Summary
该协议概述了如何使用不同深度的FFPE供体块手动构建组织微阵列的磁带方法。
Abstract
组织微阵列(TMA)是一种重要的研究工具,其中许多福尔马林固定石蜡包埋(FFPE)样品可以表示在单个石蜡阻断中。这是通过使用从不同供体FFPE块的感兴趣区域中提取的组织核心并将其排列成单个TMA石蜡块来实现的。构建完成后,完成的TMA切片可用于进行免疫组化,显色,荧光 原位 杂交(FISH)和RNA ISH研究,以同时评估蛋白质表达以及许多样品中的基因组和转录改变,从而最大限度地减少组织使用并降低试剂成本。有几种不同的 TMA 构造技术。最常见的构造方法之一是接收方法,它最适合相同长度的磁芯,建议最小长度为4 mm。不幸的是,在诊断过程中可以大量切除组织阻滞,通常导致“非理想”供体阻滞厚度小于4 mm。本文和视频重点介绍双面胶带法;一种替代的手动,低成本,易于使用和快速的方法,用于构建低密度(<50芯)TMA,与这些非理想供体块高度兼容。该协议提供了如何使用这种方法构建TMA的分步指南,重点是病理学审查和施工后验证的至关重要性。
Introduction
福尔马林固定石蜡包埋(FFPE)组织广泛用于形态学和免疫组化化学蛋白表达研究1。然而,发现研究通常需要检查大量组织上的几种标记物,这可能会耗尽珍贵的组织。组织微阵列(TMA)于20世纪80年代引入,是一种重要的研究工具,它将来自许多不同FFPE组织块的感兴趣的小示例区域组装成单个石蜡块,允许同时检查许多组织样品2。因此,TMA避免过度使用高度珍贵且通常罕见的组织样品,同时还降低了与在许多单个样品上进行下游应用相关的成本3,4。
用于构建TMA5存在几种不同的技术,包括自动和半手动方法6,7。后一种方法中的大多数使用受体方法,其中从供体块打孔的组织核心插入预制模具中。然而,建议使用至少4毫米厚的“理想”供体块用于该方法6,7。不幸的是,供体块,特别是那些在用于研究之前已广泛切片用于临床诊断目的的供体块,通常小于4毫米厚,如果不可能或不希望重新嵌入以达到4毫米的深度,则可能将其排除在使用受体方法的TMA构建中。此外,这些程序通常可以使用台式手动组织微阵列或昂贵的自动化仪器,这些仪器对于普通研究实验室来说不容易获得或负担得起。相比之下,双面胶带法或胶带法是一种手动TMA构造方法,与使用廉价,广泛可用,可重复使用或一次性手持式组织微阵列的非理想供体块兼容8,9,10。这种方法通过将块浇注在倒立的直立岩心周围来反转施工过程,这些芯在完成后与TMA的顶部齐平,而不管芯长如何。因此,所有样本在第一次切片时都存在于TMA部分中,这使得构造函数可以从一开始就充分利用这些非理想块。因此,对于非专业研究实验室来说,胶带方法代表了一种具有成本效益且可行的替代方案。
TMA构建并非没有挑战,在选择从中提取核心的组织区域时必须谨慎,使病理学回顾成为TMA构建过程的关键部分11,12。因此,该协议旨在通过强调构建和使用TMA的个体应注意的与TMA构建相关的一些病理缺陷,以及为什么病理学审查应持续到TMA阻滞的整个生命周期,来强调TMA构建中病理学审查的深远重要性。
该协议概述了艾滋病和癌症标本资源(ACSR)技术核心实验室采取的步骤,以使用胶带方法从非理想供体块构建TMA;其中,ACSR是NIH资助的生物储存库,致力于从HIV癌症组织中收集和公平分配生物标本,以促进HIV恶性肿瘤研究。
Protocol
所有供体块在收集过程中被去识别,并用于TMA构建,符合批准的Mayo Clinic IRB协议(PR16-000507和PR2207-02)。
1. 病理学回顾
- 检索要用于TMA构建的FFPE组织供体块。
- 为董事会认证的病理学家选择的每个FFPE组织供体块提交新生成的苏木精和eosin(H&E)染色载玻片13 ,以进行组织学审查,以确认诊断并注释组织。
注意:H&E染色可以在内部进行,也可以送到病理学核心服务实验室进行染色,就像本方案中的情况一样。构建TMA时要记住的最重要的概念之一是FFPE供体块中的组织是3维(3D)结构,其形状,肿瘤含量和组织活力可以随着阻滞深度的增加而显着变化。病理学家必须根据H&E染色组织切片的审查来确定提取组织核心的最佳区域,这是3D组织的二维表示。 - 在组织学检查期间,确保病理学家在H&E染色载玻片上识别并注释感兴趣的/不感兴趣的组织。若要为幻灯片添加批注,请执行以下步骤。
