Summary

Valutare l'effetto dei pesticidi sulle larve delle api solitarie

Published: October 15, 2021
doi:

Summary

Il presente protocollo spiega un metodo per alimentare le larve delle api solitarie, Osmia excavata, con disposizioni contaminate da pesticidi. La procedura esamina l’ecotossicità del pesticida alle larve delle api solitarie.

Abstract

Le attuali valutazioni del rischio ecologico dei pesticidi sugli impollinatori hanno considerato principalmente solo le condizioni di laboratorio. Per le larve delle api solitarie, l’ingestione di provviste contaminate da pesticidi può aumentare il tasso di mortalità delle larve, diminuire il tasso di raccolta e la popolazione di api solitarie adulte nel prossimo anno da una prospettiva demografica. Ma ci sono studi limitati sugli effetti dei pesticidi sulle larve delle api solitarie. Pertanto, capire come i pesticidi influenzano le larve delle api solitarie dovrebbe essere considerato parte integrante della valutazione del rischio ecologico dei pesticidi. Questo studio presenta un metodo per esporre le larve dell’ape solitaria, Osmia excavata , a dosi letali o subletali di pesticidi, monitorando l’aumento di peso larvale, la durata dello sviluppo, la capacità di eclosione e la conversione dell’efficienza del consumo alimentare del cibo ingerito. Per dimostrare l’efficacia di questo metodo, le larve di O. excavata sono state alimentate con provviste contenenti dosi acute letali e subletali di clorpirifos. Quindi, sono stati studiati gli indici di cui sopra delle larve trattate. Questa tecnica aiuta a prevedere e mitigare il rischio di pesticidi per gli impollinatori.

Introduction

Gli impollinatori svolgono un ruolo fondamentale nei servizi ecosistemici della moderna agricoltura globale. Mentre le api mellifere (Apis mellifera; Gli imenotteri: Apidae) sono stati tradizionalmente considerati come gli impollinatori economici essenziali delle colture, recenti ricerche suggeriscono che Osmia (Hymenoptera: Megachilidae) è anche molto importante nel migliorare l’impollinazione per alcune colture, aumentando le dimensioni dei frutti e il numero di semi e riducendo la proporzione di frutta asimmetrica nei frutteti commerciali in diverse parti del mondo1. Osmia excavata è stata considerata una specie ideale per l’impollinazione delle mele, principalmente in Asia, come nel nord e nord-ovest della Cina e in Giappone 2,3,4. Può fornire servizi di impollinazione per alcune colture con efficienza simile o talvolta con maggiore efficienza. A questo proposito, è stato dimostrato che sostituiscono o lavorano in sinergia con le apimellifere 4,5,6.

Le caratteristiche biologiche di O. excavata sono uniche rispetto alle api sociali. La sua attività univoltina, solitaria e di nidificazione si verifica principalmente in primavera e all’inizio dell’estate. I nidi di O. excavata si trovano di solito in fori preesistenti, tipicamente in legno morto, piante cave, tubi di paglia e gambo di bambù nella condizione naturale3. L’adulto O. excavata emerge dal suo bozzolo per accoppiarsi, raccogliere polline e costruire un nido per deporre le uova, che iniziano a schiudersi una settimana dopo. Le uova fecondate si sviluppano in femmine, mentre le uova non fecondate si sviluppano in maschi3. Le femmine sono distribuite nella parte inferiore del tubo delle api e le disposizioni corrispondenti sono più significative. Al contrario, i maschi erano in prossimità dell’uscita del tubo con disposizioni minori7, quindi i maschi escono per primi e le femmine escono più tardi. La femmina mescola il polline con una piccola quantità di nettare in un blob umido, l’unica fonte di cibo per ogni larva nella cellula8.

Diversi studi hanno riportato una diminuzione della popolazione di insetti impollinatori 9,10. L’uso estensivo di pesticidi è stato identificato come uno dei principali fattori per ridurre l’abbondanza e la diversità degli impollinatori e può anche mettere in pericolo i servizi di impollinazione11,12. Per ridurre e mitigare gli effetti negativi dei pesticidi, è necessario condurre una valutazione del rischio dei pesticidi per gli impollinatori. Alcuni paesi hanno stabilito quadri normativi per garantire la sicurezza delle api dai pesticidi utilizzati13,14. Studi recenti hanno dimostrato che Osmia era più suscettibile ai pesticidi rispetto alle api da miele 1,15.

