Summary

Dual Raster-Scanning Photoacoustic Small-Animal Imager voor vasculaire visualisatie

Published: July 15, 2020
doi:

Summary

Er is een twee raster-scanning fotoakoetische imager ontworpen, die wide-field imaging en real-time imaging integreerde.

Abstract

Beeldvorming van vasculaire netwerken op kleine dieren heeft een belangrijke rol gespeeld in fundamenteel biomedisch onderzoek. Fotoakoetische beeldvormingstechnologie heeft een groot potentieel voor toepassing in de beeldkunde van kleine dieren. De fotoakoetische beeldvorming in het brede veld van kleine dieren kan afbeeldingen leveren met een hoge spatiotemporale resolutie, diepe penetratie en meerdere contrasten. Ook is het real-time fotoakoestische beeldvormingssysteem wenselijk om de hemodynamische activiteiten van vasculatuur van kleine dieren te observeren, die kunnen worden gebruikt om de dynamische monitoring van fysiologische kenmerken van kleine dieren te onderzoeken. Hier wordt een fotoakoetische imager met twee rasterscanningen gepresenteerd, met een schakelbare beeldfunctie in dubbele modus. De wide-field imaging wordt aangedreven door een tweedimensionale gemotoriseerde vertaalfase, terwijl de real-time imaging wordt gerealiseerd met galvanometers. Door verschillende parameters en beeldmodi in te stellen, kan in vivo visualisatie van het vasculaire netwerk van kleine dieren worden uitgevoerd. De real-time beeldvorming kan worden gebruikt om pulsverandering en bloedstroomverandering van door drugs geïnduceerde, enz. te observeren. De wide-field imaging kan worden gebruikt om de groeiverandering van tumor vasculatuur te volgen. Deze zijn gemakkelijk toe te nemen op verschillende gebieden van fundamenteel biomedisch onderzoek.

Introduction

Op biomedisch basisgebied kunnen kleine dieren de menselijke fysiologische functie simuleren. Daarom speelt beeldvorming van kleine dieren een belangrijke rol bij het begeleiden van het onderzoek naar menselijke homologe ziekten en het zoeken naar een effectieve behandeling1. Photoacoustic imaging (PAI) is een niet-invasieve beeldvormingstechniek die de voordelen van optische beeldvorming en echografie combineert2. Fotoakoetische microscopie (PAM) is een waardevolle beeldvormingsmethode voor fundamenteel onderzoek van kleine dieren3. PAM kan gemakkelijk hoge resolutie, diepe penetratie, hoge specificiteit en hoogcontrastbeelden verkrijgen die op optische excitatie en ultrasone opsporing worden gebaseerd4.

Een pulslaser met een specifieke golflengte wordt geabsorbeerd door endogene chromoforen van weefsels. Vervolgens stijgt de temperatuur van het weefsel, wat resulteert in de productie van foto-geïnduceerde ultrasone golven. De ultrasone golven kunnen worden gedetecteerd door een ultrasone transducer. Na signaalverwerving en beeldreconstructie kan de ruimtelijke verdeling van de absorber worden verkregen5. Aan de ene kant vereist de visualisatie van het vasculaire netwerk van het hele orgaan een breed gezichtsveld. Het proces van breedveldscanning duurt meestal lang om hoge resolutie6,7,8te garanderen . Aan de andere kant vereist het observeren van de hemodynamische activiteiten van kleine dieren een snelle real-time beeldvorming. De real-time beeldvorming is nuttig om de vitale functies van kleine dieren in realtime te bestuderen9,10,11. Het gezichtsveld van real-time imaging is meestal voldoende klein om een hoge updatesnelheid te garanderen. Er is dus vaak een afweging tussen het bereiken van een breed gezichtsveld en real-time beeldvorming. Voorheen werden twee verschillende systemen afzonderlijk gebruikt voor wide-field imaging of real-time imaging.