- 使用载玻片打标笔在感兴趣的组织上圈出。
- 使用相同的打标笔,在圆圈区域内应避免的区域吸干。
- 使用打标笔标记被认为适合取样和提取岩心的区域。
注意:重要的是要记住,组织形状和组成可能随着块中组织深度而变化。因此,组织核心的组成可能根据核心的提取位置而变化,这强调了持续病理引导的必要性。 - 如果需要,在H&Es旁边提交用于疾病特异性免疫组织化学染色的额外组织,以协助病理学审查。此类染色的例子包括用于HER2阳性乳腺癌14的ERBB2染色,用于Kaposi肉瘤15的HHV-8,用于B细胞淋巴瘤16的CD20,U6作为RNA质量17的全局标记物,EBER确定EPstein-Barr病毒阳性率18,以及Vimentin作为间充质起源和组织质量控制标记物19,20的确认。
2. TMA建设的准备工作
- 病理学检查完成后,编译用于TMA构建的供体块的最终列表,并创建TMA图谱(图1A)。TMA图是一个示意图,概述了从所得TMA获得的已完成的TMA和载玻片安装组织样品中核心的位置。
- 出于方向目的,请确保 TMA 贴图避免将磁芯放置在偶数矩阵(如 3 x 3 或 4 x 4 矩阵)中,并且至少包含 1 个方向标记。
注:取向芯可以是取自无组织彩色取向工具21的取芯,也可以是含有与TMA主题明显不同的组织的组织块。与将直立式芯材插入预制蜡模中的接收方法不同,胶带方法通过在倒置的直立型芯材周围倒入熔融蜡来产生TMA。这种施工过程的反转需要第二张称为施工图的地图。 - 通过创建 TMA 映射的镜像来创建构造图(图 1B)。施工图显示了在施工期间每个岩心必须放置的位置,以便出现在已完成的TMA中的正确位置。保存施工图。
- 创建贴图后,准备金属 TMA 基模。使用一次性纸质方格网格来指导磁芯放置并调节磁芯分离。
注:补充 pdf 中提供了一个 6 x 7(42 点)模板网格,最多 40 个磁芯(外加两个取向磁芯/间隙),用于内部尺寸为 26 mm x 20 mm 的市售金属底座模具。打印并剪切纸网格。 - 将方格网格切成合适的大小,并在网格的背面贴上一块双面胶带 (DSST)。将网格和 DSST 胶带放入金属托盘中,并在网格顶部添加第二块 DSST,即在金属底座模具中的纸张网格顶部(图 2A)。
3. 磁芯放置
- 将病理审查的H&E覆盖在其相应的组织块上,并使用病理学家标记来确定要打孔的组织块的位置(图2B)。
- 使用手动芯打孔(图2C)在适当的位置打孔FFPE供体块。
注:型芯冲头有多种直径可供选择。该方法采用直径为2 mm的手持式打芯机。- 如果使用可重复使用的打芯机,请确保在每次组织打孔机之前和之后对其进行清洁。
- 从芯型冲头上弹出磁芯,然后使用针镐将弹出的磁芯放在DSST覆盖网格的十字准线上(图2D)。确保当核心放置在网格上时,它是倒置和直立的,使得核心的组织端与DSST(组织面朝下)接触。还要确保将岩心放置在网格上的适当位置,如施工图所示。
- 重复此步骤,直到所有供体块都取芯,并将核心放置在适当的位置。
4. 完成东京都市区
- 打开台式烤箱,设置为78°C,并留出足够的时间达到温度。
- 对于要构建的每个TMA,在耐烤箱的容器中熔化45克石蜡颗粒。
- 标记塑料盒并将其放在包含磁芯的金属基模的顶部(图2E)。磁芯的高度不应超过金属托盘的深度,因为当盒装到位时,高芯将倾斜或倒塌。
- 将带有盒的模具放在托盘上以捕获溢出物,然后将熔化的石蜡通过盒轻轻倒入芯盘中(图2F)。
- 让熔融石蜡溢出,以确保TMA体内没有气泡。确保石蜡填充到盒的顶部,以便在石蜡凝固后将其嵌入并牢固地结合到石蜡块上。
- 请勿移动或干扰块,并使其在室温下冷却30分钟。然后,在4°C下再冷藏30分钟以完全凝固。
- 完全固化后,轻轻地将金属基模与芯材盒中结合的石蜡块分离。
注意:DSST在整个施工过程中保持其粘合性,并经常附着在新形成的石蜡块上。如果适用,请轻轻地从现在完成的 TMA 块的顶部移除 DSST 和网格。
5. 验证 TMA
