Renal arter darlığını başlatmak için poliüretan tüp kullanılarak modifiye edilmiş 2 böbrek 1 klips (2K1C) Goldblatt fare modeli geliştirildi ve renin ekspresyonunda ve böbrek hasarında artışa neden oldu. Burada, tekrarlanabilir ve tutarlı bir 2K1C fare modeli oluşturmak için manşetin renal arter üzerine hazırlanması ve yerleştirilmesi için ayrıntılı bir prosedür açıklıyoruz.
Bu içeriği görüntülemek için JoVE aboneliğiniz gereklidir. Giriş yapın veya ücretsiz denemenizi bugün başlatın.
Yöntem makalesi
Renal Arter Darlığında Renin Regülasyonunun Modifiye İki Böbrek Bir Klipsli Fare Modeli
Bu makalede
Özet
Özet
Renal arter darlığı, renin anjiyotensin aldosteron sisteminin (RAAS) aşırı aktive olduğu koroner veya periferik vasküler hastalığı olan hastalarda sık görülen bir durumdur. Bu bağlamda, RAAS'ta hız sınırlayıcı proteaz olan renin ekspresyonunda ve salınımında bir artışı uyaran renal arterlerde daralma vardır. Renin ekspresyonunda ortaya çıkan artış, sıklıkla böbrek hasarı ve son organ hasarı ile ilişkili olan renovasküler hipertansiyonun bilinen bir sürücüsüdür. Bu nedenle, bu durum için yeni tedaviler geliştirmeye büyük ilgi vardır. Renal arter darlığında renin kontrolünün moleküler ve hücresel mekanizması tam olarak anlaşılamamıştır ve daha fazla araştırmayı gerektirmektedir. Farelerde renal arter darlığını indüklemek için, modifiye edilmiş 2 böbrek 1 klip (2K1C) Goldblatt fare modeli geliştirilmiştir. Sağ böbrek vahşi tip farelerde stenozlandı ve sahte ameliyat edilen fareler kontrol olarak kullanıldı. Renal arter darlığı sonrası renin ekspresyonu ve böbrek hasarı saptandı. Böbrekler toplandı ve reninin protein ve mRNA ekspresyonunu belirlemek için taze korteksler kullanıldı. Bu hayvan modeli tekrarlanabilir ve renovasküler hipertansiyon ve böbrek hasarında rol oynayan patofizyolojik yanıtları, moleküler ve hücresel yolları incelemek için kullanılabilir.
Giriş
Renal arter darlığı (RAStenosis), 65 yaş üstü kişilerin yaklaşık% 6'sını ve koroner veya periferik vasküler hastalığı olan kişilerin% 40'ına kadarını etkileyen inatçı bir sorundur 1,2. Hastalık için mevcut tedaviler sınırlıdır; Bu nedenle, renovasküler hipertansiyonu veya RAStenosis'in neden olduğu dirençli hipertansiyonu tedavi etmek için yeni tedavilerin geliştirilmesine kritik bir ihtiyaç vardır. Renin anjiyotensin aldosteron sistemi (RAAS), RAStenozise bağlı hipertansiyon veya renovasküler hipertansiyonun patogenezinde rol oynayan anahtar yoldur 3,4
Erişim kısıtlı. Bu içeriği görüntülemek için lütfen giriş yapın veya deneme sürümünü başlatın.
Protokol
Fareler, Ulusal Sağlık Enstitüleri (NIH) kılavuzlarını ve ABD Sağlık ve İnsan Hizmetleri Bakanlığı, Laboratuvar Hayvanlarının Bakımı ve Kullanımı Kılavuzu'nu izleyerek Vanderbilt Üniversitesi Tıp Merkezi (VUMC) Hayvan Bakımı Bölümü'nde barındırıldı ve bakıldı. Tüm hayvan prosedürleri, deneylere başlamadan önce VUMC Kurumsal Hayvan Bakımı ve Kullanımı Komitesi tarafından onaylanmıştır.
1. Hayvan hazırlama ve diseksiyon
- Ameliyata başlamadan yaklaşık 30 dakika önce ısıtma yastığının çimlendiricisini ve su pompasını açın.
- 0,5 mm uzunluğunda poliüretan boruları keskin bir neşterle kesin. Bir manşet yapmak için uzunlamasına bi....
