एलोजेनिक बोन मैरो प्रत्यारोपण के बाद भ्रष्टाचार बनाम मेजबान रोग एक बड़ी जटिलता है । डेंग्ड्रिटिक कोशिकाएं भ्रष्टाचार बनाम मेजबान रोग के रोगजनकता में महत्वपूर्ण भूमिका निभाती हैं। वर्तमान लेख भ्रष्टाचार बनाम मेजबान रोग और भ्रष्टाचार बनाम ल्यूकेमिया प्रभाव के विकास में डेंड्रिटिक कोशिकाओं की भूमिका की जांच करने के लिए एक उपन्यास अस्थि मज्जा प्रत्यारोपण मंच का वर्णन करता है ।
ट्यूमर को समाप्त करने के लिए भ्रष्टाचार बनाम ल्यूकेमिया (जीवीएल) प्रभाव के कारण एलोजेनिक बोन मैरो प्रत्यारोपण (बीएमटी) हेमेटोलॉजिकल घातक के लिए एक प्रभावी चिकित्सा है। हालांकि, इसका आवेदन भ्रष्टाचार बनाम मेजबान रोग (GVHD), बीएमटी की एक बड़ी जटिलता के विकास से सीमित है । GVHD पैदा किया जाता है जब दाता ग्राफ्ट में टी कोशिकाओं प्राप्तकर्ता कोशिकाओं द्वारा व्यक्त allalloantigen पहचान और प्राप्तकर्ता स्वस्थ ऊतकों के खिलाफ अवांछित प्रतिरक्षा हमलों माउंट । इस प्रकार, पारंपरिक चिकित्सा दाता टी सेल alloreactivity को दबाने के लिए डिज़ाइन कर रहे हैं । हालांकि, ये दृष्टिकोण जीवीएल प्रभाव को काफी हद तक ख़राब करते हैं ताकि प्राप्तकर्ता के अस्तित्व में सुधार न हो। बीएमटी, जीवीएल और जीवीएचडी पर चिकित्सीय दृष्टिकोणों के प्रभावों को समझना, इस प्रकार आवश्यक है। दाता टी-कोशिकाओं को प्रोत्साहित करने के लिए एंटीजन-पेश करने और साइटोकिन-स्राव क्षमताओं के कारण, प्राप्तकर्ता डेंड्रिटिक कोशिकाएं (डीसी) जीवीएचडी को शामिल करने में महत्वपूर्ण भूमिका निभाती हैं। इसलिए, प्राप्तकर्ता डीसी को लक्षित करना जीवीएचडी को नियंत्रित करने के लिए एक संभावित दृष्टिकोण बन जाता है। यह काम एक उपन्यास बीएमटी मंच का वर्णन प्रदान करता है ताकि यह जांच की जा सके कि प्रत्यारोपण के बाद मेजबान डीसी जीवीएच और जीवीएल प्रतिक्रियाओं को कैसे विनियमित करते हैं। इसके अलावा प्रस्तुत प्रत्यारोपण के बाद जीवीएचडी और जीवीएल के जीव विज्ञान का अध्ययन करने के लिए एक प्रभावी बीएमटी मॉडल है।
एलोजेनिक हेमेटोपोइटिक स्टेम सेल प्रत्यारोपण (बीएमटी) भ्रष्टाचार बनाम ल्यूकेमिया (जीवल) प्रभाव3के माध्यम से हेमेटोलॉजिकल घातक1,,2 के इलाज के लिए एक प्रभावी चिकित्सा है। हालांकि, दाता लिम्फोसाइट्स हमेशा प्राप्तकर्ता ऊतकों के खिलाफ अवांछित प्रतिरक्षा हमलों को माउंट करते हैं, एक प्रक्रिया जिसे भ्रष्टाचार बनाम मेजबान रोग (GVHD)4कहा जाता है।
जीवीएचडी के Murine मॉडल जीवीएचडी के जीव विज्ञान और जीवीएल प्रतिक्रिया5का अध्ययन करने के लिए एक प्रभावी उपकरण हैं। चूहे एक लागत प्रभावी अनुसंधान पशु मॉडल हैं। वे विकासकेशुरुआती चरणों में अणुओं और जीवविज्ञान ों के साथ छोटे और कुशलता से खुराक लेते हैं । चूहे आनुवंशिक हेरफेर अध्ययन के लिए आदर्श शोध जानवर हैं क्योंकि वे आनुवंशिक रूप से अच्छी तरह से परिभाषित हैं, जो जैविक रास्तों और तंत्र6का अध्ययन करने के लिए आदर्श है। कई माउस प्रमुख हिस्टोकॉम्पिटीबिलिटी कॉम्प्लेक्स (एमएचसी) एमवीएचडी के एमएचसी-बेमेल मॉडल अच्छी तरह से स्थापित किए गए हैं, जैसे C57BL/6 (H2b)से बाल्बी/सी (H2d)और एफवीबी (H2q)→ C57BL/6 (H2b)5,,7। ये विशेष रूप से मूल्यवान मॉडल हैं जो जीवीएचडी को प्रभावित करने वाले व्यक्तिगत कोशिका प्रकारों, जीन