- 构建TMA后,使用切片机对新完成的TMA进行切片。切一个或多个全脸组织切片。
- 将切片转移到预热水浴中,然后滑动安装切片。
注意:新建的砌块通常需要砌块面(切除多余的石蜡),以获得包含所有核心的完整面组织切片。 - 干燥后,如果需要,提交新鲜切割的载玻片安装TMA切片以进行H&E染色13 和任何其他免疫组织化学染色。
- 提交染色的TMA H&E切片进行病理学检查。
注意:在TMA病理学审查期间,董事会认证的病理学家,最好是审查TMA供体阻滞的同一病理学家,审查TMA H&E染色的核心,以确保确实存在所需的目标组织。如果在步骤1.3.4中提交了任何其他组织或疾病特异性免疫组化学染色进行供体阻滞审查,则应在TMA切片上重复这些染色,并与TMA H&E一起提交进行病理学审查。 - 记录 TMA 病理验证评价的结果。
Representative Results
这里描述的TMA构建的胶带方法是ACSR技术核心实验室用于保存组织的首选方法,这反过来又允许节俭和公平地向研究人员分配高度珍贵的组织。
构建过程的一个关键组成部分是在给定的供体块中识别感兴趣的组织,从中应从中获取TMA核心。这是通过病理学回顾确定的,其中训练有素的病理学家审查新生成的H&E载玻片(图3)。使用标记,病理学家将H&E载玻片上的区域圈出,这表明核心应从该圆圈内的供体块中获得(图3)。病理学家还可以标记其他区域,例如应避免的坏死区域,或可以从中获得其他组织核心的良性区域(图3)。然后从指定区域冲孔芯,并将其包含在TMA的构造中。
通过磁带方法成功完成 TMA 有两个主要指标。首先是在预期位置和彼此之间的距离处存在组织核心点,这是通过目视检查来评估的。 图4A,B 描述了两种成功完全采用胶带方法的TMA及其相应的H&E幻灯片。对TMA模块的目视检查表明,每个TMA中都存在磁芯并定期间隔。在胶带法施工过程中可能出现的一些主要施工问题包括由于蜡凝固前过早去除金属基体而导致的块和盒的分离(图4C)。使用磁带方法构建的TMA观察到的另一个潜在问题是嵌入式磁芯的磁芯倾覆和/或放置漂移(图4D);熔融石蜡的过度湍流浇注可能会引起这个问题,粘附性差的DSST可能会进一步加剧这个问题。 图5 显示了TMA1核心的H&E图像。除了一个核心(点1)之外,所有核心都存在于TMA1的H&E中。 图5 还显示,一些核心以完整的圆形组织点(即斑点4,6,13,17)存在,而其他核心则不完全存在(即斑点3,8,9,12)。在后一种情况下经历的组织损失并不少见,可能是由于完全揭示所有核心所需的切片不足。或者,存在不完全或完全缺失的组织(即斑点1)可能源于该核心的组织质量差,这可能导致染色过程中的组织损失。
成功的第二个指标是根据TMA岩心是否捕获感兴趣的组织来评估的。这是 通过 对单个TMA H&E核心(图5)的病理学审查和验证与预冲孔供体块H&Es(图3)进行比较来实现的,并且在需要/执行任何其他免疫组织化学染色的情况下进行。 图6 描述了在TMA1上进行的示例性染色,包括Vimentin,U6,EBER和CD20。维门汀阳性组织(棕色染色)表明所有组织均来自间充质,并且质量良好,可以染色。U6阳性(深紫色/蓝色染色)表明组织中的RNA质量良好,并补充了RNA 原位 杂交(ISH)染色,例如靶向基因转录本的EBER。 图5 中的U6结果表明,淋巴瘤组织(点9)和正常扁桃体组织取向控制(点22)中的RNA质量很高,但在点19处的正常组织中则不高。在此之后,EBER染色在正常组织和取向控制中为阴性,但在淋巴瘤组织中呈强阳性(点9)。正如淋巴样起源组织的预期一样,斑点9和22染色的B细胞标志物CD20呈阳性,但来自正常脊髓组织的斑点19则没有。 表1 总结了所有TMA核心的染色结果,并确认了这些TMA组织核心的组织注释。
图 1:TMA 映射。 选择所有FFPE块和方向控制后,将创建一个详细的地图,称为TMA图(A),概述每个供体块核心在成品块中的位置。重要的是要注意,当使用胶带方法构建TMA时,施工图(B)是TMA图的镜像,因为这种方法颠倒了施工过程,将熔融石蜡倒在直立的组织芯周围,而不是将岩心插入预制模具中。 请点击此处查看此图的大图。
