Summary

설치류에 살아서 Stereotaxic 외과

Published: October 06, 2008
doi:

Summary

자유롭게 동물을 이동 고유 뇌 세포 지역에서 신경 전달 물질 수준의 모니터링 신경 전달 물질 방출과 행동 사이의 링크에 통찰력을 제공합니다. 그리고 기초 neurotransmission가 약리 또는 생리적 조작에 의해 변경하는 방법에 대한 정보, 전기 탐지와 결합하여 생체내 microdialysis 우수한 해부 학적 및 화학적 해상도를 제공합니다.

Abstract

깨어있는 동물의 두뇌에있는 신경 전달 물질의 세포 기저 수준을 측정하는 능력은 CNS 다른 체계 문제점 (약리 또는 생리학)의 효과의 결정을 허용합니다. 예를 들어, 하나는 직접 동물의 midbrain의 도파민 추정치는 음식과 같은 D – 암페타민 또는 자연 자극과 같은 도파민 – 공개 의약품에 대응 방법을 측정할 수 있습니다. 이 비디오에서는, 우리는 삽입과 임플란트 microdialysis 프로브를과 세포 수준을 측정하는 전기 감지 (HPLC – EC)와 결합하여 고성능 액체 크로마 토그래피를 사용하는 방법하는 방법 쥐의 두뇌의 특정 사이트를 대상으로 가이드 cannulas을 이식하는 방법을 보여 oxidizable 신경 전달 물질과 metabolites. microdialysis 프로브를 통해 약물의 정확한 지역 소개 행동​​ 화합물의 메커니즘에 사이트 특이성에서 정제 작업을 허용합니다. 이 기술은 탁월한 해부학 화학 해상도를 가지고 있지만 microdialysis 샘플로만 겸손한 시간 해상도는 일반적으로 감지 신경 전달 물질의 수준을 보장하기 위해 모든 20-30분을 처리됩니다. 보완 예 생체내 도구 (즉, 조각과 세포 문화 전기 생리학) 실시간 neurotransmission을 모니터링과 함께 도움을 줄 수 있습니다.

Protocol

개요 과 xylazine (10 MG, 2 개월 된 평균 연령 C57BL/6J 마우스 또는 이와 동등한 또는 3 개월 이전의 평균 연령 스프 라그 돌리 쥐 또는 이에 상응하는 마취제 (쥐 100 MG / kg IP 쥐 60 MG / kg IP)로 anesthetized 아르 / kg, 수종 중의 IP). 진정 작용은 반사가 시연 철회 부드러운 발가락 ​​핀치를 사용하여 모니터링할 수 있습니다 . Walantus 외 (조브, 6, 2007)와 <a href="/index/details.stp?ID…

Discussion

생체내의 microdialysis에서 살아있는 동물의 독특한 두뇌 사이트에 여러 신경 전달 물질과 metabolites 측정을위한 최고의 도구입니다. 그러나, 그것은 오직 neurochemicals의 세포 수준을 모니터링하고 실시간으로 신경 전달 물질의 exocytosis를 모니터링하는 시간 해상도를 제공하지 않습니다. "NET – 플럭스 '라는 기술의 버전을 통해, 해당 사이트의 실제 신경 전달 물질의 농도가 차례로 플라즈마 막 전송기를 통해 re…

Disclosures

The authors have nothing to disclose.

Acknowledgements

DK065872 (ENP), 바이오 메디컬 연구에 우수의 스미스 가족 재단 수상 (ENP), F31 DA023760 지원.

Materials

Materials are described in the protocol document

References

  1. Bungay, P. M., Newton-Vinson, P., Isele, W., Garris, P. A., Justice, J. B. Microdialysis of dopamine interpreted with quantitative model incorporating probe implantation trauma. J. Neurochem. 86, 932-946 (2003).
  2. Chen, K. C. Effects of tissue trauma on the characteristics of microdialysis zero-net-flux method sampling neurotransmitters. Journal of Theor. Biology. 238, 863-881 (2006).
  3. Geiger, B. M., Behr, G. G., Frank, L., Caldera-Siu, A. D., Beinfeld, M. C., Kokkotou, E. G., Pothos, E. N. Evidence for defective mesolimbic dopamine exocytosis in obesity-prone rats. FASEB Journal. 8, 2740-2746 (2008).
  4. Pothos, E. N., Creese, I., Hoebel, B. G. Restricted eating with weight loss selectively decreases extracellular dopamine in the nucleus accumbens and alters dopamine response to amphetamine, morphine and food intake. The Journal of Neuroscience. 15, 6640-6650 (1995).
check_url/880?article_type=t

Play Video

Cite This Article
Geiger, B. M., Frank, L. E., Caldera-Siu, A. D., Pothos, E. N. Survivable Stereotaxic Surgery in Rodents . J. Vis. Exp. (20), e880, doi:10.3791/880 (2008).

View Video