यह प्रोटोकॉल मस्तिष्क दान कार्यक्रम और दिमाग के उचित लक्षण वर्णन के माध्यम से व्यक्तिगत मस्तिष्क-उम्र बढ़ने वाले प्रक्षेप पथ को ट्रैक करने की एक विधि का वर्णन करता है। मस्तिष्क दाताओं धारावाहिक बहु आयामी आकलन सहित एक दीर्घकालिक देशांतर अध्ययन में शामिल हैं । प्रोटोकॉल में मस्तिष्क प्रसंस्करण और एक सटीक नैदानिक पद्धति का विस्तृत विवरण शामिल है।
लगातार बढ़ती आबादी में, न्यूरोडीजेनेरेटिव विकारों की व्यापकता बढ़ने की उम्मीद है। रोग तंत्र को समझना निवारक और उपचारात्मक उपायों को खोजने की कुंजी है। इस लक्ष्य को प्राप्त करने के लिए सबसे प्रभावी तरीका रोगग्रस्त और स्वस्थ मस्तिष्क ऊतक की सीधी परीक्षा के माध्यम से है। लेखकों को प्राप्त करने के लिए एक प्रोटोकॉल मौजूद है, प्रक्रिया, विशेषता और अच्छी गुणवत्ता मस्तिष्क ऊतक एक पूर्वाह्न मस्तिष्क दान कार्यक्रम में पंजीकृत व्यक्तियों द्वारा दान की दुकान । दान कार्यक्रम में लोगों के लिए एक आमने-सामने सहानुभूति दृष्टिकोण, पूरक नैदानिक, जैविक, सामाजिक और जीवन शैली की जानकारी का संग्रह और सामान्य उम्र बढ़ने और संज्ञानात्मक गिरावट के व्यक्तिगत प्रक्षेप पथ को ट्रैक करने के लिए समय के साथ धारावाहिक बहु-आयामी आकलन शामिल हैं। चूंकि कई न्यूरोलॉजिकल बीमारियां विषम हैं, इसलिए हमारा मस्तिष्क बैंक ताजा नमूनों को टुकड़ा करने के लिए एक अनूठा प्रोटोकॉल प्रदान करता है। दोनों गोलार्द्धों के मस्तिष्क खंडों को वैकल्पिक रूप से जमे हुए (-80 डिग्री सेल्सियस पर) या फॉर्मेलिन में तय किया जाता है; एक गोलार्द्ध पर एक निश्चित टुकड़ा दूसरे गोलार्द्ध पर जमे हुए एक से मेल खाता है। इस दृष्टिकोण के साथ, सभी जमे हुए सामग्री का एक पूर्ण हिस्टोलॉजिकल लक्षण वर्णन प्राप्त किया जा सकता है, और ओमिक्स अध्ययन दोनों गोलार्द्धों से हिस्टोलॉजिकल रूप से अच्छी तरह से परिभाषित ऊतकों पर किया जा सकता है इस प्रकार न्यूरोडीजेनेरेटिव रोग तंत्र का अधिक पूर्ण मूल्यांकन प्रदान करता है। इन रोगों का सही और निश्चित निदान केवल न्यूरोपैथोलॉजिकल मूल्यांकन के साथ नैदानिक सिंड्रोम के संयोजन से प्राप्त किया जा सकता है, जो अक्सर रोगजनकता की व्याख्या करने के लिए आवश्यक महत्वपूर्ण एटियोलॉजिकल सुराग जोड़ता है। यह विधि समय लेने वाली, महंगी और सीमित हो सकती है क्योंकि यह केवल एक सीमित भौगोलिक क्षेत्र को कवर करती है। इसकी सीमाओं के बावजूद, यह प्रदान करता है लक्षण वर्णन के उच्च डिग्री पुरस्कृत किया जा सकता है । हमारा अंतिम लक्ष्य न्यूरोपैथोलॉजिकल रूप से सत्यापित महामारी विज्ञान अध्ययन के महत्व पर जोर देते हुए, पहला इतालवी ब्रेन बैंक स्थापित करना है।
डब्ल्यूएचओ के अनुसार, लगभग ५०,०००,००० लोग वर्तमान में डिमेंशिया से पीड़ित हैं, एक आंकड़ा जो २०५० तक ट्रिपल होने का अनुमान है । अल्जाइमर रोग डिमेंशिया का प्रमुख कारण है, जिसके बाद सेरेब्रोवैस्कुलर रोग और उम्र से संबंधित अन्य न्यूरोडीजेनेरेटिव विकार हैं। २०१७ में, डब्ल्यूएचओ ने डिमेंशिया के बारे में जागरूकता बढ़ाने और इसके खिलाफ एक वैश्विक कार्य योजना को प्रोत्साहित करने के लिए ग्लोबल डिमेंशिया वेधशाला विकसित की1। प्रत्येक व्यक्ति का अपना मस्तिष्क उम्र बढ़ने का प्रक्षेपवक्र होता है, इसलिए न्यूरोडीजेनेरेटिव बीमारियों के रोगजनन की जटिलता के कारण इलाज की खोज चुनौतीपूर्ण हो सकती है। शायद, प्रत्येक व्यक्ति के पास मस्तिष्क के ऊतकों में लिखे गए रोगजनकों के पास व्यक्तिगत दृष्टिकोण की आवश्यकता होती है। इस प्रकार, मस्तिष्क के ऊतकों का अध्ययन न्यूरोडिजेनरेशन के तंत्र को समझने की कुंजी होगी।
तंत्रिका विज्ञान के इतिहास को पीछे मुड़कर देखते हुए, हमें पता है कि मानव मस्तिष्क की सीधी परीक्षा के बिना सबसे प्रभावशाली और अभूतपूर्व खोजें कभी नहीं हो सकती थीं। समय के दौरान, मस्तिष्क के ऊतकों का अध्ययन करने के स्रोत कच्चे विच्छेदन, यादृच्छिक ‘ मौका मुठभेड़ों ‘ से बदल गया है और, कुछ मामलों में, अवैध व्यापार, संगठित मस्तिष्क संग्रह और रणनीतिक आधुनिक मस्तिष्क बैंकों के लिए । कई नैतिक पहलुओं पर विचार अतीत के मस्तिष्क संग्रह से आधुनिक मस्तिष्क बैंकों में अंतर मुख्य कारकों में से एक है । पहले वास्तविक आधुनिक मस्तिष्क बैंकों (BBs) 20 वीं सदी के उत्तरार्ध मेंस्थापित किए गए थे । निकोलस कोर्सेलिस और वालेस टूरेलोटे को आधुनिक मस्तिष्क बैंकिंग का अग्रणी माना जा सकता है। ब्रिटेन में, कॉर्सेलिस ने विभिन्न मानसिक और तंत्रिका संबंधी विकारों से प्रभावित 1000 अच्छीतरहसे प्रलेखित दिमाग पर एक संग्रह इकट्ठा किया। इसके अलावा, कोर्सेलिस ने जैव रासायनिक परीक्षण 3 के लिए बर्फ में ताजा मस्तिष्क ऊतक कोसंरक्षितकरने की आवश्यकता को प्रकट करने में मदद की। इस बीच संयुक्त राज्य अमेरिका में, वालेस टूटेलोटे ने संभावित मस्तिष्क दाताओं की याचना को सुविधाजनक बनाने के लिए पूर्वाह्न मस्तिष्क दान कार्यक्रम शुरू किए और यह सुनिश्चित किया कि एकत्र किए गए दिमाग एक पूर्ण चिकित्सा और तंत्रिका विज्ञान के इतिहास के साथ हैं4,,5। मस्तिष्क संग्रह और आधुनिक BBs के एक ऐतिहासिक सिंहावलोकन के लिए, कार्लोस एट अल देखें । 6.
