أخذ عينات من الأنسجة الدهنية البشرية تحت الجلد باستخدام تقنية شفط الدهون المصغرة

Summary

تظهر المخطوطة والفيديو المرتبط بها تقنية خزعة عن طريق الجلد للحصول على عينات من الأنسجة الدهنية تحت الجلد من المناطق المحيطة بالسرة. هذه الطريقة هي طريقة منخفضة المخاطر وفعالة للتحقيق في مجموعة من المعلمات (على سبيل المثال ، التعبير الجيني أو البروتين ، نشاط الإنزيم ، محتوى الدهون) داخل الأنسجة الدهنية.

Abstract

الدراسات على الأنسجة الدهنية مفيدة في فهم الحالات الأيضية وغيرها. يمكن الوصول إلى الأنسجة الدهنية البشرية تحت الجلد. مع التدريب المناسب والالتزام الصارم بتقنية التعقيم ، يمكن الحصول على عينات دهنية تحت الجلد بأمان وكفاءة في بيئة غير سريرية من قبل الباحثين. بعد إعطاء التخدير الجانبي الموضعي إلى السرة ، يتم إدخال إبرة 14 جم متصلة بحقنة 5 أو 10 مل من خلال الجلد إلى الأنسجة تحت الجلد. تحت الشفط ، يتم نقل المحقنة في حركة متبادلة ، تقطيع لعزل شظايا الأنسجة الدهنية. سحب المكبس يكفي لضمان شفط شظايا الأنسجة الدهنية من خلال الإبرة إلى المحقنة. يمكن لخزعة واحدة جمع حوالي 200 ملغ من الأنسجة. تقنية الخزعة هذه آمنة جدا لكل من المشاركين وموظفي البحوث. بعد الخزعة ، يمكن للمشاركين استئناف معظم الأنشطة اليومية ، على الرغم من أنه يجب عليهم تجنب السباحة والأنشطة الشاقة للغاية لمدة 48 ساعة لتجنب النزيف المفرط. يمكن للمشاركين الخضوع بأمان ل 2 خزعات في غضون يوم واحد ، مما يعني أنه يمكن تطبيق هذه التقنية في دراسات التدخل الحاد قبل وبعد ذلك.

Introduction

يمكن أن توفر الأنسجة الدهنية معلومات مفيدة عن وظيفة التمثيل الغذائي للبشر. الأنسجة الدهنية البشرية تحت الجلد يمكن الوصول إليها بسهولة. تم وصف تقنية لاستخراج الأنسجة الدهنية تحت الجلد لأول مرة في منتصف 80s¹. منذ ذلك الحين ، تم تحسين البروتوكول الأولي لزيادة العائد وتحسين تحمل المشاركين في الدراسة. يمكن الحصول على الأنسجة الدهنية تحت الجلد من العديد من المواقع ، وأكثرها شيوعا من glutei¹ ومنطقة البطن². قد تكون العينات من هذا الأخير مرغوبة أكثر لأنها توفر معلومات أكثر قيمة في السياقات المتعلقة بأمراض التمثيل الغذائي³.

يمكن إجراء خزعة الأنسجة الدهنية تحت الجلد باستخدام طريقة شفط الدهون المصغرة بأمان وكفاءة في بيئة غير سريرية. بعد التدريب المناسب من قبل طبيب معتمد من مجلس الإدارة واستخدام تقنية تعقيم صارمة ، يمكن للباحثين إجراء هذه الخزعات بشكل روتيني بأقل قدر من المخاطر على كل من المشاركين والمحققين. يجب أن يتكون فريق الخزعة من 2 أفراد على الأقل: الشخص الذي سيقوم بإجراء الخزعة ومساعد.

يتم تكليف الشخص المسؤول عن الخزعة بتأكيد هوية المشارك ، والتحقق من أن المشارك يمكن أن يخضع للإجراء بأمان (انظر خطوات البروتوكول 2.1-2.4 أدناه) ، وضمان راحة المشارك طوال الإجراء ، وضمان الحفاظ على تقنية معقمة طوال الإجراء ، وتنفيذ الإجراء ، وتزويد المشارك بإجراءات الرعاية اللاحقة اللفظية والمكتوبة. يتمثل دور المساعد في التعامل مع الأنسجة الدهنية التي تم الحصول عليها ومعالجتها بسرعة لتحليلها و / أو تخزينها لاحقا. يساعد المساعد أيضا من خلال كونه “الأيدي غير المعقمة” وضمان راحة المشارك طوال الإجراء. الغرض من هذا الفيديو والورقة هو وصف إجراء الخزعة خطوة بخطوة للحصول بأمان على الأنسجة الدهنية تحت الجلد من منطقة البطن.

