Summary

Mapeo cerebral con una matriz de electrodos de grafeno

Published: October 20, 2023
doi:

Summary

Presentamos un procedimiento de mapeo cerebral basado en matrices de grafeno para reducir la invasividad y mejorar la resolución espacio-temporal. Los electrodos de superficie basados en matrices de grafeno exhiben biocompatibilidad a largo plazo, flexibilidad mecánica e idoneidad para el mapeo cerebral en un cerebro enrevesado. Este protocolo permite construir múltiples formas de mapas sensoriales de forma simultánea y secuencial.

Abstract

Los mapas corticales representan la organización espacial de las respuestas neuronales dependientes de la ubicación a los estímulos sensoriomotores en la corteza cerebral, lo que permite la predicción de comportamientos fisiológicamente relevantes. Para obtener mapas corticales se han utilizado diversos métodos, como electrodos penetrantes, electroencefalografía, tomografía por emisión de positrones, magnetoencefalografía y resonancia magnética funcional. Sin embargo, estos métodos están limitados por una resolución espacio-temporal deficiente, una baja relación señal-ruido (SNR), altos costos y falta de biocompatibilidad o daño físico al cerebro. Este estudio propone un método de mapeo somatosensorial basado en matrices de grafeno como una característica de la electrocorticografía que ofrece una biocompatibilidad superior, alta resolución espacio-temporal, SNR deseable y daño tisular minimizado, superando los inconvenientes de los métodos anteriores. Este estudio demostró la viabilidad de una guía de electrodos de grafeno para el mapeo somatosensorial en ratas. El protocolo presentado se puede aplicar no solo a la corteza somatosensorial sino también a otras cortezas como la corteza auditiva, visual y motora, proporcionando tecnología avanzada para la implementación clínica.

Introduction

Un mapa cortical es un conjunto de parches locales que representan las propiedades de respuesta a los estímulos sensoriomotores en la corteza cerebral. Son una formación espacial de las redes neuronales y permiten la predicción de la percepción y la cognición. Por lo tanto, los mapas corticales son útiles para evaluar las respuestas neuronales a estímulos externos y procesar la información sensoriomotora 1,2,3,4. Existen métodos invasivos y no invasivos para el mapeo cortical. Uno de los métodos invasivos más comunes consiste en el uso de electrodos intracorticales (o penetrantes) para el mapeode 5,6,7,8.

La evaluación de los mapas corticales de alta resolución bajo demanda utilizando electrodos penetrantes se ha enfrentado a varios obstáculos. El método es demasiado laborioso para obtener un mapa decente y demasiado invasivo para implementarlo para uso clínico, lo que impide un mayor desarrollo. Las tecnologías más recientes, como la electroencefalografía (EEG), la tomografía por emisión de positrones (PET), la magnetoencefalografía (MEG) y la resonancia magnética funcional (fMRI) han ganado popularidad porque son menos invasivas y reproducibles. Sin embargo, dados sus costos prohibitivos y su escasa resolución, se utilizan en un número limitado de casos 9,10,11. Recientemente, los electrodos de superficie flexible con una fiabilidad de señal superior han atraído una atención considerable. Los electrodos de superficie basados en grafeno demuestran biocompatibilidad a largo plazo y flexibilidad mecánica, proporcionando registros estables en un cerebro enrevesado 12,13,14,15,16. Nuestro grupo ha desarrollado recientemente una matriz multicanal basada en grafeno para el registro de alta resolución y la neuroestimulación específica del sitio en la superficie cortical. Esta tecnología nos permite realizar un seguimiento de las representaciones corticales de la información sensorial durante un período prolongado.

Este artículo describe los pasos involucrados en la adquisición de un mapa cerebral de la corteza somatosensorial utilizando una matriz de grafeno multielectrodo de 30 canales. Para medir la actividad cerebral, se coloca una matriz de electrodos de grafeno en el área subdural de la corteza, mientras que la pata delantera, la extremidad anterior, la pata trasera, la extremidad posterior, el tronco y los bigotes se estimulan con un palo de madera. Los potenciales evocados somatosensoriales (SEP) se registran para las áreas somatosensoriales. Este protocolo también se puede aplicar a otras áreas del cerebro, como la corteza auditiva, visual y motora.