Dit werk rapporteert een dual raster-scanning photoacoustic imager (DRS-PAI), die wide-field imaging integreerde op basis van een tweedimensionale gemotoriseerde vertaalfase en real-time imaging op basis van een tweeassige galvanometerscanner. De wide-field imaging mode (WIM) wordt uitgevoerd om vasculaire morfologie te tonen. Voor de real-time imaging mode (RIM) zijn er momenteel twee functies. Ten eerste kan RIM realtime B-scanafbeeldingen leveren. Door de verplaatsing van vasculatuur langs de diepterichting te meten, kunnen de kenmerken van ademhaling of pols worden onthuld. Ten tweede kan de RIM kwantitatief het specifieke gebied in de WIM-afbeelding meten. Door vergelijkbare beelden van lokale WIM-regio’s te bieden, kunnen de details van de lokale verandering nauwkeurig worden onthuld. Het systeem ontwerpt een flexibele overgang tussen breedveldbeeldvorming van vasculaire visualisatie en real-time beeldvorming van de lokale dynamiek. Het systeem is wenselijk in fundamenteel biomedisch onderzoek waar behoefte is aan beeldvorming van kleine dieren.

Protocol

Alle dierproeven werden uitgevoerd in overeenstemming met de richtlijnen van de institutionele commissie voor dierverzorging en -gebruik van de South China Normal University, Guangzhou, China. 1. Systeeminstellingen Optisch pad (figuur 1) Gebruik een pulslaser van 532 nm als systeemlaserbron. Stel de herhalingssnelheid van de laser in op 10 kHz, de uitgangsenergie op 100% en de triggerinstelling op externe trigger met behulp van een door de gebru…

Representative Results

Het schema van de DRS-PAI wordt weergegeven in figuur 1. Het systeem maakt flexibel en herhaalbaar schakelen tussen WIM en RIM mogelijk. Het verkregen PA-signaal wordt snel verwerkt om PA B-Scan- en MAP-afbeeldingen te genereren. De CCD-camera kan foto’s van monsters leveren. Alle componenten van de DRS-PAI zijn geïntegreerd en geassembleerd in een imager setup(figuur 2),waardoor het eenvoudig te monteren en te bedienen is. In de WIM…

Discussion

Hier presenteerden we een dubbele raster-scanning fotoakoetische kleine dier imager voor niet-invasieve vasculaire visualisatie die werd ontworpen en ontwikkeld om de structuur van de vasculatuur en de bijbehorende dynamische verandering van bloed vast te leggen. Het voordeel van DRS-PAI is dat het de WIM en de RIM integreert in één systeem, waardoor het gemakkelijker wordt om vasculaire dynamische en vasculaire netwerkstructuur van kleine dieren te bestuderen. Het systeem kan een hoge resolutie breedveld vasculaire vi…

Disclosures

The authors have nothing to disclose.

Acknowledgements

De auteurs willen graag de financiële steun van de National Natural Science Foundation of China (61822505; 11774101; 61627827; 81630046), The Science and Technology Planning Project of Guangdong Province, China (2015B020233016) en The Science and Technology Program of Guangzhou (No. 2019020001).

Materials

12 bit multi-purpose digitizer Spectrum M3i.3221 Data acquisition card
A-line collected program National Instrument LabVIEW User-defined program
Amplifier RF Bay LNA-650 Amplifier
Depilatory Cream Veet 33-II Animal depilatory
Fiberport Coupler Thorlab PAF-X-7-A Fiber Coupler
Field Programmable Gate Array Altera Cyclone IV Trigger Control
Fixed Focus Collomation Packages Thorlabs F240FC-532 Fiber Collimator
Foused ultrasonic transducer Self-made
Graphics Processing Unit NVIDIA GeForce GTX 1060 Processing data
Holder Self-made Animal fixation
Laser control program National Instrument LabVIEW User-defined program
Mice Guangdong Medical Laboratory Animal Center BALB/c Animal Model
Microscope camera Mshot MS60 CCD camera
Microscope Objective Daheng Optics GCO-2111 Objective Lens
Mirror Daheng Optics GCC-1011 Moveable/Fixed Mirror
Moving Magnet Capacitive Detector Galvanometer Scanner Century Sunny S8107 real-time scanner
Mshot image analysis system Mshot Display software
Normal Saline CR DOUBLE-CRANE H34023609 Normal Saline
Ophthalmic Scissors SUJIE Scalp Remove
Planar ultrasonic transducer Self-made
Plastic Wrap HJSJLSL Polyethylene Membrane
Program Control Software National Instrument LabVIEW User-defined Program
Pulsed Q-swithched Laser Laser-export DTL-314QT 532-nm pulse Laser
Real-time imaging program National Instrument LabVIEW User-defined program
Ring-shaped white LED Self-made
Shaver Codos CP-9200 Animal Shaver
Single-Mode Fibers Nufern 460-HP Single-mode fiber
Surgical Blade SUJIE 11 Blade
Surgical Scalpel SUJIE 7 Scalp Remove
Translation Stage Jiancheng Optics LS2-25T wide-field scanning stage
Ultrasonic Transducer Self-made
Ultrasound gel GUANGGONG PAI ZC4252418 Acoustic Coupling
Urethane Tokyo Chemical Industry C0028 Animal Anestheized
Water tank Self-made
Wide-field imaging program National Instrument LabVIEW User-defined program
XY Translator Mount Self-made

