Summary

Valutazione del comportamento dominante-sottomesso nei ratti adulti a seguito di trauma cranico

Published: December 16, 2022
doi:

Summary

Il presente protocollo descrive un modello di ratto di lesione cerebrale traumatica indotta da percussioni fluide seguito da una serie di test comportamentali per comprendere lo sviluppo del comportamento dominante e sottomesso. L’utilizzo di questo modello di lesione cerebrale traumatica in combinazione con specifici test comportamentali consente lo studio delle menomazioni sociali a seguito di lesioni cerebrali.

Abstract

La competizione per risorse come cibo, territorio e compagni influenza significativamente le relazioni all’interno delle specie animali ed è mediata attraverso gerarchie sociali che sono spesso basate su relazioni dominante-sottomessa. La relazione dominante-sottomessa è un normale modello comportamentale tra gli individui di una specie. La lesione cerebrale traumatica è una causa frequente di compromissione dell’interazione sociale e della riorganizzazione delle relazioni dominante-sottomessa nelle coppie animali. Questo protocollo descrive il comportamento sottomesso nei ratti maschi adulti di Sprague-Dawley dopo l’induzione di lesioni cerebrali traumatiche utilizzando un modello fluido-percussione rispetto ai ratti naïve attraverso una serie di test dominante-sottomessi eseguiti tra 29 giorni e 33 giorni dopo l’induzione. Il test del comportamento dominante-sottomesso mostra come la lesione cerebrale può indurre un comportamento sottomesso negli animali in competizione per il cibo. Dopo una lesione cerebrale traumatica, i roditori erano più sottomessi, come indicato dal fatto che trascorrevano meno tempo all’alimentatore e avevano meno probabilità di arrivare per primi al trogolo rispetto agli animali di controllo. Secondo questo protocollo, il comportamento sottomesso si sviluppa dopo una lesione cerebrale traumatica nei ratti maschi adulti.

Introduction

La competizione intraspecie si verifica quando i membri della stessa specie competono per una risorsa limitata allo stesso tempo1. Al contrario, la competizione interspecie si verifica tra membri di due specie diverse2. La competizione intraspecie è divisa in due tipi, tra cui l’interferenza (adattata) e lo sfruttamento (concorso), e sorge a seconda del tipo di risorsa in contesa, come cibo e territorio3.

L’esistenza di gerarchie sociali è impossibile senza relazioni dominante-sottomessa (DSR). La dominanza si presenta come “vincente” e la subordinazione come “perdente” all’interno di coppie di animali4. Tuttavia, i DSR appaiono non solo in coppia, ma anche in gruppi di tre o più. Nel 1922, Thorleif Schjelderup-Ebbe descrisse la gerarchia di dominanza nei polli domestici. I principali segni distintivi tra gli animali dominanti e subordinati erano il tempo trascorso all’alimentatore e il comportamento aggressivo. La gerarchia di dominanza è divisa in due forme: lineare e non lineare5. La dominanza lineare coinvolge due gruppi, A e B. In questo paradigma di relazioni transitive6, il gruppo A domina il gruppo B, o il gruppo B domina il gruppo A. La dominanza non lineare si verifica quando esiste almeno una relazione circolare: A domina B, B domina C e C domina A7.

Esistono modelli per valutare il comportamento dominante-sottomesso per diverse specie, tra cui roditori, uccelli8, primati non umani 9,10,11 e umani 12. Il metodo dominante-sottomesso è ben rappresentato in letteratura ed è stato applicato come modello per valutare mania e depressione13, nonché l’attività dei farmaci antidepressivi14. Questo modello è stato utilizzato per studiare lo stress precoce della vita dopo la separazione materna in ratti adulti15. I paradigmi DSR possono essere suddivisi in tre modelli: la riduzione del modello di comportamento dominante13,16, la riduzione del modello di comportamento sottomesso 14 e il modello di inversione della clonidina della dominanza17.