तो, हमें अभी भी मानव दिमाग की आवश्यकता क्यों है? मस्तिष्क रोगों को केवल न्यूरोपैथोलॉजिकल जांच के बाद एक निश्चित निदान दिया जा सकता है। न्यूरोपैथोलॉजी नैदानिक निदान को चुनौती देती है, और नैदानिक लक्षणों की सही व्याख्या और नए सिंड्रोमिक वेरिएंट के हिस्टोलॉजिकल ठिकानों की खोज की कुंजी है। दरअसल, निदान रोग चित्र के आधार पर नए सिरे से परिभाषित किया जा सकता है। फिर भी, अभिनव न्यूरोइमेजिंग तकनीकों के हालिया विकास के कारण पिछले दशकों में शव परीक्षण दर में गिरावट आई है । ब्रेन इमेजिंग के माध्यम से, मस्तिष्क में रूपात्मक, कार्यात्मक और मेटाबोलिक परिवर्तन, साथ ही प्रोटीन की सीमा को वीवो मेंमूल्यांकन किया जा सकता है। हालांकि, वीवो न्यूरोइमेजिंग और अन्य बायोमार्कर अध्ययनों में केवल रोग चित्र का “अनुमान” दे सकते हैं क्योंकि वे सूक्ष्म सेलुलर और आणविक परिवर्तनों का पता लगाने में असमर्थ हैं। आणविक इमेजिंग में प्रगति और नए बायोमार्कर, लक्ष्य अणुओं, और ट्रेसर7 (जैसे, एमिलॉयड, ताऊ, माइक्रोग्लियल ट्रेसर) की खोज मानव मस्तिष्क को नैदानिक मूल्यांकन और बायोमार्कर परीक्षण से प्राप्त डेटा की व्याख्या के लिए और भी अपरिहार्य प्रदान करती है। इसके अलावा, ओमिक्स टेक्नोलॉजीज (जीनोमिक्स, एपिजेनोमिक्स, ट्रांसक्रिप्टोमिक्स, मेटाबोलोमिक्स, प्रोटेओमिक्स, लिपिडोमिक्स, आदि), ताजा और जमे हुए मस्तिष्क के ऊतकों पर प्रदर्शन किया, रोग तंत्र को समझने और जोखिम जीन, उपन्यास नैदानिक और शकुन मार्कर की खोज के लिए नई संभावनाओं को खोला, और संभावित दवा लक्ष्य8,,,9,10,,11, 12,11,13,,14,,15,,16,,17,,18,,19,,20,,21,,22, 23,23.,
इन उद्देश्यों के लिए, आधुनिक बीबीएस अच्छी तरह से विशेषता, उच्च गुणवत्ता वाले मस्तिष्क ऊतकों को वैज्ञानिक समुदाय3,,24के लिए उपलब्ध कराते हैं। बीबीए द्वारा आपूर्ति किए गए दिमाग को पूर्ण नैदानिक इतिहास के साथ होना चाहिए। बीबी की गतिविधि में निम्नलिखित शामिल हैं: (1) मस्तिष्क दान कार्यक्रमों के लिए रोगग्रस्त और स्वस्थ व्यक्तियों की मान्यता और भर्ती; आदर्श स्थिति एक पूर्ण नैदानिक, जीवन शैली और सामाजिक इतिहास, और बायोमार्कर प्रोफाइल प्राप्त करने के लिए जीवन भर में दानदाताओं के एक बहु-अनुशासनात्मक अनुवर्ती कार्रवाई को प्राप्त करने के लिए होगी; वास्तव में, संज्ञानात्मक रिजर्व और मस्तिष्क संरचना जीवन शैली और सामाजिक-शैक्षिक कारकों पर निर्भर करती है25,,26,इसलिए ये जानकारी हाथ में कुल डेटा को समृद्ध करती है। (2) मस्तिष्क का अधिग्रहण (सेरेब्रम, सेरिबैलम और मस्तिष्क स्टेम से मिलकर) और संबंधित ऊतकों (जैसे, रीढ़ की हड्डी, कपाल नसों और गंगलिया, आदि) दाता के निधन के बाद, सभी मानकीकृत कानूनी और नैतिक नियमों को देख रहे हैं । (3) मस्तिष्क के उपयुक्त प्रसंस्करण (विच्छेदन, निर्धारण, ठंड) के रूप में एक मानकीकृत ऑपरेटिव प्रोटोकॉल में परिभाषित, उच्च गुणवत्ता वाले ऊतक प्राप्त करने के लिए और बहुविषयक अनुसंधान में भविष्य के उपयोग के लिए अनुमति देने के लिए । (4) विस्तृत न्यूरोपैथोलॉजिकल लक्षण वर्णन एक अंतिम निश्चित निदान प्रदान करते हैं। (5) अनुसंधान समुदाय के लिए ऊतक सामग्री का भंडारण और वितरण27,,28।
सभी बीबीए जमे हुए और फॉर्मेलिन-फिक्स्ड-पैराफिन एम्बेडेड ऊतकों दोनों को स्टोर करते हैं। हर बीबी का अपना प्रोटोकॉल होता है। विशेष अध्ययनों को छोड़कर, जैसे बायोमेडिकल रिसर्च इंस्टीट्यूट (न्यू जर्सी)29 के बिहेमिफेरिक कटिंग प्रोटोकॉल और सेरेब्रोवैस्कुलर पैथोलॉजी30के Deramecourt के अध्ययन, दुनिया में सबसे बड़ी BBs बस मिडलाइन (sagittal विमान) के साथ सेरेब्रम, सेरिबैलम और ब्रेनस्टेम में कटौती । एक आधा ताजा विच्छेदन और फिर जैव रासायनिक अध्ययन के लिए जमे हुए है, जबकि दूसरे को हिस्टोपैथोलॉजिकल मूल्यांकन के लिए फॉर्मेलिन में तय किया जाता है । इसलिए, प्रत्येक गोलार्द्ध पर जैव रासायनिक और हिस्टोपैथोलॉजिकल विश्लेषण अलग से आयोजित किए जाते हैं। यह निर्णय एकवचन बैंक 31 ,,,32, 33,34,,,35पर निर्भर करता है कि किस पक्ष में फिक्स्ड या फ्रोजन (लेटलतीन) है।3435 जैसा कि कई न्यूरोलॉजिकल बीमारियां विषम हैं, हमारी बीबी ताजा दिमाग को टुकड़ा करने के लिए एक अनूठा प्रोटोकॉल प्रदान करती है: ब्रेनस्टेम के आसन्न खंड और प्रत्येक गोलार्द्ध बारी-बारी से तय और जमे हुए हैं; एक गोलार्द्ध पर एक निश्चित टुकड़ा दूसरे गोलार्द्ध पर जमे हुए एक से मेल खाता है। इस विधि के माध्यम से, मस्तिष्क के ऊतकों का उपयोग अनुकूलित किया जाता है, और दोनों गोलार्द्धों के सभी क्षेत्रों से हिस्टोलॉजिकल और बायोकेमिकल जानकारी प्राप्त करने और तुलना करने की संभावना के साथ सभी जमे हुए सामग्री का एक पूर्ण हिस्टोलॉजिकल लक्षण वर्णन प्राप्त किया जा सकता है।
