Un modèle murin Goldblatt modifié à 2 reins 1 clip (2K1C) a été développé en utilisant des tubes en polyuréthane pour initier une sténose de l’artère rénale, induisant une augmentation de l’expression de la rénine et des lésions rénales. Ici, nous décrivons une procédure détaillée de préparation et de placement du brassard sur l’artère rénale pour générer un modèle murin 2K1C reproductible et cohérent.
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Article de méthode
Un modèle modifié de régulation de la rénine dans la sténose de l’artère rénale
Dans cet article
Résumé
Résumé
La sténose de l’artère rénale est une affection fréquente chez les patients atteints d’une maladie coronarienne ou vasculaire périphérique où le système rénine-angiotensine aldostérone (RAAS) est suractivé. Dans ce contexte, il y a un rétrécissement des artères rénales qui stimule une augmentation de l’expression et de la libération de rénine, la protéase limitant le taux dans le SRAA. L’augmentation de l’expression de la rénine qui en résulte est un facteur connu d’hypertension rénovasculaire, fréquemment associée à des lésions rénales et à des lésions des organes terminaux. Ainsi, il y a un grand intérêt à développer de nouveaux traitements pour cette condition. Le mécanisme moléculaire et cellulaire du contrôle de la rénine dans la sténose de l’artère rénale n’est pas entièrement compris et justifie des recherches plus approfondies. Pour induire une sténose de l’artère rénale chez la souris, un modèle murin Goldblatt modifié à 2 reins 1 clip (2K1C) a été développé. Le rein droit a été sténosé chez des souris de type sauvage et des souris opérées de manière simulée ont été utilisées comme témoin. Après une sténose de l’artère rénale, nous avons déterminé l’expression de la rénine et les lésions rénales. Des reins ont été récoltés et des cortex frais ont été utilisés pour déterminer l’expression des protéines et de l’ARNm de la rénine. Ce modèle animal est reproductible et peut être utilisé pour étudier les réponses physiopathologiques, les voies moléculaires et cellulaires impliquées dans l’hypertension rénovasculaire et les lésions rénales.
Introduction
La sténose de l’artère rénale (RASténose) est un problème intraitable qui touche environ 6 % des personnes de plus de 65 ans et jusqu’à 40 % des personnes atteintes d’une maladie coronarienne ou vasculaire périphérique 1,2. Les traitements actuels de la maladie sont limités; par conséquent, il existe un besoin critique de développer de nouvelles thérapies pour traiter l’hypertension rénovasculaire ou l’hypertension résistante induite par la RASténose. Le système rénine-angiotensine aldostérone (SRAA) est la voie clé impliquée dans la pathogenèse de l’hypertension induite par RASténose ou de l’hypertension
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Protocole
Les souris ont été hébergées et soignées à la division des soins aux animaux du Vanderbilt University Medical Center (VUMC) conformément aux directives des National Institutes of Health (NIH) et au Guide for the Care and Use of Laboratory Animals du ministère américain de la Santé et des Services sociaux. Toutes les procédures relatives aux animaux ont été approuvées par le comité institutionnel de soin et d’utilisation des animaux de la VUMC avant le début des expériences.
1. Préparation et dissection des animaux
- Allumez le germinateur et la pompe à eau du coussin chauffant environ 30 minutes avant de commencer la chirurgie. ....
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Résultats
La constriction de l’artère rénale augmente l’expression de la rénine dans le rein sténosé tout en réprimant l’expression dans le rein controlatéral. Le modèle de sténose à deux reins (2K1C) ou Goldblatt induit une augmentation de l’expression de la rénine et des lésions rénales. Ceci est reconnu comme le meilleur modèle représentatif de sténose unilatérale de l’artère rénale chez l’homme.
L’expression de la rénine et de la prorénine (précurseur de la rénine) a été mesurée par immunobuvardage........
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Discussion
La sténose de l’artère rénale est une cause importante d’hypertension secondaire ou résistante et de lésions rénales 1,29. Le modèle Goldblatt à deux reins (2K1C) a été utilisé pour étudier l’hypertension rénovasculaire induite par RASténose 1,17,18,19. Un certain nombre d’études antérieures utilisant divers modèles animaux ont montré q.......
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Déclarations de divulgation
Aucun conflit d’intérêts, financier ou autre, n’est déclaré par les auteurs.
Remerciements
La recherche a été financée par la subvention de développement des chercheurs scientifiques de l’IBLNH (1K01HL135461-01) à JAG. Merci à David Carmona-Berrio et Isabel Adarve-Rengifo pour leur assistance technique.
....Accès restreint. Veuillez vous connecter ou commencer un essai pour afficher ce contenu.
Matériaux
| Nom | Entreprise | Numéro de catalogue | Commentaires |
|---|---|---|---|
| Diet Gel | Clear H2O | Diet-Gel 76A | Régime de récupération chirurgicale |
| EMC Heated Hard pad | Hallowell | 000A2788B | Les coussins chauffants ont été utilisés pour garder les souris au chaud |
| Ethilon Nylon Suture | Ethicon | 662G | 4-0 (1,5 métrique), Cette suture a été utilisée pour fermer le péritoine et la peau |
| Ethilon Suture en nylon | Ethicon | 2815 G | 8-0 (0,4 métrique), Cette suture a été utilisée pour fermer le brassard afin d’attacher et de resserrer l’artère |
| Germinator 500 | Braintree Scientific Inc. | GER 5287 | Stériliser les outils chirurgicaux entre les chirurgies |
| Kétoprofène | Zoetis | Ketofen | Analgésique |
| Polyuréthane | Braintree Scientific Inc. | MRE-025 | Ce tube a été utilisé pour initier la sténose |
| Povidone-iode antiseptique écouvillons | Medline | MDS093901 | Il a été appliqué après l’épilation et la chirurgie de la peau |
| Reflex 7 Clip Applier | Roboz Surgical Instrument Co | 204-1000 | Cet applicateur de clip a été utilisé pour appliquer un clip au cas où une ou plusieurs sutures se détacheraient |
| Draps de serviette | stériles Dynarex | 4410 | Il a été utilisé comme drap de lit pour les souris pendant la chirurgie |
| Pommade antibiotique triple | Medi-First | 22312 | |
| Pompe à eau | Stryker | T/pump Professionnels | Utilisé pour réchauffer et faire circuler l’eau dans le coussin dur chauffant pour garder les souris au chaud pendant et après la chirurgie |
Références
- Kashyap, S., et al. Blockade of CCR2 reduces macrophage influx and development of chronic renal damage in murine renovascular hypertension. American Journal of Physiology-Renal Physiology. 310 (5), 372-384 (2016).
- Wang, W., et al.
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Réimpressions et autorisations
