استراتيجيات التحكم في الميكروبات ومراقبتها لبيئات غرف الأبحاث والعلاجات الخلوية
Summary
يلخص البروتوكول أفضل الممارسات لتقليل الحمل البيولوجي الميكروبي في بيئة غرف الأبحاث ويتضمن استراتيجيات مثل المراقبة البيئية ومراقبة العمليات واختبار عقم المنتج. إنه مناسب لمرافق التصنيع والاختبار المطلوبة لتلبية معايير ممارسة الأنسجة الجيدة الحالية ومعايير ممارسات التصنيع الجيدة الحالية.
Abstract
يعد البرنامج الشامل الذي تم التحقق من صحته جيدا والذي يتضمن تدابير قوية للملابس والتنظيف والمراقبة البيئية ومراقبة الموظفين أمرا بالغ الأهمية لتقليل الحمل البيولوجي الميكروبي في أجنحة تصنيع العلاج الخلوي ومختبرات الاختبار المقابلة لضمان أن المرافق تعمل في حالة تحكم. يعد ضمان سلامة المنتج من خلال تدابير مراقبة الجودة ، مثل اختبار العقم ، مطلبا تنظيميا لكل من الحد الأدنى من التلاعب (القسم 361) وأكثر من الحد الأدنى من التلاعب (القسم 351) الخلايا البشرية والأنسجة والمنتجات الخلوية والأنسجة (HCT / Ps). في هذا الفيديو ، نقدم دليلا متدرجا لكيفية تطوير ودمج أفضل الممارسات المعقمة للعمل في بيئة غرف الأبحاث ، بما في ذلك ارتداء الملابس والتنظيف وتدريج المواد والمراقبة البيئية ومراقبة العمليات واختبار عقم المنتج باستخدام التلقيح المباشر ، المقدم من دستور الأدوية الأمريكي (USP) وطريقة اختبار العقم البديلة للمعاهد الوطنية للصحة (NIH). يهدف هذا البروتوكول إلى أن يكون بمثابة دليل مرجعي للمنشآت المتوقع أن تلبي ممارسات الأنسجة الجيدة الحالية (cGTP) وممارسات التصنيع الجيدة الحالية (cGMP).
Introduction
يعد تنفيذ برنامج قوي لمراقبة الميكروبات من خلال المراقبة البيئية (EM) ومراقبة العمليات واختبار عقم المنتج مطلبا تنظيميا لممارسات الأنسجة الجيدة الحالية (cGTP) وممارسات التصنيع الجيدة الحالية (cGMP) في مختبرات العلاج الخلوي1. بالإضافة إلى ذلك ، تتوقع إدارة الغذاء والدواء الأمريكية (FDA) أن المختبر الذي يقوم باختبار مراقبة الجودة (QC) للمنتج يجب أن يستخدم أيضا مرافق وضوابط مماثلة لتلك المستخدمة في عمليات التعبئةالمعقمة 2.
يحتوي هذا البروتوكول على أربعة أقسام رئيسية: 1) الممارسات المعقمة ، بما في ذلك ارتداء ملابس الأفراد والتنظيف وتنظيم المواد. 2) EM ، بما في ذلك ثقافات الهواء والسطح القابلة للحياة ومراقبة هواء الجسيمات غير القابلة للحياة ؛ 3) مراقبة العملية ، بما في ذلك تسوية الألواح وأخذ عينات من أطراف الأصابع ؛ و 4) اختبار عقم المنتج عبر دستور الأدوية الموجز للولايات المتحدة (USP) الطريقة 3 أو طريقة اختبار العقم البديلة للمعاهد الوطنية للصحة4. عند استخدامها معا ، يمكن أن تكون هذه التدابير طريقة فعالة لضمان بقاء المرفق في حالة سيطرة.
التقنيات الموصوفة هنا ليست جديدة. ومع ذلك ، تفتقر المعايير الحالية من المنظمين والمنظمات المهنية إلى التفاصيل ، مما أدى إلى غياب المراقبة الميكروبية أو تنفيذ الممارسات غير الموحدة ، لا سيما في المراكز الأكاديمية حيث يظهر التصنيع في الموقع واختبار عقم المنتج بمعدل سريع 1,5,6 . يمكن استخدام هذا البروتوكول كدليل لإنشاء برنامج مراقبة ومراقبة ميكروبية يلبي المتطلبات التنظيمية عند استخدامه جنبا إلى جنب مع التحقق من صحة المستخدم النهائي وتقييم المخاطر.