Questo studio dimostra un’indagine sulla DSR attraverso compiti basati sulla competizione alimentare. I vantaggi di questo metodo sono la sua facile riproducibilità e la capacità di osservare e analizzare accuratamente il comportamento dominante-sottomesso. Inoltre, il compito comportamentale dominante-sottomesso si basa sul cibo piuttosto che sul territorio, a differenza dei compiti comportamentali comparabili, il che rende questo compito comportamentale più economico e più semplice e i ricercatori non hanno bisogno di sottoporsi a una formazione complicata per eseguire il compito ed elaborare i dati.

L’obiettivo generale del presente studio è dimostrare lo sviluppo di DSR dopo trauma cranico (TBI). Il trauma cranico è associato a menomazioni sociali, depressione e ansia. Il modello di induzione del trauma cranico è un modello standard semplice ed efficace che prevede l’induzione di lesioni cerebrali traumatiche con un dispositivo a percussione fluida18,19.

Protocol

Gli esperimenti sono stati approvati dal Comitato per la cura degli animali dell’Università Ben-Gurion del Negev.Gli esperimenti sono stati eseguiti seguendo le raccomandazioni delle dichiarazioni di Helsinki e Tokyo e le linee guida per la cura e l’uso degli animali da laboratorio della Comunità europea. Nel presente studio sono stati utilizzati ratti maschi adulti di Sprague-Dawley, del peso di 300-350 g. Gli animali sono stati alloggiati a una temperatura ambiente di 22 ° C ± 1 ° C e un’umidità del 40% -60% con …

Representative Results

Valutazione del punteggio di gravità neurologicaI deficit neurologici sono stati valutati nei ratti maschi dopo TBI utilizzando la NSS. I ratti sono stati divisi in due gruppi: un gruppo TBI e un gruppo di controllo. Il gruppo di controllo è stato sottoposto a un intervento chirurgico fittizio. L’NSS ha permesso la valutazione della funzione motoria e dell’alterazione del comportamento mediante un sistema a punti22,23; Un punteggio di 24 in…

Discussion

Studi clinici indicano che la lesione cerebrale può aumentare il rischio di disturbi psichiatrici26,27. Inoltre, TBI colpisce lo sviluppo del comportamento sociale28,29. In questo protocollo, il modello TBI ha avuto un effetto sulla presentazione del comportamento dominante-sottomesso. Il comportamento dominante-sottomesso si è manifestato in termini di tempo trascorso sull’alimentatore e chi è venuto …

Disclosures

The authors have nothing to disclose.

Acknowledgements

Il lavoro svolto fa parte della tesi di dottorato di Dmitry Frank.

Materials

2% chlorhexidine in 70% alcohol solution SIGMA – ALDRICH 500 cc For general antisepsis of the skin in the operatory field
4 boards of different thicknesses (1.5 cm, 2.5 cm, 5 cm and 8.5 cm) This is to evaluate neurological defect
4-0 Nylon suture 4-00
Bottles Techniplast ACBT0262SU
Bupivacaine 0.1 %
Diamond Hole Saw Drill 3 mm diameter Glass Hole Saw Kit Optional.
Digital Weighing Scale SIGMA – ALDRICH Rs 4,000
Dissecting scissors SIGMA – ALDRICH Z265969
Ethanol 99.9 % Pharmacy 5%-10% solution used to clean equipment and remove odors
Fluid-percussion device custom-made at the university workshop No specific brand is recommended.
Gauze Sponges Fisher
Gloves (thin laboratory gloves) Optional.
Heater with thermometer Heatingpad-1 Model: HEATINGPAD-1/2 No specific brand is recommended.
Horizon-XL Mennen Medical Ltd
Isofluran, USP 100% Piramamal Critical Care, Inc NDC 66794-017 Anesthetic liquid for inhalation
Logitech Webcam Software Logitech 2.51 Software for video camera
Operating forceps SIGMA – ALDRICH
Operating Scissors SIGMA – ALDRICH
PC Computer for USV recording and data analyses Intel Intel core i5-6500 CPU @ 3.2GHz, 16 GB RAM, 64-bit operating system
Plexiglass boxes linked by a narrow passage Two transparent 30 cm × 20 cm × 20 cm plexiglass boxes linked by a narrow 15 cm × 15 cm × 60 cm passage
Purina Chow Purina 5001 Rodent laboratory chow given to rats,  is a lifecycle nutrition that has been used in biomedical research
Rat cages (rat home cage or another enclosure) Techniplast 2000P No specific brand is recommended
Scalpel blades 11 SIGMA – ALDRICH S2771
SPSS SPSS Inc., Chicago, IL, USA A 20 package
Stereotaxic Instrument custom-made at the university workshop No specific brand is recommended
Timing device Interval Timer:Timing for recording USV's Optional. Any timer will do, although it is convenient to use an interval timer if you are tickling multiple rats
Video camera Logitech C920 HD PRO WEBCAM Digital video camera for high definition recording of rat behavior under dominant submissive test

