose i sin udstrømning via delvis ligering af den ringere Vena cava. Denne reproducerbare model kan bruges til at studere central venøs stenose.

Abstract

Central venøs stenose er en vigtig enhed, der bidrager til arteriovenøs fistel (avf) fiasko. En murine AVF-model blev modificeret for at skabe en delvis ligering af den ringere Vena cava (IVC) i udstrømningen af fistel, der efterligner den centrale venøse stenose. Der indføres tekniske aspekter af denne model. Aorta og IVC er eksponeret, efter en abdominal incision. Den infra-renal aorta og IVC er dissekeret for proksimal fastspænding, og den distale aorta er udsat for punktering. IVC ved midtpunktet mellem den venstre renale vene og aorta bifurcation dissekteres omhyggeligt for at placere en 8-0 sutur under IVC. Efter fastspænding af aorta og IVC, en AVF er skabt ved at punktere den infra-renal aorta gennem begge vægge i IVC med en 25 G nål, efterfulgt af ligating en 22 G intra-venøs (IV) kateter og IVC sammen. Kateteret fjernes derefter, hvilket skaber en reproducerbar venøs stenose uden okklusion. Aorta og IVC er ikke fastklemt efter at have bekræftet primær hæmostase. Denne nye model af central vene stenose er let at udføre, reproducerbar, og vil lette undersøgelser af AVF fiasko.

Introduction

Arteriovenøse fistler (AVF) er de mest almindelige adgangsveje til hæmodialyse, med overlegen åbenhed og reduceret infektion sammenlignet med andre adgange såsom transplantationer eller centrale venøse katetre. Dog, op til 60% af avf undlader at modne^1,2,3; en nylig systematisk gennemgang rapporterede, at primære patency satser på 1 år var kun 60%⁴. Stenose langs den venøse udstrømning forårsager overvejende svigt af avf modning^5,6. Der er visse karakteristiske steder tilbøjelige til stenose proksimal til fistel: juxtaanastomotic swing segment for radiocephalic fistel, cephalgic Arch region for brachiocephalic fistel og den centrale vene for fistel med tidligere placerede ipsilaterale subclavia eller interne jugulære venekateter^7,8.

Central vene stenose er ofte asymptomatisk hos patienter uden AVF, men kan forårsage ipsilaterale ekstremitet ødem ved venøs hypertension samt svigt af fistel modning når udfordret af fistel flow⁹. Patofysiologien af central vene stenose er sandsynligvis relateret til inflammation og den aktiverede koagulations kaskade efter enhedens placering. Desuden kan konstant bevægelse af kateterspidsen samt øget flow fra fistel ændre forskydnings stress, hvilket resulterer i trombocytaflejring og venøs vægtykkelse¹⁰. For at forstå de grundlæggende mekanismer underliggende AVF-fejl forårsaget af central vene stenose, kræves der en dyremodel, som efterligner central venøs stenose med en AVF.

Vi har etableret en murine aortocaval fistel model, der er let at udføre og mestre og rekapitulerer det kliniske forløb af human AVF. ¹¹ vi anvendte begreber og teknik af flere tidligere etablerede murine modeller til at skabe en roman MURINE avf model med venøs stenose. Vi introducerer en murine aortocaval fistel model med en IVC stenose i udstrømnings fistel, der kan bruges til studiet af central vene stenose.

Protocol

Alle eksperimenter blev udført med godkendelse fra Yale universitetets institutionelle dyrepleje-og anvendelses udvalg (IACUC). 1. anæstesi og præoperative procedurer Steriliser alle kirurgiske instrumenter og materialer ved autoklave iser. Tænd for den termiske støtteenhed for at være sikker på, at den er varm (40 – 42 °C). Placer en 9 – 11-ugers gammel C57BL/6 mus i en akryl induktions kammer og bedøve det med fordampet 2,5% isofluran og 0,8 L/min ilt. Anæst…

Representative Results

Hanmus gennemgik ovennævnte operation for at skabe både en AVF og en IVC stenose. Control mus gennemgik kun laparotomi og dissektion af vævet omkring IVC, f. eks, en fingeret procedure, eller kun skabelse af en IVC stenose uden samtidig oprettelse af en AVF. IVC blev observeret med Doppler ultralyd på dag 7 efter den kirurgiske procedure (figur 2). De fistel og stenose områder i IVC blev let p?…

Discussion

Murine avf-modellen er blevet brugt til at studere de grundlæggende mekanismer og molekylære hændelser, der fører til avf modning^13,14. I denne undersøgelse modificerede vi en etableret murine avf model til at skabe en roman murine aortocaval fistel model med en IVC stenose i udstrømning tarmkanalen af fistel. Vores ligering model ligner flere tidligere beskrevne murine modeller, der bruger vaskulære ligering. En murine model af dyb venetrombose blev opret…

Materials

20-60 Mhz scan head	VisualSonics Inc.	RMV-704
8-0 Sterile Micro Suture, 6mm (140 µ), 3/8 Circle, TAP Point Needle	AROSuture	T06A08N14-13	polyamide monofilament sutures
Induction Chamber, 2 Liter 3.75"W x 9.00"D x 3.75"H	VetEquip	941444
Isoflo, Isoflurane liquid	Zoetis	26675-46-7
Mice, C57BL/6J	The Jackson Laboratory	664
Pet Bed Microwave Heating Pad	Snuggle Safe	6250
PrecisionGlide Needle 25G	BD	305122
Surflo I.V. Catheter 22G	Terumo	SR-OX2225CA	0.85mm outer diameter
Vascular clamp	Roboz Surgical Instrument	RS-5424
Vevo770 High Resolution Imaging System	VisualSonics Inc.	770