Modèle d’occlusion transitoire de l’artère cérébrale moyenne de l’AVC

Résumé

Ce protocole décrit le modèle d’ischémie cérébrale focale transitoire chez la souris par occlusion intraluminale de l’artère cérébrale moyenne. De plus, des exemples d’évaluation des résultats sont présentés à l’aide de l’imagerie par résonance magnétique et de tests comportementaux.

Résumé

L’AVC est l’une des principales causes de décès ou d’invalidité chronique dans le monde. Néanmoins, les traitements optimaux existants se limitent aux thérapies de reperfusion pendant la phase aiguë de l’AVC ischémique. Pour mieux comprendre la physiopathologie de l’AVC et développer des approches thérapeutiques innovantes, les modèles in vivo d’AVC chez les rongeurs jouent un rôle fondamental. La disponibilité d’animaux génétiquement modifiés a particulièrement favorisé l’utilisation de souris comme modèles expérimentaux d’AVC.

Chez les patients victimes d’un AVC, l’occlusion de l’artère cérébrale moyenne (ACM) est un phénomène fréquent. Par conséquent, le modèle expérimental le plus répandu implique l’occlusion intraluminale de l’ACM, une technique peu invasive qui ne nécessite pas de craniectomie. Cette procédure consiste à insérer un monofilament à travers l’artère carotide externe (ECA) et à le faire progresser à travers l’artère carotide interne (ICA) jusqu’à ce qu’il atteigne le point de ramification de l’ACM. Après une occlusion artérielle de 45 min, le monofilament est retiré pour permettre la reperfusion. Tout au long du processus, le flux sanguin cérébral est surveillé pour confirmer la réduction lors de l’occlusion et la récupération ultérieure lors de la reperfusion. Les résultats neurologiques et tissulaires sont évalués à l’aide de tests comportementaux et d’études d’imagerie par résonance magnétique (IRM).

Introduction

L’accident vasculaire cérébral est une maladie dévastatrice qui touche environ 15 millions de personnes dans le monde chaque année, selon l’OMS. Environ un tiers des patients succombent à la maladie, tandis qu’un autre tiers souffre d’une invalidité permanente. L’accident vasculaire cérébral est une pathologie complexe impliquant divers types de cellules, telles que les cellules immunitaires neurales et périphériques, le système vasculaire et les réponses systémiques¹. Le réseau complexe de réactions déclenchées par un accident vasculaire cérébral au niveau du système ne peut actuellement pas être reproduit à l’aide de modèles in vitro....

Protocole

Le travail sur les animaux a été réalisé conformément aux lois catalane et espagnole (Real Decreto 53/2013) et aux directives européennes, avec l’approbation du Comité Esthétique d’Expérimentation Animale (CEEA) de l’Université de Barcelone et des organismes de réglementation locaux de la Generalitat de Catalunya. Les études sont rapportées conformément aux lignes directrices d’ARRIVE. Cette procédure est conçue pour être réalisée chez des souris adultes, à partir de l’âge de 8 semaines, sans limite d’âge. Des exemples d’intervention chirurgicale développée chez des souris C57BL/6 âgées de 10 à 12 semaines sont fournis ici. Les différences anatomiques en fonction de l....

Résultats

Il existe différentes approches pour évaluer le résultat de la procédure tMCAo. Des méthodes de neuroimagerie (IRM) in vivo et des tests comportementaux sont utilisés ici.

Les souris développent des lésions ischémiques dans le cerveau, affectant principalement le territoire alimenté par le MCA ipsilatéral à l’occlusion, comme le striatum et le cortex dorsolatéral. Plusieurs méthodes existent pour déterminer l’étendue de la lésion, notamment la coloration tissulaire au chlorure de 2,3,.......

Discussion

La procédure tMCAo intraluminale est le modèle le plus couramment utilisé d’ischémie cérébrale focale avec reperfusion dans la recherche fondamentale. À l’heure actuelle, les souris sont le modèle animal privilégié en raison de la disponibilité de souches génétiquement modifiées. Cependant, il est essentiel de reconnaître que les souris génétiquement modifiées et leurs antécédents génétiques peuvent avoir un impact sur la vascularisation du cerveau. La présence d’une circulation collatérale et d’anastomoses entre différe.......

Matériaux

Liste des matériaux utilisés dans cet article

Nom	Entreprise	Numéro de catalogue	Commentaires
6/0 suture  ;	Arago		Ligatures vasculaires
6/0 suture avec aiguille incurvée	Arago		Sutures cutanées
9 mg/mL Saline	Fresenius Kabi	CN616003 EC	Pour l’hydratation
Système d’anesthésie	SurgiVet
Écarteurs émoussés, 1 mm de large	Outils scientifiques fins	18200-09
Buprenorfine	Buprex		Pour soulagement de la douleur
Pince d’application de pinces	Outils de science fine	S& T CAF4
Dumont mini pince	Outils de sciences fines	M3S 11200-10
Pinces	Outils de sciences fines	91106-12
Colle	Loctite		Pour coller la sonde LDF sur le crâne
Appareil de mesure de la force de préhension	IITC Life Science Inc.	#2200
Isoflurane	B-Braun	CN571105.8
LDF Perimed Perimed Perimed	Periflux	System 5000
LDF Supports de sonde	Perimed	PH 07-4
Bande
Aimant IRM	Bruker BioSpin, Ettlingen, Allemagne		BioSpec 70/30 scanner horizontal pour animaux  ;
Porte-aiguille avec coupe-suture	Outils pour les sciences fines	12002-14
Filament de nylon	Doccol	701912PK5Re
Cage de récupération avec coussin
Ciseaux Sirgical	Outils pour les sciences fines	91401-12
Kit de cauterisateur pour petits récipients	Outils pour les sciences fines	18000-00
Stéréomicroscope et lumière froide	Leica	M60
Pince à suture	Fine Science Tools	18025-10
Thermostat, sonde rectale et tapis de souris	Letica Science Instruments	LE 13206
Ciseaux à ressort Vannas (tranchant de 4 mm)	Fine Science Tools	15019-10
Pinces vasculaires	Fine Science Tools	00396-01

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