Summary
Her beskriver vi identifikationen af Rhodiola Crenulata fra habitat, plantemorfologi, medicinske egenskaber, mikroskopiske egenskaber og tyndtlagskromatografi.
Abstract
Identifikation af medicinske materialer er forudsætningen og garantien for lægemiddelsikkerhed. De fleste videnskabelige forskere er bundet til at favorisere den enkle, hurtige, effektive og billige identifikationsproces af naturlægemidler. Rhodiola crenulata er en traditionel tibetansk medicin dyrket i store højder, hovedsageligt fordelt i Tibet, Yunnan og Sichuan regioner i Kina. Rosenrod crenulate besidder flere bioaktiviteter, såsom antiinflammatoriske, anti-hypoxi, og antioxidant egenskaber, og har stort potentiale for udvikling. Med den stigende efterspørgsel på markedet og et hurtigt fald i ressourceindholdet har et stort antal forvirrede produkter af Rhodiola crenulata været bekymrende for mennesker. Derfor introducerer denne protokol en standardproces til identifikation af Rhodiola crenulata i marken kombineret med rutinemæssig laboratorietest. Kombinationen af habitat, mikroskopiske træk og tyndtlagskromatografi vil utvivlsomt identificere Rhodiola crenulata hurtigt, effektivt og økonomisk, hvilket bidrager til den fortsatte udvikling af tibetansk medicin og kvalitetskontrol af medicinske materialer.
Introduction
Urtemedicin har en lang historie og rig applikationserfaring i Kina, og det var den første systematiske registrering i Shennongs urteklassiker1. Opdagelsen af artemisinin anvendt på malaria fremmet udviklingen af urtemedicin i en ny fase1. Brugen af moderne videnskabelig teknologi til at afdække den nøjagtige mekanisme for urtemedicin øger udnyttelsesgraden og efterspørgslen efter urtemedicin og åbner et nyt internationalt marked for det 2,3,4. Dette har imidlertid ført til en række negative virkninger. Ikke-professionelle har en vag forståelse af egenskaberne ved urtemedicin, hvilket gør brugen af urtemedicin til en enorm sikkerhedsrisiko5.
Rhodiola crenulata, en af planterne af Rhodiola-arten, er hovedsageligt udbredt i Tibet, nordvest Yunnan og vestlige Sichuan i Kina (figur 1)6,7. Rhodiola crenulata omfatter salidrosid, tyrosol, gallinsyre og andre forbindelser til behandling af hypoxisk-relaterede sygdomme gennem funktionen af "forfriskende qi og fremme blodcirkulationen, rydning puls og beroligende astma"8,9,10,11. Feltundersøgelser viser, at Rhodiola crenulata kan findes i de alpine taluszoner, kløftskråninger og klippesprækker i en højde af 4.000-5.600 m. Dens voksende miljø er koldt, fuld af solskin og intens stråling, og det tilhører det alpine engøkosystem. Rhodiola crenulata kan fordeles i lamellære og punktlignende populationer i henhold til vækstterrænet, og genstrømmen kan udføres gennem krydsbestøvning.
Pollenabort af slægten Rhodiola, ulovlighedsudgravning og degenereret økologisk miljø gør Rhodiola crenulata til en truet art 6,12. I betragtning af den høje medicinske værdi af Rosenrod crenulata forventes forfalskede produkter at strømme ind på markedet. Denne artikel præsenterer Rhodiola crenulata's levested og nogle praktiske laboratorieidentifikationsmetoder. For det første observerede vi vækstmiljøet af Rhodiola crenulata og dets medicinske egenskaber. For det andet blev mikrostrukturen af medicinsk pulver observeret ved mikroskop. Det sidste trin er nøglepunktet. De repræsentative komponenter i Rhodiola crenulata blev separeret og identificeret i henhold til de forskellige adsorptions- eller opløsningsegenskaber af disse komponenter i et bestemt stof. DNA-baseret autentificering eller metabolomics-analysemetoder for lægeplanter er komplicerede og dyre13. Disse grundlæggende, bekvemme, og økonomiske metoder kan hurtigt identificere Rosenrod crenulata.
Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.
Protocol
Rhodiola crenulata indsamles fra Zhuoda Snow Mountain, Ganzi County, Ganzi Tibetan Autonomous Prefecture, Sichuan-provinsen, Kina (N 31.44570°, E 99.96086°, 4892 m). Planterne er godkendt som ægte af professor Yi Zhang ved School of Ethnic Medicine, Chengdu University of Traditional Chinese Medicine.