Protocol

ملاحظة: وافقت لجنة الأبحاث السريرية أو لجنة الأبحاث السريرية أو جامعة ستيرلينغ NHS أو Invasive على إجراء الخزعة الموضح أدناه. يجب أن تتم الموافقة على جميع الدراسات البحثية التي تستخدم هذا الإجراء من قبل لجنة الأخلاقيات المستقلة المناسبة. يجب أن يكون متلقي الخزعة قد أكمل تدريبا رسميا على التقني…

Representative Results

يعد إجراء خزعة الأنسجة الدهنية الموصوف تقنية فعالة ومنخفضة المخاطر للباحثين للحصول على عينات من الأنسجة الدهنية تحت الجلد من متطوعين بشريين. أجرينا 39 خزعة من الأنسجة الدهنية تحت الجلد باستخدام الإجراء الموصوف في 11 أنثى صحية وذات وزن طبيعي (العمر ، 27.4 ± 3.3 سنة ؛ مؤشر كتلة الجسم (BMI) ، 22.6 ± 1.5 kg…

Discussion

يوفر البروتوكول الموصوف والفيديو المرتبط به نظرة عامة خطوة بخطوة على تقنية شفط الدهون المصغرة للحصول على عينات من الأنسجة الدهنية تحت الجلد من منطقة البطن. أجرت هذه المجموعة البحثية ما مجموعه 124 خزعة على مدار 19 شهرا دون أي آثار ضارة لدى المشاركين. الإجراء آمن ويرتبط بالحد الأدنى من المخاط?…

Materials

Item: 14 G needle 14 G x 3 1/8" 210 mm x 80 mm	B Braun	4665473	Per biopsy: 1
Item: 21 G needle 21 G x 1 1/2" 0.8 mm x 38 mm	Terumo	AN*2138R1	Per biopsy: 2
Item: 26 G  needle 26 G x 1/2" microlance needle 0.45 mm x 13 mm	BD	303800	Per biopsy: 2
Item: 5 mL syringe 5 mL luer	DB plastipak	302187	Per biopsy: 2
Item: Adhesive wound dressing Opsite Post-Op Dressing 9.5 x 8.5	Smith & Nephew	6600709	Per biopsy: 1
Item: Disposable sterile scalpel Disposable Scalpel Sterile Blade no. 10	Swann Morton	/0501	Per biopsy: 1
Item: Icepack BlueDot Reusable Hot/Cold Pack 26.5 cm x 13.0 cm	NuCare	F711	Per biopsy: 1
Item: Iodine based antiseptic Videne antiseptic solution	Ecolab Videne	3030440	Per biopsy: q.s
Item: Lidocaine 2% w/o epinephrine Lidocaine 2% injection 5 mL	B Braun	3558553	Per biopsy: 5 mL
Item: Non-sterile gloves Starguard sensitive powder free nitrile gloves	Starguard	SG-N-S	Per biopsy: pair
Item: Sodium chloride 0.9% Sodium chlride 0.9% w/v intravenous infusion BP	BBraun	S8004-5384	Per biopsy: q.s.
Item: Stabilization solution* RNAlater Stabilization Solution	ThermoFisher Scientific	AM7020	Per biopsy: q.s
Item: Sterile forceps Sterile forceps	Rocialle	RML109-006	Per biopsy: 1
Item: Sterile gauze swabs Non woven swabs sterile 7.5 x 7.5 cm	Prestige	1860	Per biopsy: 5
Item: Sterile gloves Prestige soft vinyl sterile powder free medical gloves	Prestige	S: P4301 M:P3302 L:P3301	Per biopsy: pair
Item: Sterile Microcentrifuge tubes 1.5 mL Sterile Microcentrifuge Tubes	StarLab	I1415-5510	Per biopsy: q.s
Item: Sterile sheet Paper plain white 90 x 90 cm	Rocialle	RML 126-216	Per biopsy: 1
Item: Weighing boat Diamond shape weigh boats	Heathrow Scientific	HS1427C	Per biopsy: 1
* denotes optional materials