蒙古沙鼠作为伤口愈合的动物模型

Summary

本文介绍了一种新的动物模型，用于研究角膜的解剖学和组织学及其愈合过程。这种新的动物模型使用蒙古沙鼠，其角膜与人类角膜有许多相似之处。

Abstract

角膜伤口愈合研究已经进行了很长时间，有助于减少痛苦并开发有助于改善患者眼睛健康的治疗方法。从历史上看，已经在小鼠和大鼠等啮齿动物中研究了角膜愈合，但这些模型可能无法完全模仿人类疾病。然而，关于其他啮齿动物如蒙古沙鼠（Meriones unguiculatus）的信息在角膜研究中很少。

在这里，我们描述了一种开发用于研究光屈光性角膜切除术后角膜愈合的新型动物模型的技术。由于关于 无柄分枝杆菌角膜的文献有限，我们还描述了正常角膜的组织学分析。这些研究技术也可以用于眼部疾病的研究，因为蒙古沙鼠的角膜与人类在遗传学、解剖学和生理学方面具有相似性。

Introduction

角膜伤口愈合的一些最重要的方面是上皮结构的完整性，角膜基质透明度的维持，最后是角膜折射特性^{的结果1。}

角膜是眼球前部最外层的透明组织，因此容易受到创伤、感染和烧伤;这些伤口愈合受损会损害视力健康²。

目前，有几种动物模型可用于研究角膜愈合，其中一些比其他模型更好，这取决于^要研究的物种和机制的类型1。以前对沙鼠2视网膜的调查有一些^记录。然而，到目前为止，还没有关于这些啮齿动物角膜瘢痕形成过程的已发表文献。

在这里，我们将 Meriones unguiculatus （蒙古沙鼠）作为角膜伤口愈合的动物模型。描述了光屈光性角膜切除术后引发角膜愈合的程序，这使我们能够研究不同类型的角膜瘢痕形成过程，根据活组织的动态阶段了解伤口愈合，最后，计划适当的^{未来治疗3}。光疗角膜切除术是一种高度可重复的技术，可以精确控制角膜损伤的深度和直径等参数⁴。此外，该技术不需要使用手术器械或化学溶液（例如，盐水溶液、福尔马林、酒精等）进行手术，这些手术器械或化学溶液可能会添加特定于器械或^{执行手术的}操作员的变量5。

本文介绍的实验使用了三只大小和重量相似的6个月大的雄性沙鼠（约90克）。这些程序仅在右眼中进行。一只沙鼠（称为沙鼠1或对照）没有进行光疗性角膜切除术，并被摘除以评估所有正常的眼部结构。光疗角膜切除术涉及将准分子激光产生的紫外线控制地输送到角膜，是为了进行屈^光手术而开发的6。它已被用于其他啮齿动物，如小鼠⁷。另外两只沙鼠接受了光疗性角膜切除术。其中一个在手术后24小时（称为沙鼠2）进行剜除，另一个在手术后96小时（称为沙鼠3）进行剜除。

为了进行这个实验，为每个要研究的条件拍摄随机选择的沙鼠，但这个实验以前是用每个条件总共16只沙鼠进行的。出于编辑原因，决定为每个条件使用随机选择的沙鼠（总共三只沙鼠）作为示例。

这项研究的主要目的是探索可用的最佳动物模型。然而，重要的是要注意，并非所有物种都具有与人眼相似的眼睛特征⁸。本文介绍了用于研究 无柄Mericulatus 角膜的方法以及产生角膜损伤的程序，这使我们能够研究愈合过程。

Protocol

所有研究程序均由科尔多瓦天主教大学的“实验动物护理和使用机构委员会”批准，并遵循国家研究委员会关于实验动物护理和使用指南。这些程序也得到了科尔多瓦天主教大学“健康科学学院”和“塞罗健康研究所”当局的批准。 1. 沙鼠处理和麻醉 注意：所有动物都是特异性无病原体（SFP）雄性蒙古沙鼠，并保存在免疫学和传染病研究与发…

Representative Results

在本研究中，使用组织学技术和前段补充研究（例如光学相干断层扫描）对整个角膜结构进行了彻底分析。使用前节结构的光学相干断层扫描的图像分析显示正常的上皮和基质（图1），中央和外周角膜厚度分别为160μm和106μm±2μm。其他出版物也表明，其他啮齿动物的角膜向外围变薄10。 PTK后，观察到角膜上皮的清创（?…

Discussion

角膜伤口愈合的生理学是组织再生和维持体内平衡之间的平衡。伤口过度愈合可能导致纤维化和疤痕，最终可能导致器官功能丧失。随着角膜外科手术的快速发展，了解角膜伤口愈合以及所涉及的生理和病理事件的重要性不容小觑¹¹。

多项研究工作声称，沙鼠具有许多感官特征，使它们成为视觉研究的有利物种，主要包括昼夜行为¹² 以及?…

Materials

Anesthesia	Tododrogas
Eppendorf tubes	Tododrogas
Excimer Laser	Technolas	2022445
Fluorescein	Poen
Forceps	Ofcor	3339
Formaldehyde	Tododrogas
Gloves	Tododrogas
Ketamine	Sigma-Aldrich
Optical coherence tomography	Optovue	659007
Proparacaine	Poen
Scisors	Ofcor	3336
Sterile drapes	Soporte hospitalario
Sterile gauzes	Soporte hospitalario
Syringes and needles	Tododrogas
Xylazine	Sigma-Aldrich