1. Indsamling af Rhodiola crenulata
- Fotografer habitatkortet over Rhodiola crenulata.
- Fotografer hele planten, blade, bæger og rhizom af Rhodiola crenulata.
- Brug en spade til at rydde ukrudt og brudte sten inden for 1 m fra Rhodiola crenulata for at sikre den efterfølgende glatte minedrift.
- Grav jorden op med en hakke, indtil hele rhizosfæren ses, og saml taproot.
BEMÆRK:Rødderne og rhizomerne af Rhodiola crenulata , der anvendes i medicinske dele, skal indsamles om efteråret, når blomsterstængerne visner.
2. Karakteristisk identifikation
- Overhold udseendet træk af Rhodiola crenulata med det blotte øje: cylindriske og korte taproots og jordstængler, brun overflade, membranøs gul epidermis med et lyserødt mønster og orange-røde eller burgunderskiver.
- Identificer det ved lugt: Det giver en duftende lugt, når den er nær næsen.
- Identificer det efter smag: Tag et lille stykke rod i munden, tag først slurk og tyg derefter, smag lidt bittert og derefter sødt.
3. Mikroskopisk identifikation af stivelsesgranulat i lægemiddelpulver
- Fjern jorden på overfladen af Rhodiola crenulata med en børste, sæt den i ovnen ved 40 ° C, og vend urterne hver 24. time.
BEMÆRK: Den lette nedbrydning af medicinske materialer betragtes som standarden for tørring af fugt. - Pulver de tørrede medicinske materialer ved hjælp af en pulvermaskine og filtrer det medicinske pulver ved hjælp af den medicinske sigte nr. 3 (se tabel over materialer).
- Tag et rent objektglas (se Materialetabel), grav pulveret med en disseknål (se Materialetabel), og placer det jævnt på en tredjedel af objektglasset inden for 2 mm.
- Brug en glaspipette (se tabel over materialer) til at tilføje en dråbe deioniseret vand til pulveret. Brug en pincet (se Materialetabel) til at holde den ene ende af dækglasset (se Materialetabel) for hurtigt at røre væskeniveauet og dække pulveret.
BEMÆRK: Brug en anatomisk nål til forsigtigt at blande vand og medicinsk pulver for at sikre ensartet prøveblanding. Der bør ikke være luftbobler mellem diaset, pulveret og dækglasset. - Åbn mikroskopet (se materialetabellen), og placer diaset i trin 3.4 på platformen for at fastgøre det. Juster lyskilden og den grove fokusspiral for at se pulveret. Juster den fine parafokale spiral, indtil vævene ses tydeligt. Skift til et 40x mål og observer stivelsesgranulatet.
BEMÆRK: Stivelse kornene præsenterer sig som enkelt eller flere korn, og navlestrengen fremstår sildeben eller revneformet.
4. Mikroskopisk identifikation af katetre, korkceller, fibre, træparenkymceller og pigmentmasser i medicinsk pulver
- Tag et rent dias (se Materialetabel), grav pulveret med en disseknål (se Materialetabel), og placer det på en tredjedel af diaset.
- Brug en glasdråber (se Materialetabel) til at tilsætte en dråbe chloralhydrat (se Materialetabel) til pulveret. Tag diaset med en pincet (se materialetabel) og opvarm det i alkohollampen tre gange, hver gang i 1 s.
BEMÆRK: Bobler bør undgås under opvarmning. Væsken forbliver ikke-flydende, hvilket indikerer, at penetrationen er komplet. - Brug en glasdråber til at tilføje en dråbe glycerin (se materialetabel). Brug en pincet til at holde den ene ende af dækglasset for hurtigt at røre væskeniveauet.
- Åbn mikroskopet, og placer diaset på platformen for at sikre det. Juster lyskilden og den grove fokusspiral for at se pulveret. Juster den fine parafokale spiral, indtil vævene ses tydeligt. Overhold kateteret, korkcellerne, fibrene, træparenkymcellerne og pigmentblokken ved at skifte til en 40x objektivlinse.
BEMÆRK: Polygonal eller lang polygonal af korkceller, spiralbeholder med tydelig spiralformet struktur, xylemparenchyma indeholdende calciumoxalatsandkrystaller og rød eller brunrød pigmentblok.