References

  1. Birch, L. C. The meanings of competition. The American Naturalist. 91 (856), 5-18 (1957).
  2. Crombie, A. C. Interspecific competition. The Journal of Animal Ecology. 16 (1), 44-73 (1947).
  3. Riechert, S. E., Dugatkin, L. A., Reeve, H. R. Game theory and animal contests. Game Theory and Animal Behavior. , 64-93 (1998).
  4. Chase, I. D., Tovey, C., Spangler-Martin, D., Manfredonia, M. Individual differences versus social dynamics in the formation of animal dominance hierarchies. Proceedings of the National Academy of Sciences of the United States of America. 99 (8), 5744-5749 (2002).
  5. Vonk, J., Shackelford, T. K. . Encyclopedia of Animal Cognition and Behavior. , (2019).
  6. De Vries, H. An improved test of linearity in dominance hierarchies containing unknown or tied relationships. Animal Behaviour. 50 (5), 1375-1389 (1995).
  7. Appleby, M. C. The probability of linearity in hierarchies. Animal Behaviour. 31 (2), 600-608 (1983).
  8. Drent, P. J., Oers, K. v., Noordwijk, A. J. v. Realized heritability of personalities in the great tit (Parus major). Proceedings of the Royal Society of London. Series B: Biological Sciences. 270 (1510), 45-51 (2003).
  9. Sapolsky, R. M. Endocrinology alfresco: psychoendocrine studies of wild baboons. Recent Progress in Hormone Research. 48, 437-468 (1993).
  10. Shively, C. A. Social subordination stress, behavior, and central monoaminergic function in female cynomolgus monkeys. Biological Psychiatry. 44 (9), 882-891 (1998).
  11. Shively, C. A., Grant, K. A., Ehrenkaufer, R. L., Mach, R. H., Nader, M. A. Social stress, depression, and brain dopamine in female cynomolgus monkeys. Annals of the New York Academy of Sciences. 807, 574-577 (1997).
  12. Tse, W. S., Bond, A. J. Difference in serotonergic and noradrenergic regulation of human social behaviours. Psychopharmacology. 159 (2), 216-221 (2002).
  13. Malatynska, E., Knapp, R. J. Dominant-submissive behavior as models of mania and depression. Neuroscience & Biobehavioral Reviews. 29 (4-5), 715-737 (2005).
  14. Malatynska, E., et al. Reduction of submissive behavior in rats: A test for antidepressant drug activity. Pharmacology. 64 (1), 8-17 (2002).
  15. Frank, D., et al. Early life stress induces submissive behavior in adult rats. Behavioural Brain Research. 372, 112025 (2019).
  16. Knapp, R. J., et al. Antidepressant activity of memory-enhancing drugs in the reduction of submissive behavior model. European Journal of Pharmacology. 440 (1), 27-35 (2002).
  17. Malatyńska, E., Kostowski, W. The effect of antidepressant drugs on dominance behavior in rats competing for food. Polish Journal of Pharmacology and Pharmacy. 36 (5), 531-540 (1984).
  18. Kabadi, S. V., Hilton, G. D., Stoica, B. A., Zapple, D. N., Faden, A. I. Fluid-percussion-induced traumatic brain injury model in rats. Nature Protocols. 5 (9), 1552-1563 (2010).
  19. Boyko, M., et al. Traumatic brain injury-induced submissive behavior in rats: Link to depression and anxiety. Translational Psychiatry. 12 (1), 239 (2022).
  20. Jones, N. C., et al. Experimental traumatic brain injury induces a pervasive hyperanxious phenotype in rats. Journal of Neurotrauma. 25 (11), 1367-1374 (2008).