图2:使用胶带方法构建TMA。 (A)第2层双面胶带(DSST)和纸质网格,按照金属基模底部的顺序排列;将第一块DSST(2A插入物),然后是一次性纸网格,然后将第二块DSST放在金属基模的底部。(B)对于每个供体块,由病理学家生成并审查新的H&E,病理学家标记H&E以表示感兴趣的组织,在哪里打块,如果适用,在哪里避免打孔以提取组织核心。(C) 使用可处置或可重复使用的手持式 TMA 打孔器对供体块进行打孔。(四)采用针头镐,将每个芯直立放置,肿瘤面朝下覆盖在DSST上。(E)小心地将预先标记的塑料盒放在装有直立芯的金属托盘的顶部。(F)熔化的石蜡通过盒式晶格轻轻倒入托盘中,以包围并浸没盒下的直立芯。 请点击此处查看此图的大图。
图3:供体块H&E染色。 对来自每个供体区块的H&E染色切片进行QC审查,由培训病理学家用标记物注释H&E染色的载玻片,以指示用于核心收集的感兴趣区域/组织(即活癌症(CA)或良性(BN)组织),以及应避免的区域(即 坏死组织区域)。然后,识别,冲孔并纳入正在构建的TMA中,然后识别,冲孔组织块的适当区域,如注释的H&E所示。然后,可以将得到的TMA核心冲头H&E引用回供体块H&E的未穿孔区域,以确认在核心冲孔中捕获了感兴趣的组织。 请点击此处查看此图的大图。
图4:代表性结果(A,B)成功完成胶带方法TMA及其随附的H&Es进行病理学检查。(C)当盒体过早地从金属基模中取出时,塑料盒和石蜡块的分离。(D) 完成的胶带法TMA显示了熔融石蜡湍流浇注产生的倒塌和迁移的核心。请点击此处查看此图的大图。
图5:TMA核心H&Es。 TMA1的H&E染色部分,显示用于构建TMA的每个组织核心(点1-21)以及取向核心(点22和23)的单个H&E。显示的图像是使用4倍物镜获得的,该物镜配有连接到成像软件的数码相机。 请点击此处查看此图的大图。
图6:示例性免疫组织化学和RNA ISH。 IHC评估TMA1的全面部切片的vimentin和CD20表达,并通过RNA ISH评估RNA质量(U6)和EBV 状态。 图像显示了三个核心的示例性图像,包括一个肿瘤组织(点9),一个正常组织(点19),以及两个方向对照中的一个(点22)。Vimentin阳性表示棕色染色,U6阳性表示蓝色/紫色染色,EBER表示蓝色/紫色染色,CD20表示棕色染色。显示的图像是使用4倍物镜获得的,该物镜配有连接到成像软件的数码相机。 请点击此处查看此图的大图。
表1:构建的TMA组织和染色剂的概述: 表概述了(a)组织是否存在于每个代表性TMA斑点中(b)肿瘤存在于每个H&E染色组织斑点中,以及(c)在相邻TMA切片上进行的任何其他免疫组织学染色的结果:“-”表示阴性,n / d = 未完成。 请按此下载此表格。
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Discussion
TMA构建过程最关键的组成部分之一是FFPE供体块的病理学审查,从中获得TMA核心4。在审查期间,董事会认证的病理学家检查每个供体块的代表性H&E染色组织切片。必须使用新切割的组织切片生成H&E,以便它是其相应供体块的最佳代表。不建议使用较旧的H&Es,因为FFPE组织是3维结构,其组织轮廓可以随着块深和广泛的切片而显着变化;这可能是自H&E生成以来发生的,可能使其对FFPE块的表示不准确。审查过程对于选择合适的病例和确定应从中获取岩芯的组织区域以及确定在收集岩芯时应避免的区域至关重要。在没有病理学检查的情况下,包括不合适的组织的可能性显着增加。包含此类组织有可能使构建的TMA无效且不适合其预期目的。重要的是,在不知不觉中使用这种无效的TMA具有导致虚假和误导性数据的巨大潜力。这与FFPE组织的轮廓及其衍生物核心的知识相结合,可以随着深度的增加而显着变化,突出了在构建的TMA阻断的整个生命周期中持续病理学审查的重要性。理想情况下,H&Es应该使用每15个或20个 部分产生一 次,以确保捕获和记录核心组织轮廓的任何变化。至少,应在项目开始和结束时生成和审查H&E,以监控这些潜在的变化。鉴于这些要点以及TMA作为研究工具的重要性,病理学审查必须牢牢地嵌入TMA构建过程以及TMA区块的整个生命周期中。