Protocol
Representative Results
Discussion
هناك العديد من المجالات الحرجة في هذا البروتوكول ، بما في ذلك الحفاظ على تقنية التعقيم وتدفق الهواء أحادي الاتجاه داخل غرف الأبحاث و BSCs. تشمل أفضل الممارسات التحرك ببطء وبشكل متعمد لتقليل الاضطرابات. يجب إجراء عمليات التلاعب المعقمة من جانب المنتج ، وليس من الأعلى. يوصى بمعالجة النظام الم…
Disclosures
The authors have nothing to disclose.
Acknowledgements
تم دعم هذا العمل من قبل برنامج البحوث الداخلية للمركز السريري للمعاهد الوطنية للصحة. المحتوى هو مسؤولية المؤلفين وحدهم ولا يمثل الآراء الرسمية للمعاهد الوطنية للصحة.
Materials
| 20-25°C Incubator | Lab preference | ||
| 30-35°C Incubator | Lab preference | ||
| Alcohol-based hand sanitizer | Lab preference | ||
| BacT/ALERT Dual-T instrument | BioMerieux Industry | ||
| Beard cover | Lab preference | ||
| Biosafety cabinet (BSC) | Lab preference | ||
| Cleanroom shoes | Lab preference | ||
| Fluidthioglycollate medium (FTM) | Hardy Diagnostics | U84 | USP |
| Handheld cleaning mop | Contec | 2665LF | |
| Hypodermic needle | Lab preference | ||
| iFA+ BacT/ALERT bottle | Biomerieux | 412990 | |
| iFN+ BacT/ALERT bottle | Biomerieux | 412991 | |
| Isokinetic head | Lab preference | ||
| Laser particle counter | TSI Incorporated | 9500-01 | |
| LpH III | Steris | 1S16CX | |
| Mirror | Lab preference | ||
| Non-sterile bouffant | Lab preference | ||
| Non-sterile gloves | Lab preference | ||
| Non-sterile shoe covers | Lab preference | ||
| Non-sterile sleeve covers | Lab preference | ||
| Parafilm | Lab preference | ||
| Peridox RTU | Contec | CR85335IR | |
| Plastic bag | Lab preference | ||
| Sabouraud Dextrose Agar with Lecithinase and Tween (SABLT) | Hardy Diagnostics | P595 | USP, irradiated |
| Sabouraurd Dextrose Agar (SAB) | Hardy Diagnostics | W565 | USP, irradiated |
| Safety glasses | Lab preference | ||
| Scrubs (top and bottom) | Lab preference | ||
| Spor-Klenx RTU | Steris | 6525M2 | |
| Sterile 70% isopropyl alcohol (IPA) | Decon CiDehol | 8316 | |
| Sterile alcohol wipe | Lab preference | ||
| Sterile boot covers | Kimberly Clark | Cat# varies based on size | |
| Sterile coveralls | Kimberly Clark | Cat# varies based on size | |
| Sterile face mask | Lab preference | ||
| Sterile gloves | Lab preference | ||
| Sterile hood | Kimberly Clark | Cat# varies based on size | |
| Sterile low-lint wipes | Texwipe | TX3210 | |
| Sterile mop cleaning pads | Contec | MEQT0002SZ | |
| Sterile sleeve covers | Kimberly Clark | 36077 | |
| Sterile spreading rod | Fisher Scientific | 14665231 | |
| Sterile syringe | Lab preference | ||
| Tacky mats | Lab preference | ||
| Tryptic Soy Agar (TSA) | Hardy Diagnostics | W570R | USP, irradiated |
| Tryptic Soy Agar with Lecithinase and Tween (TSALT) | Hardy Diagnostics | P520R | USP, irradiated |
| Tryptic Soy Broth (TSB) | Hardy Diagnostics | U46 | USP |
| Tubing | Lab preference | ||
| Vesphene III | Steris | 1S15CX | |
| Viable air sampler | Hardy Diagnostics | BAS22K | |
| Vortex | Lab preference |
References
- Cundell, T., Atkins, J. W., Lau, A. F. Sterility testing for hematopoietic stem cells. Journal of Clinical Microbiology. , (2023).