और कारकों की भूमिका निर्धारित करने के लिए हैं। C57/BL/6 (H2b)से प्रत्यारोपण MHC I (B6.C-H2bm1)और/या MHC द्वितीय (B6.C-H2bm12)में उत्परिवर्तन के साथ प्राप्तकर्ताओं के लिए माता पिता के दाताओं से पता चला है कि दोनों MHC वर्ग मैं और वर्ग द्वितीय में एक बेमेल तीव्र GVHD के विकास के लिए एक महत्वपूर्ण आवश्यकता है । इससे पता चलता है कि रोग विकास7,8के लिए सीडी 4+ और सीडी 8+ टी-कोशिकाओं दोनों की आवश्यकता होती है । जीवीएचडी एक भड़काऊ झरना में भी शामिल है जिसे ‘प्रो-भड़काऊ साइटोकिन स्टॉर्म’9के नाम से जाना जाता है। मूत्र मॉडल में सबसे आम कंडीशनिंग विधि एक्स-रे या 137सीएस द्वारा कुल शरीर विकिरण (टीबीआई) है। यह प्राप्तकर्ता के अस्थि मज्जा एब्लेशन की ओर जाता है, जिससे दाता स्टेम सेल एनग्राफमेंट की अनुमति देता है और भ्रष्टाचार की अस्वीकृति को रोकता है। यह दाता कोशिकाओं के जवाब में प्राप्तकर्ता टी-कोशिकाओं के प्रसार को सीमित करके किया जाता है। इसके अतिरिक्त, आनुवंशिक असमानताएं रोग प्रेरण में महत्वपूर्ण भूमिका निभाती हैं, जो मामूली एमएचसी-बेमेल10पर भी निर्भर करती है । इसलिए, माइलोएबलेटिव विकिरण खुराक विभिन्न माउस उपभेदों (जैसे, बाल्बी/सी →C57BL/6) में भिन्न होती है।
मेजबान एंटीजन पेश कोशिकाओं (APCs) द्वारा दाता टी कोशिकाओं की सक्रियण GVHD विकास के लिए आवश्यक है । एपीसी में, डेंड्रिटिक कोशिकाएं (डीसी) सबसे शक्तिशाली हैं। वे अपने बेहतर एंटीजन तेज, टी-सेल सह-उत्तेजक अणुओं की अभिव्यक्ति और प्रो-भड़काऊ साइटोकिन्स के उत्पादन के कारण जीवीएचडी को प्रेरित करने में सक्षम हैं जो टी-कोशिकाओं को रोगजनक सबसेट में ध्रुवित करते हैं। प्राप्तकर्ता डीसी11,12प्रत्यारोपण के बाद टी-सेल प्राइमिंग और जीवीएचडी इंडक्शन की सुविधा के लिए महत्वपूर्ण हैं । तदनुसार, डीसी GVHD12के उपचार में दिलचस्प लक्ष्य बन गए हैं ।
डोनर सेल एनग्राफमेंट को बढ़ाने के लिए टीबीआई की जरूरत होती है। टीबीआई प्रभाव के कारण, प्राप्तकर्ता डीसी सक्रिय होते हैं और प्रत्यारोपण12के बाद थोड़े समय के लिए जीवित रहते हैं। बायोल्यूमिनेसेंस या फ्लोरेसेंस के उपयोग में प्रमुख प्रगति के बावजूद, जीवीएचडी में प्राप्तकर्ता डीसी की भूमिका का अध्ययन करने के लिए एक प्रभावी मॉडल की स्थापना अभी भी चुनौतीपूर्ण है।
क्योंकि दाता टी कोशिकाओं GVL गतिविधि के लिए प्रेरक शक्ति हैं, उपचार ऐसे स्टेरॉयड के रूप में इम्यूनोसप्रेसिव दवाओं का उपयोग करने के लिए टी सेल alloreactivity दबाने रणनीतियों अक्सर ट्यूमर पतन या संक्रमण13का कारण । इसलिए, प्राप्तकर्ता डीसी को लक्षित करने से जीवीएल प्रभाव को संरक्षित करते हुए और संक्रमण से बचने के लिए जीवीएचडी के इलाज के लिए एक वैकल्पिक दृष्टिकोण प्रदान किया जा सकता है।
संक्षेप में, वर्तमान अध्ययन यह समझने के लिए एक मंच प्रदान करता है कि प्राप्तकर्ता डीसी में विभिन्न प्रकार के सिग्नलिंग बीएमटी के बाद जीवीएचडी विकास और जीवीएल प्रभाव को कैसे नियंत्रित करता है।
किसी विशेष व्यक्ति के अनुरूप स्टेम सेल का प्रयोग उन्नत और प्रतिरोधी कैंसर18के इलाज के लिए एक प्रभावी दृष्टिकोण है . छोटे अणु फार्मास्यूटिकल्स, हालांकि, लंबे समय से व्यक्तिगत कैंसर चिकित्सा का …
The authors have nothing to disclose.