हमारे ब्रेन बैंक परियोजना का फ्रेम अबियापेटग्रासो शहर है। Abbiategrasso उत्तरी इटली में मिलान शहर के 22 किमी दक्षिण पश्चिम के बारे में एक छोटा सा शहर है । इसकी आबादी करीब 32,600 लोगों की है। यह गोलगी-सेंसी (जीसी) फाउंडेशन काघर है । जीसी फाउंडेशन एक बड़े पुनर्वास बुढ़ापे अस्पताल (एएसपी Golgi-Redaelli) का हिस्सा है, और एक संस्थान उम्र बढ़ने और बुजुर्गों की देखभाल के बारे में अनुसंधान पर ध्यान केंद्रित कर रहा है । विशेष रूप से, यह मानसिक उम्र बढ़ने, इसे प्रभावित करने वाले सामाजिक और व्यवहार कारकों, और जीव विज्ञान और विकृति अंतर्निहित उम्र-निर्भर न्यूरोकॉग्निटिव विकारों (एनसीडी) का अध्ययन करने पर केंद्रित है। 2009 में, जीसी फाउंडेशन ने 1321 प्रतिभागियों के साथ एक नया देशांतर अध्ययन शुरू किया (1644 पात्र विषयों में से: 80.3% की प्रारंभिक प्रतिक्रिया दर) 1935 और 1939 के बीच पैदा हुआ (70-75 वर्ष के बीच आयु वर्ग), कोकेशियान जातीयता का, एक ही छोटे भौगोलिक क्षेत्र में रहते हैं। इस अध्ययन को InveCe.Ab (Invecchiamento Cerebrale Abbiategrasso;अंग्रेजी में: ब्रेन एजिंग Abbiategrasso, ClinicalTrials.gov, NCT01345110) कहा जाता था और वर्तमान में चल रहा है । InveCe.Ab को अधिकतम एकरूपता और कम से कम परिवर्तनशीलता के साथ एक पलटन प्राप्त करने की योजना बनाई गई है ताकि डिमेंशिया की घटनाओं, व्यापकता और प्राकृतिक इतिहास का आकलन किया जा सके, साथ ही इसके संभावित जोखिम या सुरक्षात्मक कारकों के साथ, जिसमें व्यवहार, मनोसामाजिक, नैदानिक और जैविक चर36शामिल हैं। पलटन की विशेषताएं चित्रा 1 और तालिका 1में दिखाई गई हैं। महामारी विज्ञान के आंकड़े यूरोपीय आबादी३७, ३८,38 और InveCe.Ab प्रतिभागियों में मनोभ्रंश प्रवृत्ति के अनुरूप हैं, जो सामान्य उम्र बढ़ने से न्यूरोकॉग्निटिव विकारों तक प्रक्षेपवक्र का अध्ययन करने के लिए एक अच्छे मॉडल का प्रतिनिधित्व करते हैं । दरअसल, सजातीय आबादी को पर्याप्त सांख्यिकीय शक्ति तक पहुंचने के लिए कम विषयों की आवश्यकता होती है । InveCe.Ab पद्धति पहले से ही कहीं और३६ की सूचना दी गई है, लेकिन यह आवधिक जांच के माध्यम से अपने बहुआयामी दृष्टिकोण को रेखांकित करने के लिए महत्वपूर्ण है (हर 2-3 साल) सहित मूल्यांकन के एक ही सेट का उपयोग कर: रक्त नमूना (मेटाबोलिक पैनल, होमोसिस्टीन और विटामिन, डीएनए निष्कर्षण प्रोफाइल Apolipoprotein ई (APOE) और अनुभूति और उंर बढ़ने से संबंधित अन्य आनुवंशिक बहुरूपता), मानववंशीय माप (वजन, ऊंचाई और कमर), बात करते हुए परीक्षण (दोहरी कार्य परीक्षण), मूल्यांकन जीवन शैली (भूमध्य आहार पालन, शारीरिक गतिविधि और संज्ञानात्मक सगाई के स्तर) और सामाजिक कारकों (सामाजिक भागीदारी, अकेलापन), एक न्यूरोप्सी इस तरह के देशांतर डेटा की तुलना पोस्टमॉर्टम न्यूरोपैथोलॉजिकल डेटा से करना शोध के लिए महत्वपूर्ण होगा । इसलिए, हमारी टीम और विशेष रूप से डॉ मिशेला मंजीरी ने ऊपर उल्लिखित न्यूरोपैथोलॉजिकल दृष्टिकोण की कल्पना की। २०१४ के बाद से और दूसरे अनुवर्ती के दौरान, InveCe.Ab प्रतिभागियों को अपने दिमाग दान करने के लिए कहा गया था, और इस तरह Abbiategrasso ब्रेन बैंक (एबीबी)के जंम के बारे में लाने । एबीबी के मुख्य दानदाता InveCe.Ab प्रतिभागी हैं लेकिन एबीबी अब अन्य स्वयंसेवक दानदाताओं के लिए खुला है । वे एएसपी गोलगी-रेडेली के मरीज हैं, जो विभिन्न न्यूरोलॉजिकल बीमारियों या वयस्क स्वयंसेवकों से पीड़ित कई रोगियों के लिए घर हैं जो एबीबी परियोजना के बारे में सीखते हैं और एक ही भौगोलिक क्षेत्र (Abbiategrasso और परिवेश) से संबंधित हैं । सभी दानदाताओं को एक ही मूल्यांकन प्रोटोकॉल से गुजरना पड़ता है।
लेखक सामान्य उम्र बढ़ने के व्यक्तिगत प्रक्षेप-पथ और एनसीडी की संभावित प्रगति को ट्रैक करने और ऐसे दानदाताओं से प्राप्त दिमाग को सही ढंग से प्रबंधित करने, संसाधित करने और इसके लिए एक विधि का प्रस्ताव करते हैं। इसके अलावा, हमारा उद्देश्य मस्तिष्क की भलाई के बारे में आवधिक न्यूरोलॉजिकल आकलन, सेमिनार और शैक्षिक गतिविधियों में व्यक्तियों से मिलना और संलग्न करना और अनुसंधान उद्देश्यों के लिए मस्तिष्क दान के बारे में उनकी जागरूकता बढ़ाना है।
प्रोटोकॉल में महत्वपूर्ण कदम
हमारा उद्देश्य देशांतर अवलोकन से प्राप्त विस्तृत इतिहास के साथ विषयों से आने वाले अच्छी गुणवत्ता वाले ऊतकों को प्राप्त करना, विशेषता और संग्रहीत करना है। इस लक्ष्य तक पहुंचने के लिए, निम्नलिखित प्रमुख पहलुओं से निपटना आवश्यक है। जैसा कि ऊपर वर्णित है, प्रोटोकॉल दानदाताओं की भर्ती के साथ शुरू होता है, जो पहला महत्वपूर्ण कदम है । फिर, यह आवश्यक है कि दानदाता अनुवर्ती कार्यक्रम जारी रखें और मस्तिष्क के वास्तविक दान तक समय के साथ परियोजना के आसंजन को बनाए रखें। मौत के समय एबीबी स्टाफ के लिए यह जरूरी है कि पर्याप्त टिश्यू क्वालिटी के लिए महत्वपूर्ण होने के नाते 24 घंटे के भीतर ऑटोप्सी टीम को बुलाने के लिए तुरंत अधिसूचित किया जाए । मस्तिष्क गोलार्द्धों के ताजा काटने के लिए एक स्थिर हाथ और एक विशिष्ट प्रशिक्षण की आवश्यकता होती है। धीमी ठंड के कारण सेलुलर क्षति से बचने और क्रायोस्टेट और ओमिक्स के लिए अच्छी गुणवत्ता वाले स्लाइस प्राप्त करने के लिए, यह महत्वपूर्ण है कि वे जल्दी जमे हुए हैं। फॉर्मेलिन समाधान (1 मिमी/घंटा) के प्रवेश की गति को ध्यान में रखते हुए, ऊतक एंटीजेनिटी को संरक्षित करने के लिए एकल स्लाइस के भिगोने वाले समय को अपने न्यूनतम रखा जाता है।