Protocol

Todos los procedimientos de manejo de animales fueron aprobados por el Comité Institucional de Cuidado y Uso de Animales de la Universidad Nacional de Incheon (INU-ANIM-2017-08). 1. Preparación de los animales para la cirugía NOTA: Use Sprague Dawley Rat (8-10 semanas de edad) sin el sesgo sexual para este experimento. Anestesiar a la rata con 90 mg/kg de ketamina y 10 mg/kg de cóctel de xilacina por vía intraperitoneal. Para mantener…

Representative Results

Este protocolo describe cómo se monta una matriz multicanal de grafeno en la superficie del cerebro. El mapa somatosensorial se construyó adquiriendo respuestas neuronales a estímulos físicos y calculando la amplitud de la respuesta. La figura 1 muestra el esquema de este experimento. La Figura 2A presenta las características estructurales de una guía de electrodos de grafeno. Hay orificios pasantes del sustrato entre los electr…

Discussion

El protocolo presentado proporciona un proceso en profundidad, paso a paso, que explica cómo acceder y mapear las respuestas somatosensoriales de las ratas utilizando una matriz de electrodos de grafeno. Los datos adquiridos por el protocolo son SEP que proporcionan información somatosensorial que está vinculada sinápticamente a cada parte del cuerpo.

Deben tenerse en cuenta varios aspectos de este protocolo. Al extraer líquido cefalorraquídeo para prevenir el edema cerebral y mitigar la…

Disclosures

The authors have nothing to disclose.

Acknowledgements

Este trabajo fue apoyado por la Universidad Nacional de Incheon (Cooperativa Internacional) para Sunggu Yang.

Materials

1mL syringe KOREAVACCINE CORPORATION injecting the drug for anesthesia 
3mL syringe KOREAVACCINE CORPORATION injecting the drug for anesthesia 
Bone rongeur Fine Science Tools 16220-14 remove the skull
connector Gbrain Connect graphene electrode to headstage
drill FALCON tool grind the skull
drill bits Osstem implant grind the skull
Graefe iris forceps slightly curved serrated vubu vudu-02-73010 remove the tissue from the skull or hold wiper
graphene multielectrode array Gbrain records signals from neuron
isoflurane Hana Pharm Corporation sacrifce the subject
ketamine yuhan corporation used for anesthesia
lidocaine(2%) Daihan pharmaceutical  local anesthetic
Matlab R2021b Mathworks Data analysis Software
mosquito hemostats Fine Science Tools 91309-12 fasten the scalp
ointment Alcon prevent eye from drying out 
povidone Green Pharmaceutical corporation disinfect the incision area
RHS 32ch Stim/Record headstage intan technologies M4032 connect connector to interface cable and contain intan RHS stim/amplifier chip
RHS 6-ft (1.8m) Stim SPI interface cable intan technologies M3206 connect graphene electrode to headstage
RHS Stim/Recording controller software intan technologies Data Acquisition Software
RHS stimulation/ Recording controller intan technologies M4200
saline JW Pharmaceutical
scalpel Hammacher HSB 805-03
stereotaxic instrument stoelting fasten the subject
sterile Hypodermic Needle KOREAVACCINE CORPORATION remove the dura mater
Steven Iris Tissue Forceps KASCO 50-2026 remove the dura mater
surgical blade no.11 FEATHER inscise the scalp
surgical sicssors Fine Science Tools 14090-09 inscise the scalp and remove the dura mater
wooden stick whisker stimulation
xylazine Bayer Korea used for anesthesia

References

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Cite This Article
Kim, D., Jeong, M., Kim, E., Kim, G., Na, J., Yang, S. Brain Mapping Using a Graphene Electrode Array. J. Vis. Exp. (200), e64910, doi:10.3791/64910 (2023).

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