Une méthode de gel-dégel pour préparer Chitosan-Poly (alcool de vinyle) Hydrogels sans agents de liaison croisée et études de libération diflunisale

Summary

La méthode de congélation-dégel est utilisée pour produire des hydrogels chitosan-poly (alcool de vinyle) sans agents de liaison croisée. Pour cette méthode, il est important de tenir compte des conditions de congélation (température, nombre de cycles) et du rapport polymère, qui peuvent affecter les propriétés et les applications des hydrogels obtenus.

Abstract

Les hydrogels chitosan-poly (alcool de vinyle) peuvent être produits par la méthode de gel-dégel sans utiliser des agents de liaison croisée toxiques. Les applications de ces systèmes sont limitées par leurs caractéristiques (p. ex., porosité, flexibilité, capacité d’enflure, charge de médicaments et capacité de libération de médicaments), qui dépendent des conditions de congélation et du type et du rapport des polymères. Ce protocole décrit comment préparer les hydrogels à partir de chitosan et de poly (alcool de vinyle) à 50/50 w/w % de la composition de polymère et en variant la température de congélation (-4 oC, -20 oC, -80 oC) et les cycles de gel-dégel (4, 5, 6 cycles de congélation). Des données de spectre de FT-IR, de micrographe de SEM et de porosimetry des hydrogels ont été obtenues. En outre, la capacité de gonflement et le chargement et la libération de drogue de diflunisal ont été évalués. Les résultats des micrographes SEM et de la porosimétrie montrent que la taille des pores diminue, tandis que la porosité augmente à des températures plus basses. Le pourcentage d’enflure était plus élevé à la température de congélation mineure. La libération de diflunisal des hydrogels a été étudiée. Tous les réseaux maintiennent la libération de drogue pendant 30 h et il a été observé qu’un mécanisme de diffusion simple régule la libération diflunisale selon les modèles Korsmeyer-Peppas et Higuchi.

Introduction

Récemment, les hydrogels ont attiré un grand intérêt dans le domaine biomédical parce qu’ils sont des réseaux tridimensionnels avec une forte teneur en eau et sont doux et flexibles, de sorte qu’ils peuvent imiter les tissus naturels facilement¹. En outre, ils ne se dissolvent pas dans le milieu aqueux à la température physiologique et le pH mais présentent un grand gonflement^2. Les hydrogels peuvent agir comme échafaudages d’ingénierie tissulaire, produits d’hygiène, lentilles cornéennes et pansements de plaies; parce qu’ils peuvent piéger et libérer des composés actifs et des médicaments, ils sont utilisés comme systèmes d’administration de médicaments³. Selon leur application, les hydrogels peuvent être fabriqués à partir de polymères naturels ou synthétiques, ou une combinaison des deux, afin d’obtenir les meilleures caractéristiques⁴.

Les propriétés des hydrogels sont une conséquence de nombreux facteurs physiques et chimiques. Au niveau physique, leur structure et leur morphologie dépendent de leur porosité, de leur taille de pores et de leur distribution de pores⁵. Au niveau chimique et moléculaire, le type de polymère, le contenu du groupe hydrophile dans la chaîne de polymère, le type de point de liaison croisée, et la densité de liaison croisée sont les facteurs qui déterminent la capacité de gonflement et les propriétés mécaniques^6,7.

Selon le type d’agent de liaison croisée utilisé pour former le réseau, les hydrogels sont classés comme hydrogels chimiques ou hydrogels physiques. Les hydrogels chimiques sont rejoints par des interactions covalentes entre leurs chaînes, qui sont formées par irradiation UV et gamma ou à l’aide d’un agent de liaison croisée^7,8. Les hydrogels chimiques sont généralement forts et résistants, mais, généralement, l’agent de liaison croisée est toxique pour les cellules et son élimination est difficile, de sorte que son application est limitée. D’autre part, les hydrogels physiques se forment par la connexion des chaînes de polymères par des interactions non-covalentes, évitant l’utilisation d’agents de liaison croisée^4,9. Les principales interactions non covalentes dans le réseau sont les interactions hydrophobes, les forces électrostatiques, les limites complémentaires et les limites d’hydrogène⁷.

Poly (alcool de vinyle) (PVA, Figure 1a) est un polymère synthétique et soluble dans l’eau avec d’excellentes performances mécaniques et biocompatibilité qui peut à partir d’hydrogels sans agent de liaison croisée par la méthode de gel-dégel^10,11. Ce polymère a la capacité de former des zones concentrées de liaisons d’hydrogène entre les groupes -OH de leurs chaînes (zones cristallines) lorsqu’ils gèlent¹². Ces zones cristallines agissent comme des points de liaison croisés dans le réseau, et ils sont promus par deux événements: l’approche des chaînes de polymères lorsque l’eau cristalline se dilate et les changements conformationnels PVA de l’isotactic à la PVA syndiotactique pendant le gel¹³. En raison du lyophilisation, les cristaux d’eau sont sublimés, laissant des espaces vides qui sont les pores de l’hydrogel¹⁴. Pour obtenir des hydrogels avec de meilleures propriétés, PVA peut être facilement combiné avec d’autres polymères.