- United States Food and Drug Administration. Guidance for Industry. Sterile Drug Products Produced by Aseptic Processing – Current Good Manufacturing Practice. United States Food and Drug Administration. , (2004).
- United States Pharmacopeia – National Formulary. USP<71> Sterility Tests in USP43-NF38. United States Pharmacopeia – National Formulary. , (2022).
- England, M. R., Stock, F., Gebo, J. E. T., Frank, K. M., Lau, A. F. Comprehensive evaluation of compendial USP<71>, BacT/Alert Dual-T, and Bactec FX for detection of product sterility testing contaminants. Journal of Clinical Microbiology. 57 (2), 01548 (2019).
- Gebo, J. E. T., East, A. D., Lau, A. F. A side-by-side comparison of clinical versus current good manufacturing practices (cGMP) microbiology laboratory requirements for sterility testing of cellular and gene therapy products. Clinical Microbiology Newsletter. 43 (21), 181-191 (2021).
- Gebo, J. E. T., Lau, A. F. Sterility testing for cellular therapies: What is the role of the clinical microbiology laboratory. Journal of Clinical Microbiology. 58 (7), 01492 (2020).
- International Organization for Standardization. ISO 14644-1:2015 Cleanrooms and associated controlled environments – Part 1: Classification of air cleanliness by particle concentration. International Organization for Standardization. , (2015).
- Parenteral Drug Association. PDA Technical Report No. 13 Revised 2022 (TR 13) Fundamentals of an Environmental Monitoring Program. Parenteral Drug Association, Inc. , (2022).
- United States Pharmacopeia – National Formulary. USP<1116> Microbiological Evaluation of Cleanrooms and Other Controlled Environments in USP43-NF38 2S. United States Pharmacopeia – National Formulary. , (2020).
- Guinet, R., et al. Multicenter study on incubation conditions for environmental monitoring and aseptic process simulation. PDA journal of pharmaceutical science and technology. 71 (1), 43-49 (2017).
- Gordon, O., Berchtold, M., Staerk, A., Roesti, D. Comparison of different incubation conditions for microbiological environmental monitoring. PDA Journal of Pharmaceutical Science and Technology. 68 (5), 394-406 (2014).
- Anders, H. J., et al. Multisite qualification of an automated incubator and colony counter for environmental and bioburden applications in pharmaceutical microbiology. PDA Journal of Pharmaceutical Science and Technology. , (2022).
- United States Pharmacopeia – National Formulary. USP<1072> Disinfectants and Antiseptics. United States Pharmacopeia – National Formulary. , (2020).
- United States Pharmacopeia – National Formulary. USP<1071> Rapid Microbial Tests for Release of Sterile Short-Life Products: A Risk-Based Approach in USP43-NF38 2S. United States Pharmacopeia – National Formulary. , (2020).
- United States Pharmacopeia – National Formulary. PUSP<1223> Validation of Alternative Microbiological Methods in USP43-NF38 2S. United States Pharmacopeia – National Formulary. , (2020).
- Parenteral Drug Association. PDA Technical Report No. 33, Revised 2013 (TR 33) Evaluation, Validation and Implementation of Alternative and Rapid Microbiological Methods. Parenteral Drug Association, Inc. , (2013).
- Putnam, N. E., Lau, A. F. Comprehensive study identifies a sensitive, low-risk, closed-system model for detection of fungal contaminants in cell and gene therapy products. Journal of Clinical Microbiology. 59 (11), 0135721 (2021).
- Pharmaceutical Inspection Convention & Pharmaceutical Inspection Co-operation. Guide to Good Manufacturing Practice for Medicinal Products Annexes (PE 009-16 (Annexes)). Pharmaceutical Inspection Convention & Pharmaceutical Inspection Co-operation Scheme. , (2022).
- United States Pharmacopeia – National Formulary. USP<825> Radiopharmaceuticals – Preparation, Compounding, Dispensing, and Repackaging in USP43-NF38 2S. United States Pharmacopeia – National Formulary. , (2020).