विधि का निवारण
ऊपर उल्लिखित महत्वपूर्ण चरणों को संबोधित करने के लिए हम निम्नलिखित दृष्टिकोण प्रदान करते हैं। दाता भर्ती और अनुवर्ती अप करने के लिए पालन: ऐसे कई कारक हैं जो शरीर के आंकड़े, शुद्धता और अखंडता को नुकसान पहुंचाने की आशंका या मृत्यु के बाद दर्द महसूस करने की संभावना सहित मस्तिष्क दान में बाधा डालते हैं। कुछ लोगों को इस बात की भी चिंता है कि शव परीक्षण किया जा सकता है, जबकि वे अभी भी जीवित हैं70,71. अंतिम संस्कार की व्यवस्था में व्यवधान और वित्तीय बोझ के बारे में चिंताएं भीमौजूदहैं । इसके अलावा, पोस्टमॉर्टम प्रक्रियाओं के बारे में ज्ञान की एक चिकित्सा कर्मियों की कमी और संभावित दाताओं या उनके NOK की चिंताओं को दूर करने में असमर्थता पंजीकरण को हतोत्साहित कर सकते हैं । इन सभी कारकों नामांकित प्रतिभागियों की एक कम संख्या और समय के साथ दाता हानि की एक उच्च संभावना के साथ जागरूकता का एक कम स्तर का उत्पादन कर सकते हैं । दरअसल, दाता भर्ती कार्यक्रम जागरूकता फैलाने, विश्वास पैदा करने और लोगों को पंजीकरण और अनुवर्ती भागीदारी की उच्च दरों को बनाए रखने के लिए समझाने में कुशल होना चाहिए । हमारे अनुभव में, यह संभावित दानदाताओं के सावधानीपूर्वक चयन और बीबी के उद्देश्यों की पूरी व्याख्या के माध्यम से किया जाता है। हम शैक्षिक गतिविधियों और एक सहानुभूति दोनों स्वस्थ लोगों और न्यूरोडीजेनेरेटिव रोगों और उनके परिवारों से प्रभावित लोगों की आशंका और जरूरतों को संबोधित दृष्टिकोण प्रदान करते हैं । हम पाते है कि संभावित दाताओं और अधिक अपनी सहमति देने की संभावना है जब व्यक्ति में संपर्क किया । आमने-सामने का दृष्टिकोण आपसी विश्वास और सम्मान के आधार पर एक संबंध बनाता है जो मस्तिष्क दान और अनुवर्ती आकलन के लिए पंजीकरण का एक उच्च प्रतिशत प्राप्त करने के लिए मौलिक है । नैतिकता की एक मजबूत भावना के साथ एक उच्च प्रशिक्षित स्टाफ पहले संभावित दाता दृष्टिकोण, मौत के बाद मस्तिष्क दान की संभावना पर चर्चा, न्यूरोसाइंटिफिक अनुसंधान के लिए मानव मस्तिष्क के ऊतकों के मूल्य बताते हैं, और पोस्टमॉर्टम प्रक्रियाओं के बारे में किसी भी संदेह को स्पष्ट करता है । मुंह के अनुकूल शब्द भी उतना ही महत्वपूर्ण है। मस्तिष्क संचयन के बाद, शव को फिर से संकलित करने के लिए उचित ध्यान और देखभाल दी जाती है। शव का धीरे-धीरे इलाज कराकर मृत व्यक्ति के प्रति सम्मान और कृतज्ञता दिखाना जरूरी है। कुछ महीनों बाद, परिवार के सदस्यों द्वारा अनुरोध किए जाने पर न्यूरोपैथोलॉजिकल विश्लेषण के परिणामों को संवाद करने के लिए एक बैठक निर्धारित की जाती है।
मृत्यु और मस्तिष्क संचयन का समय: जब व्यक्ति स्वीकार करता है, तो वे दाता बन जाते हैं और 24 घंटे/दिन, 7 दिन/सप्ताह (एएसपी गोलगी-रेडेली जराचिकित्सा अस्पताल का रिसेप्शन नंबर जो हमसे जुड़ा हुआ है) से संपर्क करने के लिए एक नंबर के साथ एक पहचान पत्र दिया जाता है । इसके अलावा, अस्पताल में भर्ती होने की स्थिति में उपयोग किए जाने वाले रिश्तेदारों को चिपकने वाला टैग दिया जाता है। क्षेत्र की अंतिम संस्कार एजेंसियों को पहले शव को एबीबी सुविधाओं में लाने के लिए सूचित किया गया था, जहां शव परीक्षण टीम को बुलाया जाता है । ऑटोप्सी टीम एक पैथोलॉजिस्ट, एक न्यूरोलॉजिस्ट और/या एक न्यूरोबायोलॉजिस्ट, और एक शारीरिक कक्ष तकनीशियन से बना है, जो हर दिन सुबह 6 बजे से 11 बजे तक कॉल पर हैं; कुछ प्रशिक्षु छात्रों को भी अक्सर सहायता और तस्वीरें लेने के लिए मौजूद हैं ।
ताजा काटने की प्रक्रियाओं की सटीकता और स्थिरता एक ही दो ऑपरेटरों (एक न्यूरोलॉजिस्ट और एक पैथोलॉजिस्ट) की भागीदारी से सुनिश्चित की जाती है जिन्होंने विधि विकसित की है और न्यूरोपैथोलॉजी में कई वर्षों का अनुभव है। जब स्लाइस ठंड, वे एक पूर्वजनित एल्यूमीनियम ट्रे पर डाल रहे है और एक इंटरलॉकिंग एल्यूमीनियम प्लेट के साथ कवर करने के लिए उंहें अच्छी तरह से फ्लैट रखने के लिए । इसके तुरंत बाद, उन्हें -80 डिग्री सेल्सियस पर भंडारण करने से पहले, 3 मिनट के लिए तरल नाइट्रोजन में डाल दिया जाता है। तय किए जाने वाले स्लाइस को व्यक्तिगत रूप से धुंध में लपेटा जाता है, और 10% फॉस्फेट बफर फॉर्मेलिन समाधान में भिगोया जाता है, जिसे एक दिन के बाद प्रतिस्थापित किया जाता है। बाद में, उन्हें 5 अतिरिक्त दिनों से अधिक नहीं औपचारिक रूप से रखा जाता है; हालांकि, यह देखते हुए कि फॉर्मेलिन समाधान 1 मिमी/दिन में प्रवेश करता है, हम भिगोने वाले समय को और छोटा करना चाहते हैं।
