드로소필라에서 작물 운동성과 음식 패시징 측정
Summary
이 프로토콜의 목표는 드로소필라 용기의 작물 수축을 측정하고 식품 유통을 정량화하는 것입니다.
Abstract
대부분의 동물은 음식을 소화하기 위해 위장관 (GI) 항로를 사용합니다. 기관에서 섭취 한 음식의 움직임은 영양소 흡수에 필수적입니다. 무질서한 GI 운동성 및 위 비우는 다중 질병 및 현상을 일으키는 원인이 됩니다. 강력한 유전 모델 유기체로서 Drosophila는 GI 운동성 연구에 사용될 수 있습니다. D로소필라 작물은 포유류 위장과 기능적으로 유사한 추가 소화를 위해 음식을 미드구트로 계약하고 이동하는 기관입니다. 제시는 간단한 측정 도구를 사용하여 Drosophila 작물 운동성을 연구하는 프로토콜입니다. 작물 수축을 계산하여 작물 의 운동성을 평가하는 방법과 분광계를 사용하여 작물과 장 사이에 파란색으로 염색된 식품의 분포를 검출하여 식품 패세이징에 대한 작물의 효과를 조사하는 방법이 설명되어 있다. 이 방법은 대조군과 nprl2 돌연변이 파리 사이의 작물 운동성의 차이를 감지하는 데 사용되었습니다. 이 프로토콜은 비용 효율적이며 작물 운동성에 매우 민감합니다.
Introduction
대부분의 동물은 환경에서 에너지와 영양분을 흡수하는 위장관 (GI) 관에게 불린 소화관을 가지고 있습니다. 인간 기관은 식도, 위, 소장 및 대장 (결장)의 네 부분으로 구성됩니다. 위장에서 장으로 음식 통로는 영양 흡수에 필수적입니다. 노화, 독성 약물 및 감염과 같은 일부 이펙터는 소화 불량, 위식도 역류 질환 및 변비1과같은 일부 질병 및 증상과 관련된 장애된 기관 운동성 및 위 비우기를 유발합니다.
과일 파리(Drosophila 멜라노가스터)는쉽게 유전 적 조작으로 인해 생물 의학 연구에서 널리 사용되는 모델 동물입니다. 중요하게도, 인간 질병과 관련되었던 유전자의 대략 77%는 Drosophila2에 있는 호모로그를 가지고있습니다. Drosophila를 사용 하 여 연구는 많은 질병 메커니즘의 우리의 이해에 거 대 한 발전을 했다. 강력한 유전 적 모델 유기체로서, Drosophila는 GI tract 연구3에서널리 사용됩니다. 드로소필라는 세 가지 이산 영역으로 나뉘어져 있는 간단한 소화관을 가지고 있습니다: 전가, 미드구트 및 힌드구트4. 작물, 전장의 일부, 섭취 식품 저장에 대 한 사이트 역할을 하는 가방 같은 구조. 미드구트는 농생장세포(EC)와 분비장내분비(EE) 세포5로구성된 상피층을 통한 식품 소화 및 영양 흡수 부위로서 긴 튜브 및 기능이다. 흥미롭게도, 드로소필라의 위장 기능은 두 부분으로 나뉩니다: 식품 저장과 구리 세포 영역(CCR)으로서 작물 기능은 pH & lt;36을가진 고산성 영역이다. 드로소필라에서섭취된 음식은 처음에는 작물로 옮겨져 미드구트7로펌핑됩니다. 따라서, 작물은 음식 패시징에 중요한 역할을한다. 내장 근육에 둘러싸여 밸브와 스핑크터의 복잡한 배열로 구성된 작물은 추가 소화를 위해 중간 구장으로 음식을 수축하고 이동유지합니다.
이 프로토콜은 드로소필라의작물에서 미드구트까지 음식 이동을 감지할 수 있게 해줍니다. 작물 수축은 작물 수축 빈도를 계산하여 평가됩니다. 또한 작물과 장 사이의 식품 분포를 감지하여 식품 패싱에 대한 작물의 효과를 조사합니다. 또한, 식품 분포는 다른 수유 기간을 사용하여 즉각적인 음식 운동 또는 기본 식품 상태를 반영하는 데 사용할 수 있습니다. 종합하면, 이 프로토콜은 Drosophila에서작물 운동성과 음식 패청기를 신속하게 평가하는 방법을 제공합니다.
Protocol
Representative Results
Discussion
드로소필라에서 섭취 한 음식은 작물에서 소화를위한 장으로 이동합니다. 이 과정에서 영양분이 흡수되고 폐기물이 대변으로 몸밖으로 추방됩니다. 따라서, 대변 배출과 함께 음식 섭취를 비교하는 것은 대략 바디에 있는 음식 운동의 속도를 평가하기 위하여 이용될 수 있습니다. 모세관 피더(CAFE)의 방법은 식품섭취(10,,11)를측정하는 데 널리 사…
Disclosures
The authors have nothing to disclose.
Acknowledgements
이 작품은 중국 국립 자연과학 재단(제3187만2287호)의 지원을 받아 장쑤성 자연과학재단(NO. BK20181456) 및 강쑤성 6개 인재 피크 프로젝트(No. SWYY-146).
Materials
| 96-well plate | Thermo fisher | 269620 | |
| Brillant Blue FCF | Solarbio | E8500 | also called FD&C Blue No. 1 |
| Centrifuge | Thermo fisher | Heraeus Pico 17 | |
| Spectrophotometer | Spectra Max | cMax plus | |
| Tweezers | Dumont | 11252-30 |
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