FFPE阻滞通常在常规诊断处理过程中被广泛切片,然后释放用于研究目的。因此,供体块深度和供体块芯长度通常小于理想的4 mm受体方法。在这里,我们已经演示了如何使用胶带方法构建协议构建TMA,其主要优点是它与来自非理想FFPE组织块的芯的相容性。尽管磁带方法具有巨大的研究价值,并且为构建TMA模块提供了一种廉价,方便且易于使用的方法,但它并非没有挑战和局限性。与在单个 TMA 块中可容纳 100-1,000 个内核的自动和手动接收方法相比,对于使用磁带方法9 构建的 TMA,建议最多使用 40 个内核。另一个限制是施工的便利性。在接收方法中,冲孔芯仅插入预制模具中,通过将每个岩心包裹在自己的单独孔中来提供岩心稳定性,从而防止岩心迁移以及促进高度规则的岩心放置和分离22。此外,接收方法提供了完全手动,半手动和全自动的可选便利性。相比之下,手动胶带方法需要使用针头手工仔细,轻柔地放置每个芯。虽然在胶带方法中没有预制模具,因此无法进行接收方法的高度规则的放置和分离,但通过包含方格网格克服了这一缺陷。重要的是,方格网格应贴在金属托盘的中心,以避免块状边缘放置,如果没有足够的石蜡将芯固定到位,则会增加岩心损失的风险。还必须注意的是,由于手动放置芯材以及需要将针镐安装在相邻芯之间,因此使用接收者方法可能无法实现使用接收者方法实现的小芯分离。磁芯以独立直立的方式放置,与DSST覆盖的网格接触的磁芯的表面积或占地面积最小。与接收方法相比,这种设置提供的岩心稳定性明显低于接收方法,并且在浇注熔融石蜡时增加了岩心倾覆和/或迁移的风险。事实上,协议中最关键的步骤之一是浇注熔融的石蜡。从烤箱中取出时必须快速完成此操作,以确保石蜡完全液态,并且以最小的湍流轻轻地进行浇注。有趣的是,Chen等人开发了一种高度新颖的辅助装置,类似于具有7 x 11均匀分布的2毫米直径孔的模板,其放置在空白石蜡块的顶部,以在创建受体块和插入供体块芯23时引导针头。虽然设计用于帮助接收方块结构,但这种装置可以很容易地适应胶带方法,以指导放置,调节分离,并在施工过程中提高岩心稳定性。
磁芯稳定性的最重要影响因素之一是磁带方法 TMA 中包含的磁芯数量。这是因为随着磁芯数量的增加,磁芯的直径必须减小,以适应不断增加的磁芯数量,这反过来又减少了符合DSST的磁芯占用空间。对于胶带法TMA结构,建议最小芯径为1 mm,因为我们发现直径较小的岩心特别不稳定,即使石蜡浇注非常温和,也容易倾覆。最近的一项研究调查了两种不同的内部方法,使用16 G针(芯径1.1 mm)和4 mm直径的冲头,在1.1 mm(26.5%)而不是4 mm芯24中经历了大量的组织损失。这似乎表明,小磁芯的使用起来可能会有问题,而不仅仅是在施工过程中。此外,较小的直径可能不能代表原始供体块以及较大的核心,这使得病理学解释变得困难,并增加了供体组织表示不准确的可能性。
定向块的包含和放置在TMA建设中具有深远的重要性。然而,这对于磁带方法构建的TMA尤其重要。这源于这样一个事实,即胶带方法颠倒了施工过程,从而增加了空间迷失的风险。我们建议在每个模块中最多包含三个定向磁芯,并且将它们放置在远离样品磁芯的位置,以便最好地定向块。取向核心可以是取自含有与构建的TMA或无组织有色定向工具21的主题明显不同的组织的组织块中取出的取芯,其中后者对非病理学家特别有用。结合非正则矩阵图案化磁芯放置,定向磁芯可最大限度地降低定向盘的风险。
使用胶带和受体方法构建的TMA之间核心长度的显着差异源于在选择构建方法时在决策过程中包含供体块深度。此处概述的协议采用一个阈值,当供体块的深度分别为<4 mm和4 mm时,使用胶带和受体方法构建TMA。重要的是要注意,在施工方法选择中包括供体块深度并不普遍。尽管无论供体块深度如何,都可以使用任一方法构建TMA,但在使用胶带方法进行TMA构建期间,较高的岩心可能会干扰塑料盒的放置,或者被塑料盒的放置所覆盖或倾斜。在决策过程中包括或省略标准的选择取决于实验室可用的设施,成本和所需的最终产品。在该协议的参数下,可从磁带方法构造的TMA中获得的滑动安装的TMA部分的数量明显小于从接收方法构造的TMA中获得的TMA部分的数量。尽管可以重新阻断FFPE组织以增加供体阻滞深度并使其与受体方法相容,但在重新阻断内实现相同组织取向的可能性很低。反过来,这可能需要广泛的块面以获得全脸切片,这可能包括显着的组织损失。在块面处理后,采用胶带方法构建的 TMA 可产生大约 50 个滑动安装的 TMA 截面,所有磁芯均存在。然而,确切的数量将因块而异,取决于用于构建TMA的芯的长度和被切割部分的厚度(5μm对4μm)。此外,还必须注意的是,由于它们的核心长度不同,随着TMA逐渐分段,核心将在不同的时间耗尽;该属性再次强调需要持续的病理学检查。