विधि की सीमाएं
यहां वर्णित अनुसंधान विधि केवल एक सीमित भौगोलिक क्षेत्र को शामिल करती है, और दान कार्यक्रम में शामिल व्यक्तियों के पास विशेषताएं होती हैं जो पूरी तरह से सामान्य आबादी का प्रतिनिधित्व नहीं करती हैं। हालांकि स्वीकार्य से अधिक, 24 घंटे तक एक पोस्टमॉर्टम अंतराल कुछ प्रोटीन संरचनाओं, एंजाइमों और मस्तिष्क के ऊतकों के आरएनए में परिवर्तन का उत्पादन कर सकते हैं । एएफएस और पीएच का निर्धारण ऊतक गुणवत्ता73 का निर्धारण करने के लिए पूरी तरह से पर्याप्त नहीं हो सकता है और हम आरएनए अखंडता के आधार पर ऊतक की गुणवत्ता को प्रमाणित करने के अन्य तरीके विकसित कर रहे हैं।
माइक्रोटोम काटने की प्रक्रिया के संबंध में, हालांकि शारीरिक संबंधों के पुनर्निर्माण के लिए बहुत उपयोगी है, यह ध्यान दिया जाना चाहिए कि मैक्रोसेक्शन का उपयोग सरल नहीं है और कुछ तकनीकी कठिनाइयों को प्रस्तुत करता है। हमारी विधि चुनौतीपूर्ण और समय लेने वाली है। लागत काफी अधिक है और धन हमेशा आसान नहीं है । धन मुख्य रूप से सार्वजनिक (एएसपी गोलगी-रेडेली जेरियाट्रिक अस्पताल) और निजी संसाधनों (गोलगी-सेन्सी फाउंडेशन), निजी दान, गैर-लाभकारी संगठनों (जैसे “फेडराज़ीन अल्जाइमर इटालिया” से आता है) और अनुदान भागीदारी।
मौजूदा/वैकल्पिक तरीकों के संबंध में एबीबी विधि का महत्व
शुरुआत में, हमारे मस्तिष्क दान कार्यक्रम InveCe.Ab देशांतर अध्ययन में भाग लेने वाले व्यक्तियों को लक्षित किया । नतीजतन, दान किए गए दिमाग वर्षों में एकत्र किए गए विस्तृत नैदानिक, जैविक और सामाजिक जानकारी के साथ होते हैं। एबीबी की ताकत इस विशिष्ट मूल से ठीक निकला है । दरअसल, सामाजिक और आनुवंशिक रूप से संबंधित लोगों के एक समूह का अध्ययन जो जैविक विशेषताओं और पर्यावरण जोखिम साझा सांख्यिकीय विश्लेषण को बढ़ाता है । इसके अलावा, अध्ययन में निम्नलिखित लाभ शामिल हैं: 1) समुदाय की जरूरतों की देखभाल और प्रदान करना (“पूछने से पहले देने” का कार्य): लोगों को एक मुफ्त आवधिक जांच प्राप्त होती है जिसमें सामान्य व्यवसायी को सूचित किया जाता है, हमारे सचिव का एक टेलीफोन नंबर परामर्श के लिए प्रदान किया जाता है, और गंभीर रूप से विकलांग लोगों को घर पर दौरा किया जाता है; 2) प्रतिभागियों को उलझाने, सार्वजनिक भूमिकाओं और आवधिक सेमिनारों (मस्तिष्क स्वास्थ्य, मस्तिष्क दान और सामान्य स्वास्थ्य से संबंधित) के संगठन के माध्यम से शैक्षिक गतिविधियों में सामान्य चिकित्सकों के साथ लोगों को उलझाने, और विषयगत पाठ्यक्रमों की योजना (जैसे बुजुर्गों के लिए सूचना प्रौद्योगिकी उपकरणों का उपयोग); 3) लोगों से मिलना और आमने-सामने का नजरिया अपनाना। ये सभी तत्व एबीबी परियोजना की ताकत का गठन करते हैं । इसके अलावा, परियोजना शामिल चिकित्सा कर्मियों की नैदानिक क्षमताओं में सुधार करती है, क्योंकि वे दोनों एंटेमोरमेम असेसमेंट और पोस्टमॉर्टम न्यूरोपैथोलॉजिकल मूल्यांकनों में अनुभव प्राप्त करते हैं। इस संबंध में, हम अल्पसंख्यक वृद्धावस्था अनुसंधान अध्ययन के बहुत ही विचित्र अनुभव का उल्लेख करना चाहेंगे । इस अध्ययन में शिकागो क्षेत्र में रहने वाले अफ्रीकी अमेरिकियों की एक सीमित और चयनित संख्या शामिल थी (1,357 पात्र विषयों में से 784: 57% की प्रतिक्रिया दर)। प्रतिभागियों को सालाना घर पर जाकर ब्रेन डोनेशन प्रोग्राम में शामिल होने के लिए कहा गया । यह अध्ययन मस्तिष्क दान कार्यक्रम (७८४ प्रतिभागियों में से ३५२ दानदाताओं नामांकित किया गया: ४४%), हालांकि शव परीक्षण दर काफी संतोषजनक (५३%)७४नहीं था के लिए सकारात्मक प्रतिक्रिया के उच्च प्रतिशत प्राप्त करने के लिए हमारे लिए कुछ समानताएं प्राप्त करने के साथ एक असामान्य दृष्टिकोण पर आधारित है । “अल्पसंख्यक उम्र बढ़ने अनुसंधान अध्ययन” की तरह, हम शैक्षिक गतिविधियों और एक सहानुभूति दृष्टिकोण प्रदान करते हैं, उत्कृष्ट परिणाम प्राप्त करते हैं। विशेष रूप से, हमारी प्रतिक्रिया दर 93% है, नामांकन प्रतिशत 28.7% है, और इस समय ऑटोप्सी दर 67% है। इन दरों से पता चलता है कि परियोजनाओं को सीधे लोगों को उलझाने दान का एक अधिक पर्याप्त प्रतिशत है । अन्य मस्तिष्क दान कार्यक्रम, संभावित दानदाताओं के साथ संबंध बनाने में कम ध्यान देने के साथ, आम तौर पर कम नामांकन प्रतिशत होता है, लगभग 10-15% या उससे कम73,,75होता है।