5. Fremstilling af tyndtlagskromatografiske (TLC) prøver af Rhodiola crenulata og dens reference
- Læg vejepapiret på vægten (se Tabel over materialer) og vej 3 g pulver af Rhodiola crenulata.
- Tag pulveret i en 100 ml konisk flaske (se tabel over materialer), og tilsæt 25 ml methanol med en stor mavepipette (se tabel over materialer). Sæt den koniske flaske i ultralydsinstrumentet. Indstil effekten til 250 W, frekvensen til 40 kHz og tiden til 30 min (se materialetabellen), og tænd for instrumentet.
BEMÆRK: Formålet med ultralydsinstrumentet er at sikre, at pulveret af Rhodiola crenulata opløses fuldstændigt uden at påvirke resultaterne af efterfølgende tyndtlagskromatografiske eksperimenter. - Fjern den koniske flaske og skyl den ydre flaske med rindende vand til stuetemperatur (RT).
- Opsug 800 μL væske fremstillet i trin 5.3 med en 1 ml sprøjte. Der filtreres med 0,22 μm mikroporøs filtermembran (se materialetabellen), og der opsamles 400 μL midstream-prøveopløsning af Rhodiola crenulata i en kromatografisk prøveflaske.
- Vej og tilsæt 2 mg salidrosid, tyrosol og gallinsyre (se materialetabel) i henholdsvis 3 separate 100 ml koniske flasker. Tilsæt 25 ml methanol med en stor mavepipette i hver konisk flaske.
- Sæt den koniske flaske i ultralydsinstrumentet, indstil effekten til 250 W, frekvens til 40 kHz og tid til 30 minutter, og gentag trin 5.3 (se materialetabel).
- Aspirat 800 μL væske fremstillet i trin 5.6 med en 1 ml sprøjte. Der filtreres med 0,22 μm mikroporøs filtermembran (se materialetabellen), og 400 μL midstream-salidrosid-, tyrosol- og gallinsyrestandardopløsning opsamles i tilsvarende kromatografiske prøveflasker.
6. TLC-identifikation
- Pipettetrichlormethan (5 ml), ethylacetat (4 ml), methanol (2 ml) og myresyre (0,5 ml) (se materialetabel). Tilsæt til den ene side af dobbelttankkromatograficylinderen (se materialetabel), ryst og bland jævnt. Dæk det øverste topstykke.
- Gallinsyre, salidrosid, tyrosol standardopløsning og Rhodiola crenulata-opløsning anbringes på prøvestativet i position A1-A4.
- Placer silikonepladen på 5 cm x 10 cm (se Materialetabel) på prøvetagningsbordet. Start den automatiske prøveudtagningsmaskine (se materialetabellen), og åbn luftreguleringsventilen.
- Åbn visionCATS-softwaren (se materialetabellen). Klik på Ny > Ny mappe (kaldet Rhodiola crenulata prøvetest) > OK. Klik på Ny metode (navn Rhodiola crenulata prøvetest) > OK > ATS 4.
- Klik på Afslut trindefinition. Klik på Spor tildeling for at redigere beskrivelsen (gallinsyre, salidrosid, tyrosol og Rosenrod crenulata-prøve ).
- Klik på HPTLC-trin. Indstil tyndtlagsparametrene (5 cm x 10 cm). Vælg Programtype (bånd), indstil parametrene (tabel 1), og klik på knappen OK .
- Åben påfyldnings-/skyllekvalitet. Markér Udfyld kun programmeret diskenhed. Indstil hætteglassets nederste niveau (mm) til 0,5, og klik på knappen OK.
- Klik på Udfør metode.
- Klik på knappen Spor tildeling , markér Centrer, og indstil parametrene (tabel 2).
- Klik på knappen Fortsæt for automatisk prøveudtagning.
- Sluk for den automatiske prøveudtagningsmaskine og luftventil. Fjern silikonearket fra den automatiske prøveudtagningsmaskine.
- Sæt silikonepladen i den anden side af dobbelttankkromatograficylinderen i trin 6.1, dæk det øverste topstykke, og formæt i 20 minutter.
- Klem forsigtigt den øverste ende af den tynde lagplade med en pincet, sæt hurtigt silikonepladen i udviklingsmidlet og dæk det øverste cylinderhoved.