इस अध्ययन के सेंट्रल फ्लोरिडा कॉलेज ऑफ मेडिसिन स्टार्ट-अप अनुदान (एचएन के लिए), पिट्सबर्ग मेडिकल सेंटर हिलमैन कैंसर सेंटर स्टार्ट-अप अनुदान (एचएल के लिए), संयुक्त राज्य अमेरिका NIH अनुदान #1P20CA210300-01 और वियतनामी स्वास्थ्य अनुदान #4694/QD-BYT (PTH के लिए) मंत्रालय द्वारा समर्थित है । हम अध्ययन के लिए सामग्री प्रदान करने के लिए दक्षिण कैरोलिना के मेडिकल विश्वविद्यालय में डॉ Xue-zhong यू शुक्रिया अदा करते हैं ।
0.5 M EDTA pH 8.0 100ML | Fisher Scientific | BP2482100 | MACS buffer |
10X PBS | Fisher Scientific | BP3994 | MACS buffer |
A20 B-cell lymphoma | University of Central Florida | In house | GVL experiment |
ACC1 fl/fl | Jackson Lab | 30954 | GVL experiment |
ACC1 fl/fl CD4cre | University of Central Florida | GVL experiment | |
Anti-Biotin MicroBeads | Miltenyi Biotec | 130-090-485 | T-cell enrichment |
Anti-Human/Mouse CD45R (B220) | Thermo Fisher Scientific | 13-0452-85 | T-cell enrichment |
Anti-mouse B220 FITC | Thermo Fisher Scientific | 10452-85 | Flow cytometry analysis |
Anti-mouse CD11c- AF700 | Thermo Fisher Scientific | 117319 | Flow cytometry analysis |
Anti-Mouse CD25 PE | Thermo Fisher Scientific | 12-0251-82 | Flow staining |
Anti-Mouse CD4 Biotin | Thermo Fisher Scientific | 13-0041-86 | T-cell enrichment |
Anti-Mouse CD4 eFluor® 450 (Pacific Blue® replacement) | Thermo Fisher Scientific | 48-0042-82 | Flow staining |
Anti-mouse CD45.1 PE | Thermo Fisher Scientific | 12-0900-83 | Flow cytometry analysis |
Anti-Mouse CD8a APC | Thermo Fisher Scientific | 17-0081-83 | Flow cytometry analysis |
Anti-mouse H-2Kb PerCP-Fluor 710 | Thermo Fisher Scientific | 46-5958-82 | Flow cytometry analysis |
Anti-mouse MHC Class II-antibody APC | Thermo Fisher Scientific | 17-5320-82 | Flow cytometry analysis |
Anti-Mouse TER-119 Biotin | Thermo Fisher Scientific | 13-5921-85 | T-cell enrichment |
Anti-Thy1.2 | Bio Excel | BE0066 | BM generation |
B6 fB-/- mice | University of Central Florida | In house | Recipients |
B6.Ly5.1 (CD45.1+) mice | Charles River | 564 | Donors |
BALB/c mice | Charles River | 028 | Transplant recipients |
C57BL/6 mice | Charles River | 027 | Donors/Recipients |
CD11b | Thermo Fisher Scientific | 13-0112-85 | T-cell enrichment |
CD25-biotin | Thermo Fisher Scientific | 13-0251-82 | T-cell enrichment |
CD45R | Thermo Fisher Scientific | 13-0452-82 | T-cell enrichment |
CD49b Monoclonal Antibody (DX5)-biotin | Thermo Fisher Scientific | 13-5971-82 | T-cell enrichment |
Cell strainer 40 uM | Thermo Fisher Scientific | 22363547 | Cell preparation |
Cell strainer 70 uM | Thermo Fisher Scientific | 22363548 | Cell preparation |
D-Luciferin | Goldbio | LUCK-1G | Live animal imaging |
Fetal Bovine Serum (FBS) | Atlanta Bilogicals R&D system | D17051 | Cell Culture |
Flow cytometry tubes | Fisher Scientific | 352008 | Flow cytometry analysis |
FVB/NCrl | Charles River | 207 | Donors |
Lipopolysacharide (LPS) | Millipore Sigma | L4391-1MG | DC mature |
LS column | Mitenyi Biotec | 130-042-401 | Cell preparation |
MidiMACS | Miltenyi Biotec | 130-042-302 | T-cell enrichment |
New Brunswick Galaxy 170R incubator | Eppendorf | Galaxy 170 R | Cell Culture |
Penicilin+streptomycinPenicillin/Streptomycin (10,000 units penicillin / 10,000 mg/ml strep) | GIBCO | 15140 | Media |
RPMI 1640 | Thermo Fisher Scienctific | 11875-093 | Media |
TER119 | Thermo Fisher Scientific | 13-5921-82 | T-cell enrichment |
Xenogen IVIS-200 | Perkin Elmer | Xenogen IVIS-200 | Live animal imaging |
X-RAD 320 Biological Irradiator | Precision X-RAY | X-RAD 320 | Total Body Irradiation |