न्यूरोपैथोलॉजिकल विश्लेषण के साथ कुछ पिछले पलटन अध्ययन समाप्त होते हैं। इसके अलावा, मस्तिष्क बैंकों और भंडार के बहुमत रोग केंद्रित है और वहां स्वस्थ दाताओं से “नियंत्रण” दिमाग की कमी है “रोगग्रस्त” दिमाग की संख्या की तुलना में । केवल सीमित संख्या में बीबीएस जनसंख्या अध्ययनों पर आधारित होते हैं , जिनमें रोगग्रस्त और सामान्य दोनों विषय होते हैं ताकि वृद्धावस्था पथ73 , 74,76 , 77,78,79,,8079का80अध्ययन किया जा सके . संयुक्त राज्य अमेरिका74 में “अल्पसंख्यक उम्र बढ़ने अनुसंधान अध्ययन” और फिनलैंड76 में “द वैंटा 85 + अध्ययन” जैसे कुछ अध्ययन हमारे समान हैं लेकिन वे पलटन की समाप्ति के साथ बाहर निकलते हैं। इसके बजाय, एबीबी के दान कार्यक्रम को भविष्य में एक लंबे समय के लिए जारी रखने के अनुरूप है, संभावित दाताओं को सूचीबद्ध करने और InveCe.Ab देशांतर अध्ययन के अंत के बाद भी अनुवर्ती कार्यक्रम निर्धारित करना । यह दृष्टिकोण हमारी भर्ती विधि “सूर्य स्वास्थ्य अनुसंधान संस्थान (श्री) मस्तिष्क दान कार्यक्रम” जो एक सेवानिवृत्ति समुदाय७३के उद्देश्य से है के समान बनाता है । मस्तिष्क दान के लिए श्री प्रोटोकॉल दुनिया में सबसे कम मतलब पोस्टमॉर्टम अंतराल (3.92 घंटे) के साथ बहुत कुशल है। दुनिया के सबसे बड़े बीबीएस के समान, श्री प्रोटोकॉल ने मिडलाइन (सैसिटल प्लेन) में सेरेब्रम, सेरिबैलम और ब्रेनस्टेम को काट दिया, फिर एक आधा ताजा विच्छेदित किया जाता है और जैव रासायनिक अध्ययन के लिए जमे हुए होता है, जबकि दूसरा हिस्टोपैथोलॉजिकल मूल्यांकन के लिए फॉर्मेलिन में तय किया जाता है। हालांकि, श्री विच्छेदन प्रोटोकॉल की ताकत में से एक पूरे गोलार्द्ध के बजाय व्यक्तिगत स्लाइस का निर्धारण है। दरअसल, सतह और कोर के बीच विभिन्न निर्धारण ढाल के कारण, पूरे गोलार्द्ध को स्थिर करना इष्टतम नहीं है। इसके अलावा, कॉर्टिकल प्रोटीन फॉर्मेलिन समाधान के लंबे समय तक संपर्क में रहने से प्रभावित हो सकते हैं। इस प्रकार, कारण है कि हम व्यक्तिगत स्लाइस को ठीक करने का फैसला किया।
निर्णय जो पक्ष तय या जमे हुए है, एकवचन बैंक पर निर्भर करता है (हमेशा एक ही, बेतरतीब ढंग से सौंपा या सौंपा के आधार पर कि विच्छेदन का दिन अजीब है या भी)31,,32, 33,,34,,35.33, इसलिए, प्रत्येक गोलार्द्ध पर जैव रासायनिक और हिस्टोपैथोलॉजिकल विश्लेषण अलग से आयोजित किया जाता है। जैसा कि कई न्यूरोलॉजिकल बीमारियां विषम हैं, हमारी बीबी ताजा नमूनों को टुकड़ा करने के लिए एक अनूठा प्रोटोकॉल प्रदान करती है: ब्रेनस्टेम से वैकल्पिक वर्ग और सेरिबैलम और सेरेब्रम के प्रत्येक गोलार्द्ध से निश्चित या जमे हुए सामग्री के रूप में बनाए रखा जाता है; एक गोलार्द्ध पर एक निश्चित टुकड़ा दूसरे गोलार्द्ध पर जमे हुए एक से मेल खाता है। हमारी विधि सभी जमे हुए सामग्री का एक पूर्ण हिस्टोलॉजिकल लक्षण वर्णन प्राप्त करने और दोनों पक्षों के सभी क्षेत्रों से परिणामों की तुलना करने का अवसर देती है। जैसा कि परिचय में कहा गया है, वर्णित विधि हमें मस्तिष्क के ऊतकों से यथासंभव अधिक से अधिक जानकारी प्राप्त करने की अनुमति देती है। इसके अलावा, एबीबी की विधि लगभग सभी ज्ञात मस्तिष्क प्रोटीनोपैथी और संवहनी विकृति सहित एक बुनियादी लेकिन पूर्ण न्यूरोपैथोलॉजिकल लक्षण वर्णन करती है। संज्ञानात्मक हानि निर्धारित करने में संवहनी चोटों की विवादास्पद भूमिका के कारण, हमने संवहनी भार30,,53के लिए डबल स्कोरिंग का उपयोग करने का निर्णय लिया।
जैसा कि प्रोटोकॉल में बताया गया है, हम एक बहुविषयक दृष्टिकोण का उपयोग करते हैं। हालांकि यह एक समय लेने वाली और परिश्रम विधि है, हमारा मानना है कि यह अनुसंधान के लिए कई फायदे प्रदान करता है । उदाहरण के लिए, पिछले काम में, हमने यह प्रदर्शित किया कि एपीओई-ε4 एलील से जुड़े उच्च tHcy प्रति से, या एमटीएचएफआर C677T टीटी, स्मृति हानि81के बजाय कार्यकारी डिस्फंक्शन से संबंधित हो सकते हैं। इसलिए, न्यूरोपैथोलॉजिकल स्तर पर इस विशेष आनुवंशिक प्रोफ़ाइल वाले विषयों का मूल्यांकन करना दिलचस्प हो सकता है। यह एक उदाहरण है कि कैसे इस तरह के गहन अनुवर्ती हमारे बैंक में एकत्र जैविक सामग्री की जांच के माध्यम से सत्यापन योग्य नए अनुसंधान परिकल्पना बनाने में उपयोगी है । हमारे दृष्टिकोण के लाभ का एक और प्रदर्शन मूल्यांकन हम नियमित रूप से प्रदर्शन के बीच QEEG के शामिल किए जाने, अपनी मौलिकता और उपयोग की सापेक्ष आसानी के लिए है । दरअसल, ईईजी कॉर्टिकल पिरामिड न्यूरॉन्स82से संबंधित डेन्ड्राइट्स की विद्युत क्षमता को रिकॉर्ड करके सेरेब्रल कॉर्टेक्स की सिनैप्टिक गतिविधि का पता लगाता है। क्यूईईजी को कॉर्टिकल सिनैप्टिक गतिविधि के आकलन के लिए बायोमार्कर माना जा सकता है जो अनुभूति83से संबंधित है। विशेष रूप से, मस्तिष्क के पीछे के हिस्से में अल्फा लय में कमी कम आवृत्तियों (थीटा और डेल्टा लय) की सामान्य वृद्धि के साथ कॉर्टिकल कनेक्शन टूटने से संबंधित रही है। यह विचार किया जाना चाहिए कि अधिकांश नैदानिक सहसंबंध अध्ययन एक नैदानिक निदान पर आधारित हैं जो केवल एक संभावित है और एक निश्चित निदान नहीं है84,85 ,86,,87.86 क्यूईईजी और एलटीएस वेरिएंट88 , 89,के बीच सहसंबंध और एफटीएलडी और एडी83के बीच83अंतर की जांच करने के लिए केवल बहुत कम लक्षित अध्ययनों ने क्यूईजी डेटा की तुलना न्यूरोपैथोलॉजिकल पिक्चर से की है । न्यूरोपैथोलॉजिकल निदान की परिभाषा के साथ हमारे अध्ययन को समाप्त करके, मस्तिष्क विद्युत गतिविधि पर की गई टिप्पणियों की सही व्याख्या करना संभव है। इसके अलावा, प्रत्येक विषय में धारावाहिक QEEG प्रदर्शन हम अंतर-व्यक्तिगत ईईजी तरंगों प्रक्षेपवक्र और न्यूरोपैथोलॉजिकल तस्वीर के साथ उनके सहसंबंधों को ट्रैक कर सकते हैं। समय के साथ कॉर्टिकल विद्युत गतिविधि के व्यक्तिगत संशोधनों के बाद प्रारंभिक मनोभ्रंश के लिए एक बायोमार्कर के रूप में इसके अर्थ की बेहतर समझ हो सकती है।