  21. Frank, D., et al. A novel histological technique to assess severity of traumatic brain injury in rodents: Comparisons to neuroimaging and neurological outcomes. Frontiers in Neuroscience. 15, 733115 (2021).
  22. Frank, D., et al. A metric test for assessing spatial working memory in adult rats following traumatic brain injury. Journal of Visualized Experiments. (171), e62291 (2021).
  23. Frank, D., et al. Induction of diffuse axonal brain injury in rats based on rotational acceleration. Journal of Visualized Experiments. (159), e61198 (2020).
  24. Zlotnik, A., et al. β2 adrenergic-mediated reduction of blood glutamate levels and improved neurological outcome after traumatic brain injury in rats. Journal of Neurosurgical Anesthesiology. 24 (1), 30-38 (2012).
  25. Frank, D., et al. A novel histological technique to assess severity of traumatic brain injury in rodents: Comparisons to neuroimaging and neurological outcomes. Frontiers in Neuroscience. 15, 733115 (2021).
  26. Marinkovic, I., et al. Prognosis after mild traumatic brain injury: Influence of psychiatric disorders. Brain Sciences. 10 (12), 916 (2020).
  27. Robert, S. Traumatic brain injury and mood disorders. Mental Health Clinician. 10 (6), 335-345 (2020).
  28. Sabaz, M., et al. Prevalence, comorbidities, and correlates of challenging behavior among community-dwelling adults with severe traumatic brain injury: A multicenter study. The Journal of Head Trauma Rehabilitation. 29 (2), 19-30 (2014).
  29. Aaronson, A., Lloyd, R. B. Aggression after traumatic brain injury: A review of the current literature. Psychiatric Annals. 45 (8), 422-426 (2015).
  30. Koolhaas, J. M., et al. The resident-intruder paradigm: A standardized test for aggression, violence and social stress. Journal of Visualized Experiments. (77), e4367 (2013).
  31. Bhatnagar, S., Vining, C. Facilitation of hypothalamic-pituitary-adrenal responses to novel stress following repeated social stress using the resident/intruder paradigm. Hormones and Behavior. 43 (1), 158-165 (2003).
  32. Boyko, M., et al. The effect of depressive-like behavior and antidepressant therapy on social behavior and hierarchy in rats. Behavioural Brain Research. 370, 111953 (2019).
  33. Gruenbaum, B. F., et al. A complex diving-for-food Task to investigate social organization and interactions in rats. Journal of Visualized Experiments. (171), e61763 (2021).
  34. Grasmuck, V., Desor, D. Behavioural differentiation of rats confronted to a complex diving-for-food situation. Behavioural Processes. 58 (1-2), 67-77 (2002).
  35. Pinhasov, A., Crooke, J., Rosenthal, D., Brenneman, D., Malatynska, E. Reduction of Submissive Behavior Model for antidepressant drug activity testing: Study using a video-tracking system. Behavioural Pharmacology. 16 (8), 657-664 (2005).
  36. Nesher, E., et al. Differential responses to distinct psychotropic agents of selectively bred dominant and submissive animals. Behavioural Brain Research. 236 (1), 225-235 (2013).
check_url/64548?article_type=t

Play Video

Cite This Article
Frank, D., Gruenbaum, B. F., Semyonov, M., Binyamin, Y., Severynovska, O., Gal, R., Frenkel, A., Knazer, B., Boyko, M., Zlotnik, A. Assessing Dominant-Submissive Behavior in Adult Rats Following Traumatic Brain Injury. J. Vis. Exp. (190), e64548, doi:10.3791/64548 (2022).

View Video