En ce sens, le chitosan constitue une option car il est le seul biopolymère de sources naturelles avec des charges positives. Il est obtenu par la deacétylation de la chitine et il est composé de combinaisons aléatoires de D-glucosamine liée à 1,4 (unité de désacétration) et Deacetyl-D-glucosamine (unité acétylisée)^15,16 (Figure 1b). Le chitosan est biodégradable par les enzymes humaines et il est biocompatible. En outre, par sa nature cationic, il peut interagir avec la charge négative de la surface cellulaire, et cette propriété a été associée à son activité antimicrobienne¹⁷. Ce polymère est facile à traiter; cependant, leurs propriétés mécaniques ne sont pas suffisantes et certains matériaux ont été ajoutés pour former des complexes avec de meilleures caractéristiques.

Compte tenu des caractéristiques spécifiques du chitosan et de la PVA, la méthode de gel-dégel^2,18 pour éviter l’utilisation d’agents de liaison croisée sélifiants a été atteinte. Dans les hydrogels chitosan-PVA, les zones cristallines de PVA sont également formées, et les chaînes de chitosan sont interpénétrées et forment de simples liaisons d’hydrogène avec des groupes -NH₂ et -OH dans PVA. L’hydrogel chitosan-PVA final est mécaniquement stable, avec des taux élevés d’enflure et de faible toxicité, et avec un effet antibactérien¹⁸. Toutefois, selon les conditions de congélation utilisées dans la préparation (température, temps et nombre de cycles), les caractéristiques finales peuvent changer. Certaines études rapportent que l’augmentation du nombre de cycles de congélation diminue le degré de gonflement et augmente la force de tension^19,20. Afin de renforcer le réseau, d’autres agents tels que le rayonnement gamma et UV et les liaisons chimiques ont été utilisés en plus après la préparation congelée^21,22,23. Les hydrogels avec une proportion plus élevée de chitosan ont un réseau plus poreux et une capacité de gonflement élevée mais moins de force et de stabilité thermique. Dans ce contexte, il est important de considérer les conditions de préparation pour obtenir des hydrogels appropriés pour leur application cible.

Le but de ces travaux est de présenter en détail comment les conditions de congélation (température de congélation et nombre de cycles) affectent les caractéristiques finales des hydrogels CS-PVA. Les spectres FT-IR, les caractéristiques morphologiques et porologiques et la capacité de gonflement ont été évalués, ainsi que la capacité de chargement et de libération des médicaments. Dans les études de libération, diflunisal (figure 1c) a été utilisé comme médicament modèle, en raison de sa taille adaptée à la structure hydrogel.

Protocol

1. Préparation des hydrogels chitosan-PVA Préparer 2 % (w/w) chitosan et 10 % (w/w) des solutions PVA. Dissoudre 0,2 g de chitosan dans 10 ml de solution DE 0,1 M CH3COOH (préalablement filtrée) à température ambiante et maintenir une agitation mécanique continue pendant la nuit. Dissoudre 1 g de PVA dans 10 ml d’eau distillée et remuer à 80 oC pendant 1 h. Mélanger les deux solutions 1:1 à l’aide d’un agitateur magnétique jusqu’à ce qu’elles soient homogènes à température a…

Representative Results

Préparation des hydrogelsLes hydrogels Chitosan-PVA ont été obtenus à -4 oC, -20 oC et -80 oC avec 4 cycles de congélation et à -80 oC avec 5 et 6 cycles de congélation selon la méthode de congélation-dégel précédemmentrapportée 2. Tous les hydrogels étaient homogènes, semi-transparents, flexibles et résistants contre la manipulation. Caractérisation FT-IR</st…

Discussion

La méthode de gel-dégel est un processus approprié pour préparer des hydrogels biocompatibles concentrés dans les applications biomédicales, pharmaceutiques ou cosmétiques^34,35,36. L’avantage le plus important de cette méthode, par rapport à d’autres méthodes bien connues pour préparer les hydrogels, est que l’utilisation d’agent de liaison croisée est évitée, ce qui pourrait causer une réponse inflammatoire ou de…

Materials

Materials:
Chitosan medium molecular weight	Sigma-Aldrich	448877	Mw determined by capillary viscometry (637,000 Da) and deacetylation degree of 70%
Diflunisal (2'-4'-difluoro-4-hydroxy-3-biphenyl-carboxylicacid)	Merck
Glacial acetic acid	Sigma-Aldrich	1005706
Poly(vinyl alcohol)	Sigma-Aldrich	341584	Mw 89,000-98,000, 99+% hydrolyzed
Equipment:
Cressington Sputter Coater 108 auto	TED PELLA INC
Cryodos Lyophilizator	Telstar
Falcon tubes	Thermo Fisher Company
FT-IR spectroscopy	Nicolet iS50	in ATR mode
Lyophilizator	LABCONCO
Micromeritics Autopore IV 9500	Micromeritics
Scanning electron microscope	Pemtron SS-300LV
UV-visible spectrophotometer	Agilent 8453