Erişim kısıtlı. Bu içeriği görüntülemek için lütfen giriş yapın veya deneme sürümünü başlatın.
Sonuçlar
Renal arter daralması, stenozlu böbrekte renin ekspresyonunu arttırırken, kontralateral böbrekte ekspresyonu baskılar. İki böbrek bir klip (2K1C) veya Goldblatt stenoz modeli, artmış renin ekspresyonuna ve böbrek hasarına neden olur. Bu, insanlarda tek taraflı renal arter darlığının en iyi temsili modeli olarak kabul edilmektedir.
Renin ve prorenin ekspresyonu (renin öncüsü) immünoblotlama kullanılarak ölçüldü. Veriler, renin ve prorenin ekspresyonunun stenozlu böbrekte kontralateral ve sahte .......
Erişim kısıtlı. Bu içeriği görüntülemek için lütfen giriş yapın veya deneme sürümünü başlatın.
Tartışma
Renal arter darlığı, sekonder veya dirençli hipertansiyonun ve böbrek hasarının 1,29'unun önemli bir nedenidir. İki böbrek bir klip (2K1C) Goldblatt modeli, RAStenozise bağlı renovasküler hipertansiyonu1,17,18,19 incelemek için kullanılmıştır. Çeşitli hayvan modellerini kullanan bir dizi önceki çalışma, renal arterdeki darlığın, renin a.......
Erişim kısıtlı. Bu içeriği görüntülemek için lütfen giriş yapın veya deneme sürümünü başlatın.
Açıklamalar
Yazarlar tarafından finansal veya başka türlü hiçbir çıkar çatışması beyan edilmez.
Teşekkürler
Araştırma, JAG'ye NHLBI Research Scientist Development Grant (1K01HL135461-01) tarafından desteklenmiştir. David Carmona-Berrio ve Isabel Adarve-Rengifo'ya teknik yardımları için teşekkür ederiz.
....Erişim kısıtlı. Bu içeriği görüntülemek için lütfen giriş yapın veya deneme sürümünü başlatın.
Malzemeler
| Ad | Şirket | Katalog numarası | Yorumlar |
|---|---|---|---|
| Diyet Jeli | Şeffaf H2O | Diyet-Jel 76A | Cerrahi iyileşme diyeti |
| EMC Isıtmalı Sert ped | Hallowell | 000A2788B | Fareleri sıcak tutmak için ısıtma pedleri kullanıldı |
| Ethilon Naylon Sütür Ethicon | 662G | 4-0 (1.5 metrik), Bu sütür karın zarını ve cildi kapatmak için kullanıldı | |
| Ethilon Naylon Sütür Ethicon | 2815 G | 8-0 (0.4 metrik), Bu sütür, arteri bağlamak ve daraltmak için manşeti kapatmak için kullanıldı | |
| Germinator 500 | Braintree Scientific Inc. | GER 5287 | Ameliyatlar arasında cerrahi aletleri sterilize edin |
| Ketoprofen | , Zoetis, | Ketofen | Ağrı Kesici, |
| Poliüretan | , Braintree Scientific Inc. | MRE-025 | Bu tüp darlığı başlatmak için kullanıldı |
| Povidon-iyot antiseptik çubukları | Medline | MDS093901 | Ciltte epilasyon ve ameliyat sonrası uygulandı |
| Reflex 7 Klips Uygulayıcı | Roboz Cerrahi Alet Co | 204-1000 | Bu klips uygulayıcı, bir veya daha fazla dikişin çıkması durumunda klips uygulamak için kullanıldı |
| Steril havlu örtüleri | Dynarex | 4410 | Ameliyat sırasında fareler için çarşaf olarak kullanıldı |
| Üçlü antibiyotikli merhem | Medi-First | 22312 | |
| Su pompası | Stryker | T/pompa Profesyoneller | Ameliyat sırasında ve sonrasında fareleri sıcak tutmak için ısıtma sert pedindeki suyu ısıtmak ve dolaştırmak için kullanılır |
Kaynaklar
- Kashyap, S., et al. Blockade of CCR2 reduces macrophage influx and development of chronic renal damage in murine renovascular hypertension. American Journal of Physiology-Renal Physiology. 310 (5), 372-384 (2016).
- Wang, W., et al.
Erişim kısıtlı. Bu içeriği görüntülemek için lütfen giriş yapın veya deneme sürümünü başlatın.
Yeniden basım ve izinler