भविष्य के अनुप्रयोगों और विधि की दिशा
ऊतक वितरण को लागू करना हमारे मुख्य संभावित लक्ष्यों में से एक है। ऐसा करने के लिए, हमने जीसी फाउंडेशन (जराचिकित्सा) के निदेशक, पाविया विश्वविद्यालय से न्यूरोलॉजी के अकादमिक, जीसी फाउंडेशन और जेरियाट्रिक अस्पताल एएसपी गोलगी-रेडेली दोनों से न्यूरोलॉजी के एक अकादमिक सहित एक वैज्ञानिक आयोग की स्थापना की। मस्तिष्क के ऊतकों, हिस्टोलॉजिकल स्लाइड्स और अन्य जैविक नमूनों का वितरण करते समय, यह याद रखना महत्वपूर्ण है कि दानदाता अनुसंधान के लिए दान के लिए सहमत हुए। इसलिए सामग्री का वितरण विवेकपूर्ण ढंग से होना चाहिए, जैसा कि बीएनई आचार संहिता४०में वर्णित है । सामग्री के लिए अनुरोध प्रस्तुत करने वाले किसी भी पक्ष को आवश्यक नमूने के प्रकार और मात्रा का संकेत देना चाहिए, अनुसंधान परियोजना का विवरण प्रदान करना चाहिए और नमूनों का उपयोग कैसे किया जाएगा, और जब भी संभव हो, पिछले प्रकाशनों के सबूत की आपूर्ति (स्थानांतरण समझौते के लिए, चित्रा 9देखें)। ब्रेन बैंक वित्तीय लाभ के लिए काम नहीं करता है। इसलिए, शोधकर्ताओं द्वारा भुगतान की गई फीस केवल ऊतक खरीद, प्रसंस्करण, भंडारण और वितरण के खर्चों को कवर करना चाहिए।
एक्सोम अनुक्रमण और ओमिक्स तकनीकों जैसे प्रोटेओमिक्स और ट्रांसक्रिप्टोमिक्स के साथ मामलों का विश्लेषण शुरू करने की योजना गति में हैं। हमारी वैकल्पिक नमूना पद्धति ओमिक्स अध्ययन दोनों गोलार्द्धों से हिस्टोलॉजिकल रूप से अच्छी तरह से परिभाषित ऊतकों पर प्रदर्शन करने की अनुमति देगी। इस दृष्टिकोण के माध्यम से, एक ही गोलार्द्ध के विभिन्न मस्तिष्क क्षेत्रों में और अन्य गोलार्द्ध के संबंधित क्षेत्रों में जीन सक्रियण के पैटर्न की तुलना करना संभव होगा, और हिस्टोपैथोलॉजी के साथ जीन सक्रियण को सहसंबंधित करने में सक्षम होगा। इस क्षेत्र में, डीप लर्निंग एप्लीकेशंस बहुत रुचि रखते हैं, जिनमें हिस्टोलॉजिकल स्लाइड्स का कंप्यूटरीकृत विश्लेषण और क्लीनिकल, हिस्टोलॉजिकल और ओमिक्स डेटा का अत्याधुनिक सहसंबंध शामिल है । कई अलग-अलग चरों के साथ-साथ अन्य संभावित तकनीकी अनुप्रयोगों के बीच अन्य सहसंबंधों की पहचान की जा सकती है। दोनों गोलार्द्धों से जमे हुए सामग्री की उपलब्धता जीन सक्रियण और प्रोटीन वितरण की एक सटीक स्थलाकृति की अनुमति देगा । यह स्वस्थ विषयों में भी विशेष रुचि का होगा, यह देखते हुए कि मस्तिष्क के कार्यों और कुछ बीमारियों दोनों विषम हैं।
इसके अलावा, हम अच्छी तरह से विशेषता मस्तिष्क दाताओं से सेल संस्कृतियों प्राप्त कर सकते हैं । दरअसल, काटे गए दिमाग के लेप्टोमेनिंग्स से सेल संस्कृतियां जीवित कोशिकाओं की आपूर्ति करती हैं जिनका उपयोग रोग या उम्र बढ़ने के तंत्र की आगे की जांच के लिए किया जा सकता है, प्रेरित प्लुरिपोटेंट स्टेम सेल (आईपीएससी) तकनीक के माध्यम से जिसमें लेएटोमेनेल फाइब्रोब्लास्ट को फिर से प्रोग्राम करना और उन्हें उन्नत मॉडल90में तंत्रिका कोशिकाओं में अंतर करना शामिल है।
दिमाग की उम्र के रूप में, परिवर्तन के विभिन्न प्रोफाइल आणविक, सेलुलर और ऊतक स्तर पर हो सकते हैं। हर मस्तिष्क अद्वितीय है। प्रत्येक आंतरिक और बाहरी तनाव का जवाब देने का अपना तरीका है; कुछ विरोध करते हैं जबकि अन्य झुकते हैं और अलग विकृतियों को प्रदर्शित करते हैं। नैदानिक प्रस्तुति और न्यूरोपैथोलॉजिकल चित्र के बीच विसंगतियां अक्सर मौजूद होती हैं क्योंकि घावों की स्थलाकृति, उनकी आणविक प्रकृति के बजाय, नैदानिक प्रस्तुति निर्धारित करती है। सही और निश्चित निदान केवल न्यूरोपैथोलॉजिकल निष्कर्षों के साथ नैदानिक सिंड्रोम के संयोजन से प्राप्त किया जा सकता है जो अक्सर रोगों के रोगजनकों को जानने के लिए आवश्यक महत्वपूर्ण एटियोलॉजिकल सुराग जोड़ते हैं। यूरोप में, न्यूरोपैथोलॉजिकल निदान के लिए एक मानक दृष्टिकोण बनाने का प्रयास है। हमारा नैदानिक प्रोटोकॉल मस्तिष्क बैंकिंग91के लिए न्यूरोपैथोलॉजिकल निदान पर हाल ही में प्रकाशित दिशा – निर्देशों का लगभग पूरी तरह से पालन करता है। यह हमें पहले इतालवी ब्रेन बैंक की स्थापना के संभावित लक्ष्य के साथ, अच्छी तरह से प्रलेखित मस्तिष्क ऊतक को इकट्ठा करने और साझा करने की अनुमति देगा। दरअसल, इटली में मस्तिष्क भंडार नहीं बल्कि पलटन अध्ययनों के आधार पर मस्तिष्क बैंक हैं। हमारा उद्देश्य मस्तिष्क ऊतक संचयन के लिए एक विधि विकसित करना है जिसे मोटे तौर पर इटली भर में लागू किया जा सकता है, एक नेटवर्क स्थापित करना है जो एक आम प्रोटोकॉल का उपयोग करता है और तुलनीय सामग्री साझा करता है। ऐसा करने के लिए, अन्य अनुसंधान केंद्रों की भागीदारी और एक विशिष्ट वेबसाइट का निर्माण भविष्य के लिए मुख्य उद्देश्यों में से एक है।