BEMÆRK: Tag silikonepladen ud, når den udfoldede forkant er 0,5-1,0 cm væk fra den øverste ende af tyndlagspladen. - Når det organiske opløsningsmiddel er fordampet, sprøjtes den kromogene opløsning på overfladen af silikonepladen ved stuetemperatur for at opnå kromogene resultater.
BEMÆRK: Den kromogene opløsning er en vandig opløsning indeholdende 2%FeCl3 og 1%K3[Fe(CN)6].
Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.
Representative Results
Denne eksperimentelle protokol beskriver identifikation og indsamling af Rosenkålat i marken. Rosenrod crenulate tendens til at leve i de alpine talus zoner, gully skråninger, og rock sprækker i store højder. Habitatet, hele planten, blomsten og blade af Rhodiola crenulate kan vises i figur 2. Rhodiola crenulate har et rødbrunt rhizom (figur 3A). Et repræsentativt billede af lægemiddelpulveret er vist i figur 3B. Ifølge ovenstående eksperimentelle protokol kan de mikroskopiske resultater angives som følger: 1) brungule eller farveløse korkceller, stort udseende, polygonalt eller langt polygonalt med lidt tykkere vægge (figur 3C); 2) stivelseskorn, der viser sig som enkelte eller flere korn, og navlestrengsspids, der fremstår sildebens- eller revneformet (figur 3D); 3) hovedsageligt spiralfartøjer, der er tæt arrangeret (figur 3E); 4) achromatøs og ovalt xylemparenchyma, der præsenterer sig i ark og indeholder calciumoxalatsandkrystaller (figur 3F); 5) uregelmæssig formet, brunrød pigmentblok (figur 3G). Resultaterne af tyndtlagsadskillelsen viste, at Rhodiola crenulata-prøven (A4) fremstod som pletter af samme farve i positionen svarende til kromatogrammet for gallinsyren (A1), salidrosid (A2), tyrosol standardopløsning (A3) (figur 3H). Gallinsyre, salidrosid og tyrosol er de primære og repræsentative komponenter i Rhodiola crenulat. Disse resultater viser, at en foreløbig identifikation af Rhodiola crenulata er mulig med de tests, der diskuteres i protokollen.
Figur 1: Distributionskort over Rosenrod crenulata. (A) Rhodiola crenulata distribueres hovedsageligt i Kina, Indien, Nepal og Bhutan14. (B) Rhodiola crenulata distribueres hovedsageligt i Tibet, Qinghai, Sichuan, Yunnan og Guizhou i Kina (produceret af soft ArcGis 10.6). Statistiske data kommer fra webstederne for Institut for Botanik15,16. Klik her for at se en større version af denne figur.
Figur 2: Billede af Rhodiola crenulata plante. (A) Biotop af rhodiola crenulat. (B) Tæt skud af Rosenrod crenulate. (C) Hele planten af Rhodiola crenulat. (D) Blomst af Rhodiola crenulata. (E) Blade af Rosenrod crenulate. Klik her for at se en større version af denne figur.
Figur 3: Mikroskopiske egenskaber og tyndtlagskromatogram af Rhodiola crenulata. (A) Medicinsk rod af Rhodiola crenulata. (B) Rosenrod crenulata's medicinske materialestyrke. C) Korkcelle. D) Stivelsesholdige korn. e) Spiralbeholder. F) Xylemparenchyma (calciumoxalatkrystal). g) Pigment. (H) Tyndtlagskromatografiseparation af salidrosid (A1), gallinsyre (A2), tyrosol (A3) og Rhodiola crenulata (A4). Klik her for at se en større version af denne figur.
| Parametre | Valgmulighed |
| Anvendelsesposition Y (mm) | 10 |
| Første sporposition (mm) | 10 |
| Sporafstand (mm) | 10 |
| Påføringslængde (mm) | 5 |
| Anvendelsesbredde (mm) | 0.5 |
Tabel 1: Parameterindstillinger for automatisk prøveudtagningsposition.
| Hætteglas ID | Beskrivelse | Volumen (μL) | Position | Slags |
| 1 | Salidrosid | 3 | A1 | Henvisning |
| 11 | Gallinsyre | 1 | A2 | Henvisning |
| 12 | tyrosol | 2 | A3 | Henvisning |
| 13 | Rhodiola crenulate prøve | 2 | A4 | Prøve |
Tabel 2: Parameterindstillinger for automatisk prøveudtagningsrækkefølge.
Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.
