成像效应在耳朵上的记忆体T细胞诱导后收养的DTH
Summary
在这里，我们证明了诱导和记录一个迟发型超敏反应（DTH）反应在鼠耳进展的方法。这是由鼠耳组织编制的示范效应/记忆性T细胞反应的双光子成像。
Abstract
迟发型超敏反应（DTH）是主体CCR7的–效应/记忆性T淋巴细胞免疫反应。在这里，我们展示了一种诱导和记录在大鼠耳的DTH反应的进展的方法。这是由双光子成像的CCR7的示范–效应/记忆T细胞应答鼠耳组织编制。
收养的DTH诱导GFP标记的OVA特定CCR7的腹腔注射 -效应/记忆T细胞系（Beeton，C研究的可视化实验，第8期） 。然后让细胞在大鼠平衡，1:1混合的卵子和卵子的共轭得克萨斯红（OVA – TR）的一只耳朵注射用生理盐水（对照耳）和其他允许可视化挑战48小时前居民的抗原提呈细胞。
我们描述了一个有用成像结合胶原纤维的二次谐波产生的可视化过程中的免疫反应，深层的真皮层内的细胞活力的组织准备的方法。耳组织切成5 × 5毫米平方（稍大更好），装到塑料盖使用Vetbond™单，然后安全的使用在成像室硅脂和37氧冒泡的组织培养液灌流° C 。
Protocol
收养的DTH诱导 请看到的Jove文章 ： 收养大鼠迟发型超敏反应的感应和监测恭Beeton，乔治K。Chandy 生理学和生物物理学系，美国加州大学欧文分校可视化实验研究，第8期在这里，我们使用1:1的比例与未标记的抗原的抗原（卵清蛋白）结合德州红，让吞噬抗原提呈细胞的可视化修改这一协议。 <p c…
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Tags
ImagingEffector Memory T CellsEarInductionAdoptive DTHDelayed Type HypersensitivityImmune ReactionCCR7-T LymphocytesMethodRat EarTwo-photon ImagingGFP-labeledOva-specificCell LineEquilibrateChallengeSalineOva Conjugated To Texas-RedAntigen-presenting CellsMotility Of CellsDeep Dermal LayerImmune ResponseCollagen FibersSecond Harmonic Generation
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Matheu, M. P., Beeton, C., Parker, I., Chandy, K. G., D. Cahalan, M. Imaging Effector Memory T cells in the Ear After Induction of Adoptive DTH. J. Vis. Exp. (18), e907, doi:10.3791/907 (2008).