References

  1. Li, L., et al. Single-impulse panoramic photoacoustic computed tomography of small-animal whole-body dynamics at high spatiotemporal resolution. Nature Biomedical Engineering. 1 (5), 0071 (2017).
  2. Jeon, S., Kim, J., Lee, D., Baik, J. W., Kim, C. Review on practical photoacoustic microscopy. Photoacoustics. 15, 100141 (2019).
  3. Baik, J. W., et al. Super wide-field photoacoustic microscopy of animal and humans in vivo. IEEE Transactions on Medical Imaging. 39 (4), 975-984 (2019).
  4. Omar, M., Aguirre, J., Ntziachristos, V. Optoacoustic mesoscopy for biomedicine. Nature Biomedical Engineering. 3 (5), 354-370 (2019).
  5. Lin, L., et al. Single-breath-hold photoacoustic computed tomography of the breast. Nature Communications. 9 (1), 2352 (2018).
  6. Yang, F., et al. Wide-field monitoring and real-time local recoding microvascular networks on small animals with a dual-raster-scanned photoacoustic microscope. Journal of Biophotonics. 13 (6), 202000022 (2020).
  7. Sun, J., Zhou, Q., Yang, S. Label-free photoacoustic imaging guided sclerotherapy for vascular malformations: a feasibility study. Optics Express. 26 (4), 4967-4978 (2018).
  8. Xu, D., Yang, S., Wang, Y., Gu, Y., Xing, D. Noninvasive and high-resolving photoacoustic dermoscopy of human skin. Biomedical Optics Express. 7 (6), 2095-2102 (2016).
  9. Zhang, W., et al. Miniaturized photoacoustic probe for in vivo imaging of subcutaneous microvessels within human skin. Quantitative Imaging in Medicine and Surgery. 9 (5), 807-814 (2019).
  10. Chen, Q., et al. Ultracompact high-resolution photoacoustic microscopy. Optics Letters. 43 (7), 1615-1618 (2018).
  11. Lan, B., et al. High-speed widefield photoacoustic microscopy of small-animal hemodynamics. Biomedical Optics Express. 9, 4689-4700 (2018).
  12. Ma, H., Yang, S., Cheng, Z., Xing, D. Photoacoustic confocal dermoscope with a waterless coupling and impedance matching opto-sono probe. Optics Letters. 42 (12), 2342-2345 (2017).
  13. Kang, H., Lee, S. W., Lee, E. S., Kim, S. H., Lee, T. G. Real-time GPU-accelerated processing and volumetric display for wide-field laser-scanning optical-resolution photoacoustic microscopy. Biomedical Optics Express. 6 (12), 4650-4660 (2015).
check_url/61584?article_type=t

Play Video

Cite This Article
Yang, F., Wang, Z., Yang, S. Dual Raster-Scanning Photoacoustic Small-Animal Imager for Vascular Visualization. J. Vis. Exp. (161), e61584, doi:10.3791/61584 (2020).

View Video