Discussion
Der er mere end 90 arter af Rhodiola planter i verden, og mere end 60% af alle arter findes i Kina, almindelige, herunder Rhodiola crenulata, Rhodiola rosea, Rhodiolas achalinensis, og Rhodiola algida17. Rhodiola crenulata, optaget i den første del af den kinesiske farmakopé (2020), er en traditionel tibetansk medicin dyrket i store højder. Markedets efterspørgsel efter Rhodiola crenulata stiger årligt, så sikring af korrekt brug af kilden er nøglen til at sikre sikker brug. Især kan standardiseringen fra feltplukning til enkel og hurtig laboratorierutinemæssig identifikation ikke ignoreres. Det er blevet rapporteret, at højtydende væskekromatografi, massespektrometri, og inter simple sekvens gentagelser kan præcist identificere Rhodiola crenulate fra andre Rhodiola arter, som er tidskrævende, kompleks, og dyre 18,19,20. I mellemtiden har vi etableret en multidimensionel evalueringsmetode til sensorisk genkendelse (E-næse og farveanalyse) og HPLC-metode til at skelne Rhodiola crenulate21,22.
Hvert lægemiddelmateriale har sit unikke vækstmiljø, mikroskopiske strukturegenskaber og indekskomponenter. Denne protokol giver en omfattende metode til identifikation af Rhodiola crenulata, fra feltidentifikation til laboratoriemikroskopi og validering ved hjælp af tyndtlagskromatografi. Rhodiola crenulata vokser hovedsageligt i højder større end 3000 m, lav temperatur, lavt iltindhold og områder med høj ultraviolet stråling23. Rhodiola crenulata er en saftig urt, som er dens intuitive visuelle funktion. Dens pulver fremstår rødbrun med en duftende lugt. Baseret på sine vaner, plantemorfologi, blomster og blade skelnes Rhodiola crenulata fra andre Rhodiola-arter i marken. De mikroskopiske resultater af medicinske materialer viste eksistensen af stivelsesgranulat, træparenkymceller (herunder calciumoxalatsandkrystaller), korkceller, ledning (hovedsageligt gevindledning) og store mængder rødt pigment. TLC er en kromatografisk separationsteknik til adskillelse af multikomponentprøver, der almindeligvis anvendes til identifikation af kinesiske medicinske materialer. Gallinsyre, tyrosol og salidrosid identificeres ofte som indekskomponenterne i Rhodiola crenulate24. Resultaterne af tyndtlagskromatografi viste, at opløsningen af Rhodiola crenulata viste de samme farvepletter i den tilsvarende position som kontrollen (gallinsyre, tyrosol og salidrosid). Det viser, at Rhodiola crenulata indeholder gallinsyre, tyrosol og salidrosid. Kombineret med viden om det voksende miljø og mikroskopiske resultater, Rhodiola crenulata kan foreløbigt identificeres.
Det er værd at bemærke, at det unikke vækstmiljø bestemmer, at det er næsten umuligt at have vilde Rhodiola crenulata under højden på 3000 m. Derudover anbefales det ikke at høste rødder og rhizom af Rhodiola crenulata i blomstringsperioden. Til laboratoriemikroskopisk identifikation er tørring af rødderne og sigtning af pulveret forudsætninger for en vellykket fremstilling af mikroskopiske prøver. At sikre, at der ikke er luftboble mellem diaset, det medicinske pulver og dækglasset, er også nøglen til at observere den karakteristiske sammensætning under mikroskopet. For tyndtlagskromatografi er formætning af silicagelplade, rimeligt udviklingsmiddel og prøvekoncentration vigtige faktorer for vellykket adskillelse af forskellige komponenter i testprøven. Sammenlignet med traditionel manuel prøveudtagning øger den automatiske prøveudtagningsproces i denne protokol utvivlsomt nøjagtigheden af resultaterne og eksperimentets repeterbarhed. Subjektiviteten af aroma og smagsidentifikation er for stærk og kan føre til fejlvurderinger. Sammenlignet med højtydende væskekromatografi, H-nuklear magnetisk resonans og massespektrometri kan tyndtlagskromatografi ikke kvantitativt analysere indholdet af forbindelser i medicinske materialer25. Selvom DNA-stregkodning har overlegen nøjagtighed i urteidentifikation, bestemmer dens høje pris, at den ikke er universel i identifikationen af medicinske materialer26. Desuden kan felt-til-laboratorie-identifikation og mikroskopi kombineret med tyndtlagskromatografiteknikken i denne protokol anvendes på næsten alle medicinske materialer. Dette er en billig, enkel og hurtig proces til identifikation af eventuelle medicinske urtematerialer.
Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.
Disclosures
Forfatterne har intet at afsløre.
Acknowledgments
Dette arbejde blev støttet af National Natural Science Foundation of China (81973569, 82274207 og 82104533), Xinglin Scholar Research Promotion Project fra Chengdu University of TCM (XKTD2022013) og Key Research and Development Program of Ningxia (2023BEG02012).
Materials
| Name | Company | Catalog Number | Comments |
| 0.22 μm millipore filter | Millipore | SLGP033RB | |
| Automatic sampling machine | CAMAG | ATS 4 | |
| Chloral hydrate | Fuzhou Brunei Technology Co., Ltd | ST1002 | |
| Chromatographic sample bottles | Zhejiang ALWSCI Technology Co., Ltd | C0000008 | |
| Conical flask | Sichuan Shubo Co., Ltd | 1121 | |
| Cover glass | Citotest Labware Manufacturing Co., Ltd | 10211818c | |
| Dissecting needle | Shanghai Bingyu Fluid Technology Co., Ltd | BY-5026 | |
| Electronic balance | SHIMADZU | ATX124 | |
| Ethyl acetate | Chengdu Kelong Chemical Co., Ltd | 2022120901 | |
| Formic acid | Chengdu Kelong Chemical Co., Ltd | 2021110801 | |
| Gallic acid | Chengdu Herbpurify Co., Ltd | M-017 | |
| Glycerol | Sinopharm Chemical Reagent Co., Ltd | 10010618 | |
| High speed crusher | Beijing Zhongxingweiye Instrument Co., Ltd | FW-100 | |
| Methanol | Chengdu Kelong Chemical Co., Ltd | 20230108 | |
| Microscope | Chongqing Oprec Nistrument Co., Ltd | B203 | |
| Microscope slide | Citotest Labware Manufacturing Co., Ltd | 7105P-G | |
| Oven | Shanghai Yuejin Medical Equipment Co., Ltd | DHG-8145 | |
| Pharmacopoeia sieve | Hangzhou Xingrun sieve factory | 572423281330 | |
| Pipette | Changde BKMAM Biotechnology Co., Ltd | 120302008 | |
| Salidroside | Chengdu Herbpurify Co., Ltd | H-040 | |
| Saturate tank | Yancheng Liegu Technology Co., Ltd | 10*20 P-1 | |
| Silica gel plate | Yantai Jiangyou Silica Gel Development Co., Ltd | HSG20211227 | |
| Trichloromethane | Chengdu Kelong Chemical Co., Ltd | 20221013-1 | |
| Tweezer | Changde BKMAM Biotechnology Co., Ltd | 130302027 | |
| Tyrosol | Chengdu Herbpurify Co., Ltd | L-042 | |
| Ultrasound equipment | Ningbo Xinyi Ultrasonic Equipment Co., Ltd | SB-8200DTS | |
| Volumetric pipet | Changde BKMAM Biotechnology Co., Ltd | 120301006 |
References
- Zhang, J., et al. Traditional herbal medicine and nanomedicine: Converging disciplines to improve therapeutic efficacy and human health. Advanced Drug Delivery Reviews. 178, 113964 (2021).
- Yin, R., et al. The positive role and mechanism of herbal medicine in Parkinson's Disease. Oxidative Medicine and Cellular Longevity. 2021, 9923331 (2021).
- Li, F. S., Weng, J. K. Demystifying traditional herbal medicine with modern approach. Nature Plants. 3, 17109 (2017).
- da Fonseca, L. R., et al. Herbal medicinal products from Passiflora for anxiety: An unexploited potential. The Scientific World Journal. 2020, 6598434 (2020).
- Aziato, L., Antwi, H. O. Facilitators and barriers of herbal medicine use in Accra, Ghana: an inductive exploratory study. BMC Complementary and Alternative Medicine. 16, 142 (2016).
- Tao, H., et al. Rhodiola species: A comprehensive review of traditional use, phytochemistry, pharmacology, toxicity, and clinical study. Medicinal Research Reviews. 39 (5), 1779-1850 (2019).