È interessante notare che la maggior parte delle valutazioni del rischio si sono concentrate sulle api adulte 11,12; poche ricerche sono state condotte su O. excavata, in particolare sulle larve. Inoltre, la mortalità di Osmia direttamente causata dai pesticidi è più comunemente considerata16. Tuttavia, le tossicità croniche come l’aumento di peso larvale, la durata dello sviluppo, i modelli di alimentazione, la capacità di eclosione, il successivo comportamento adulto e la fecondità possono avere lo stesso danno delle tossicità letali acute e sono spesso ignorate a causa della mancanza di un metodo sperimentale efficace per le api solitarie17.

Fino ad ora, due metodi sono utilizzati per valutare gli effetti dei pesticidi sulle larve delle api solitarie: (1) una quantità appropriata di pesticidi è stata applicata nel punto localizzato di disposizioni senza rimuovere l’uovo delle api solitarie 1,18,19,20; (2) sostituzione delle disposizioni con miscele artificiali di polline e nettare contenenti una quantità specifica di antiparassitario21. Tuttavia, ci sono alcune limitazioni ai due metodi di cui sopra. Il primo può misurare solo la tossicità acuta, ma non la tossicità cronica perché le larve hanno ingerito l’intera dose in un breve periodo di tempo; quest’ultimo porterebbe ad un alto tasso di mortalità a causa della manipolazione umana1. Qui, il metodo di immersione è stato descritto per studiare l’ecotossicità dei pesticidi a O. excavata in condizioni di ricerca altamente controllate, simulando il comportamento dell’alimentazione larvale con pesticidi residui nelle disposizioni nell’ambiente reale. Il metodo di questo studio risolve gli svantaggi dei due metodi di cui sopra ed è adatto per misurare gli effetti di una sostanza pericolosa sulla tossicità acuta e cronica.

Protocol

1. Preparazione del tubo di alimentazione Praticare un foro (~ 0,3 mm di diametro) nel coperchio di un tubo di centrifuga da 2 ml utilizzando un ferro da avvolgimento elettrico (vedere Tabella dei materiali). Utilizzare un tale tubo centrifuga per mantenere una larva di O. excavata e la sua massa di fornitura. 2. Preparazione del pesticida Sciogliere il pesticida di grado tecnico (vedi Tabella dei mat…

Representative Results

I tenori di antiparassitari di uso comune, clorpirifos, imidacloprid, fendifenuron, phoxim, avermectina nelle disposizioni erano inferiori al limite di quantificazione (0,01-0,02 mg kg-1) nel gruppo di controllo; questi risultati hanno escluso l’influenza dei residui di pesticidi su ciascun trattamento. È stata valutata la mortalità con e senza rimozione delle larve dalle provviste dopo 48 ore nei gruppi di controllo; i risultati non hanno mostrato differenze significative (Tabella 1), indic…

Discussion

Per gli impollinatori adulti, ci sono due metodi principali per misurare l’ecotossicità dei pesticidi. Uno è il metodo di contatto, in cui il pesticida viene applicato al protorace degli insetti adulti; l’altro è il metodo di tossicità gastrica, in cui gli impollinatori adulti vengono nutriti con acqua di miele contenente pesticida25,26. Negli ultimi anni, è stato riscontrato che l’effetto di impollinazione e il tasso di eclosione di O. excavata son…

Disclosures

The authors have nothing to disclose.

Acknowledgements

Questo studio è stato supportato dal National Key R&D Program of China (2017YFD0200400), major scientific and technological innovation Project (2017CXGC0214), Bee Industry Innovation Team della provincia di Shandong, Agricultural Science and Technology Innovation Project della Shandong Academy of Agricultural Sciences (CXGC2019G01) e Agricultural Science and Technology Innovation Project della Shandong Academy of Agricultural Sciences (CXGC2021B13).

Materials

Abamectin Jinan Lvba Pesticide Co. Ltd
Black-light lamps Kanghua Medical Device Co., Ltd
Centrifugal tube box with 100 Wells Shanghai Rebus Network Technology Co., Ltd
Centrifuge tube Shanghai Rebus Network Technology Co., Ltd 2 mL;  Serve as bee tube
Electric soldering iron Kunshan Kaipai Hardware Electromechanical Co., Ltd
Electronic scale Sartorius Scientific Instruments (Beijing) Co., Ltd 3137510295
Graduated cylinder Anhui Weiss Experimental Equipment Co. Ltd
Petri dishes (60 mm diameter) Qingdao jindian biochemical equipment co., LTD
Pollen provision Yantai Bifeng Agricultural Science and Technology Co. Ltd
Soft brush Wengang Wenhai painting material factory
Solitary bees Yantai Bifeng Agricultural Science and Technology Co. Ltd

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Cite This Article
Song, Y., Li, R., Li, L., Ouyang, F., Men, X. Evaluating the Effect of Pesticides on the Larvae of the Solitary Bees. J. Vis. Exp. (176), e62946, doi:10.3791/62946 (2021).

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