尽管与磁带方法相比,接收方法具有显著的优点和优势,包括更简单、更快速的施工过程,但磁带方法并不针对有经验的高通量实验室。它针对的是普通实验室,特别是那些在资源有限的环境中的实验室,他们可以访问不同深度的供体区块,但不能获得TMA建筑服务。然而,未来的应用可以看到这种方法的自动化,以增强高通量实验室中合格样品的池,并消除重新阻断供体阻滞的需要。总之,所描述的TMA胶带方法构建协议可以在非专业实验室中轻松建立,而无需昂贵的设备。然而,建议新用户首先应使用无价值的FFPE组织块,无组织的有色取向工具21 甚至无组织的彩色石蜡块,以便在使用珍贵组织进行TMA构建之前熟悉胶带方法技术。虽然它们的构建并非没有潜在的陷阱,但构建和使用TMA块的人都应该意识到这一点,但这种看似未经抛光的“自制”TMA构建方法可以产生高质量的,生物学相关的TMA用于研究。事实上,来自胶带法构建的TMA切片是ACSR生物储存库中最需要的组织样本之一。
Disclosures
我们没有什么可披露的。
Acknowledgments
这项工作的资金由NIH资助的艾滋病和癌症标本资源(ACSR)生物储存库(www.acsr1.com),UM1CA181255提供。
Materials
Name | Company | Catalog Number | Comments |
BX51 microscope | Olympus | BX51 | |
cellSens imaging software | Olympus | x | |
Cotton Balls | FisherBrand | 22-456-880 | |
Double sided tape (removable) | Scotch | 383534 | |
DP72 camera | Olympus | DP72 | |
Economy Lab Oven | FisherBrand | 13246516GAQ | |
Forceps | Various | x | |
Formula "R" (paraffin) | Leica | 3801450 | |
Glass microscope slides | FisherBrand | 12-550-15 | |
Low Profile Micotome Blades | Accu-Edge | 4689 | |
Microtome | Leica | RM2265 | |
Permanent marker | Electron Microscope Sciences | 72109-12 | |
Quick Ray manual tissue microarrayer set | Unitma | UT06 | |
Stainless-Steel Base Molds | FisherBrand | 22-038-209 | |
Tissue Cassette Cooling Tray | Electron Microscope Sciences | 63314 | |
Tissue Processing/Embedding Cassette | FisherBrand | 15-182-701E | |
Waterbath | Triangle Biomedical Sciences | TFB-120 | |
Wooden stick | FisherBrand | 22363158 |
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