- Wang, Y., et al. The dietary supplement Rhodiola crenulata extract alleviates dextran sulfate sodium-induced colitis in mice through anti-inflammation, mediating gut barrier integrity and reshaping the gut microbiome. Food & Function. 12 (7), 3142-3158 (2021).
- Xie, N. Rhodiola crenulate alleviates hypobaric hypoxia-induced brain injury via adjusting NF-κB/NLRP3-mediated inflammation. Phytomedicine. 103, 154240 (2022).
- Wang, X., et al. Salidroside, a phenyl ethanol glycoside from Rhodiola crenulata, orchestrates hypoxic mitochondrial dynamics homeostasis by stimulating Sirt1/p53/Drp1 signaling. Journal of Ethnopharmacology. 293, 115278 (2022).
- Ma, D., et al. Chemical characteristics of Rhodiola Crenulata and its mechanism in acute mountain sickness using UHPLC-Q-TOF-MS/MS combined with network pharmacology analysis. Journal of Ethnopharmacology. 294, 115345 (2022).
- Wang, X., et al. Rhodiola crenulata attenuates apoptosis and mitochondrial energy metabolism disorder in rats with hypobaric hypoxia-induced brain injury by regulating the HIF-1α/microRNA 210/ISCU1/2(COX10) signaling pathway. Journal of Ethnopharmacology. 241, 111801 (2019).
- d'Avigdor, E., Wohlmuth, H., Asfaw, Z., Awas, T. The current status of knowledge of herbal medicine and medicinal plants in Fiche, Ethiopia. Journal of Ethnobiology and Ethnomedicine. 10, 38 (2014).
- Sánchez, M., González-Burgos, E., Divakar, P. K., Gómez-Serranillos, M. P. DNA-based authentication and metabolomics analysis of medicinal plants samples by DNA barcoding and ultra-high-performance liquid chromatography/triple quadrupole mass spectrometry (UHPLC-MS). Plants (Basel, Switzerland). 9 (11), 1601 (2020).
- Rhodiola renulata (Hook.fil & Thomson) H.Ohba. , Available from: https://www.gbif.org/species/4200529 (2023).
- Plant + data center. , Available from: https://www.iplant.cn/ (2023).
- Chinese virtual herbarium. , Available from: https://www.cvh.ac.cn/ (2023).
- Cunningham, A. B. There "ain't no mountain high enough"?: The drivers, diversity and sustainability of China's Rhodiola trade. Journal of Ethnopharmacology. 252, 112379 (2020).
- Wang, Q., Ruan, X., Jin, Z. H., Yan, Q. C., Tu, S. Identification of Rhodiola species by using RP-HPLC. Journal of Zhejiang University. Science. B. 6 (6), 477-482 (2005).
- Dong, X., Guo, Y., Xiong, C., Sun, L. Evaluation of two major Rhodiola species and the systemic changing characteristics of metabolites of Rhodiola crenulata in different altitudes by chemical methods combined with UPLC-QqQ-MS-based metabolomics. Molecules. 25 (18), 4062 (2020).
- Zhao, W., et al. HPLC fingerprint differentiation between natural and ex situ populations of Rhodiola sachalinensis from Changbai Mountain, China. PloS One. 9 (11), 112869 (2014).
- Yu, Y. Y. Quality evaluation of Tibetan medicine Rhodiolae crenulatae radix et rhizome based on sensory recognition and near infrared spectrum analysis. Chengdu University of Traditional Chinese Medicine. , Chinese Master's Thesis (2020).
- Lv, X. M. Simultaneous determination of 5 chemical components in 3 kinds of Rhodiola rosea by HPLC. China Pharmacy. 29 (18), 2515-2519 (2018).
- Dong, T., Sha, Y., Liu, H., Sun, L. Altitudinal variation of metabolites, mineral elements and antioxidant activities of Rhodiola crenulata (Hook.f. & Thomson) H.Ohba. Molecules. 26 (23), 7383 (2021).
- Ma, D., et al. Application of UHPLC fingerprints combined with chemical pattern recognition analysis in the differentiation of six Rhodiola species. Molecules. 26 (22), 6855 (2021).
- Li, X. H., et al. Metabolic discrimination of different Rhodiola species using 1H-NMR and GEP combinational chemometrics. Chemical & Pharmaceutical Bulletin. 67 (2), 81-87 (2019).
- Liu, Y., et al. Identification of Hippophae species (Shaji) through DNA barcodes. Chinese Medicine. 10, 28 (2015).