न्यूरोडीजेनेरेटिव रोगों की आणविक प्रकृति के विश्लेषण और बायोमार्कर पहचान के लिए अभिनव प्रौद्योगिकियों का लगातार उपयोग किया जा रहा है। इस संदर्भ में, अनुदैर्ध्य अध्ययनों के माध्यम से प्राप्त संज्ञानात्मक और वृद्धावस्था प्रक्षेप पथ के बारे में जानकारी के साथ दिमाग की आवश्यकता बढ़ जाएगी, जो न्यूरोपैथोलॉजिकल रूप से सत्यापित महामारी विज्ञान दृष्टिकोण92के महत्व पर बल देगी।
The authors have nothing to disclose.
हम इस कार्य को डॉ एसएसए मिशेला मंजीरी को समर्पित करना चाहते हैं । इससे पहले कि वह समय से पहले मर गया, वह कल्पना की और Abbiategrasso ब्रेन बैंक परियोजना शुरू कर दिया ।
हम अपने मस्तिष्क दाताओं, जो उदारता से अपने शरीर के सबसे महान अंग दान अनुसंधान के लिए योगदान कर रहे है के लिए आभारी हैं; उनके बिना यह शोध संभव नहीं होगा।
हम एबीबी परियोजना में अपने बहुमूल्य काम के लिए वेलेरिया मरजागली के आभारी हैं ।
लेखक प्रो जोहानेस एटम्स, डॉ पाओलो फोसियानी और डॉ जियोर्जियो गियाकोन को उनके बहुमूल्य मार्गदर्शन और बुद्धिमान सलाह के लिए धन्यवाद देते हैं ।
हम परियोजना के दौरान उनकी बहुमूल्य मदद के लिए डॉ एसएसए एलिस सिर्रिनसिओन और मिस गिउलिया बोरटोन का शुक्रिया अदा करना चाहेंगे ।
उनके समर्थन के लिए श्रीमती तेरे Cassani के लिए कई धंयवाद और अपने सहयोग के लिए “Federazione अल्जाइमर इटालिया” ।
लेखक पाविया विश्वविद्यालय के जन स्वास्थ्य, प्रायोगिक और फोरेंसिक मेडिसिन विभाग के डॉ माटेओ मोरेटी और प्रो एंटोनियो मार्को मारिया ओस्कुलिटी के आभारी हैं ।
50ml polypropilene conical tube 30x115mm | BD | 405253 | |
Anti-GFAP | Dako | Z0334 | policlonal primary antibody (anti-rabbit); dilution = 1:1000 |
Anti-NeuN (A60) | Chemicon | MAB377 | monoclonal primary antibody (anti-mouse); dilution = 1:1000 |
Anti-phospho TAU (AT8) | ThermoScientific | MN1020 | monoclonal primary antibody (anti-mouse); dilution = 1:200 |
Anti-phospho TDP-43 (pS409/410-2) | CosmoBio | TIP-PTD-P02 | policlonal primary antibody (anti-rabbit) ; dilution = 1:4000; pretreatment : Three step in microwave for 2 min-1 min-2 min with citrate buffer 0.01M pH 6 |
Anti-α-SYN (KM51) | Novocastra | NCL-L-ASYN | monoclonal primary antibody (anti-mouse); dilution = 1:500; pretreatment: 1) Three step in microwave for 2 min-1 min-2 min with citrate buffer 0.01M pH 6 ; 2) 70% formic acid in H2O for 10 min |
Anti-βamyloid (4G8) | BioLegend | 800703 | monoclonal primary antibody (anti-mouse); dilution = 1:1000; pretreatment : 70% formic acid in H2O for 10 min |
Cutting board | BD | 352070 | |
DMEM High Glucose | Carlo Erba | FA30WL0101500 | medium |
Electrical saw with 5d blade | CEA | 06.06.14/06.00.16 | |
Electrode pH measure surface 12mm | CEA | 70064.250 HHH | |
Electrode pH needle | Fisher Scientific | 11796338 | |
EnVision+System-HRP | Dako | K4001 | secondary antibody (anti-mouse); dilution 1:2 |
EnVision+System-HRP | Dako | K4003 | secondary antibody (anti-rabbit); dilution 1:2 |
Ethylether | SMI | 8401530 | |
Feather safety trimming knife blade 14cm | Fisher Scientific | 11749798 | |
Fetal Bovine Serum | Carlo Erba | FA30WS1810500 | medium supplement; dilution = 20% |
Forceps 15cm surgical or anatomical | Uvex | 500XG | |
Gloves | CEA | 01.28.14 | |
Glue | Arcobaleno | 2624000800002 | |
Head supporter | Lacor | 60456 | |
L-Glutamine (100X) | Carlo Erba | FA30WX0550100 | medium supplement; dilution = 1% |
Measuring tape | CEABIS | CEATA34 | |
Non adsorbable monofilament black polyamide | UHU Bostik | 8000053131470 | |
Non-Essential Amino Acids Solution (100X) | Life Technologies | 11140050 | medium supplement; dilution = 1% |
Pen/Strept Solution (100X) | Carlo Erba | FA30WL0022100 | medium supplement; dilution = 1% |
Spinal needle quincke tipe point 20GA 3.50IN 0.9x90mm | CEA | 03.06.16 | |
Sterile scalpel with n°21 blade | |||
Surgical basin | Olcelli Farmaceutica | A930857255 | |
Surgical mallet and surgical cisel | CEA | 79.68.88 | |
Surgical scissor | CEA | 27.08.45/79.68.64 | |
Feather | M130RC |