Summary

جعل التصحيح ، وماصات أقطاب شارب مع بولير برمجة

Published: October 08, 2008
doi:

Summary

هذا الفيديو يوضح كيفية استخدام مجتذب برمجة لجعل ماصات التصحيح والأقطاب الكهربية حادة ل. ويمكن استخدام نفس الإجراء لتقديم مجموعة متنوعة من الأدوات الزجاجية ، بما في ذلك إبر الحقن.

Abstract

وقد microelectrodes الزجاج (وتسمى أيضا الماصات) في العمود الفقري لالكهربية على مدى عقود. اليوم ، يتم إجراء من هذا القبيل من الشعيرات الدموية الماصات الزجاج باستخدام مجتذب برمجة. هذه الصكوك الحرارة الشعرية إما باستخدام خيوط معدنية أو الليزر واستخلاص الزجاج باستخدام الجاذبية ، والسيارات أو كليهما. يتم تشكيل لماصات التصحيح ، المشبك تسجيل استخدام الحرارة فقط ، والجاذبية ، بينما الأقطاب حادة لتسجيل الخلايا استخدام مزيج من الحرارة والجاذبية ، والحركية ملف. الإجراء التي استخدمت لصنع الخلايا الماصة تسجيل مماثلة لتلك التي استخدمت لصنع إبر الحقن لمجموعة متنوعة من التطبيقات ، بما فيها الحقن في كرنا القيطم البويضات. في الزجاج ، ويستخدم عامة الشعرية <1.2 مم في القطر لجعل ماصات لتسجيل المشبك التصحيح ، بينما يستخدم لتسجيل أضيق الزجاج داخل الخلايا (القطر الخارجي = 1.0 ملم). لكل أداة ، هو برمجة مجتذب مختلف قليلا. هذا الفيديو يبين كيفية جعل كلا النوعين من ماصات تسجيل مجتذب باستخدام برامج محددة مسبقا.

Protocol

سحب ماصات باستخدام microelectrode مجتذب مثل سوتر P – 97 يلهب / براون ، سحب مجموعة من حوالي 10-20 الماصات. حدد الزجاج الخاص الشعرية. نستخدم البورسليكات الشعيرات الدموية (سوتر BF150 – 110 – 10 ، القطر ا?…

Discussion

ويوضح البروتوكول هو هنا في الاستخدام اليومي في المختبرات الكهربية وتستخدم أيضا لصنع إبر الحقن للخلايا والحيوانات. مع مجتذب برمجة ، فمن السهل أن تجعل ماصات لمجموعة متنوعة من الاستخدامات. مع الاهتمام والرعاية ، فإن خيوط مجتذب الخاص على الماضي لمدة سنة واحدة أو أكثر. حظا سعيدا مع ?…

Acknowledgements

نشكر وكالات التمويل والمؤسسات التالية للحصول على الدعم : المعاهد القومية للصحة ، المؤسسة الوطنية للعلوم ، الجمعية الأمريكية للقلب ، الضمور العضلي جمعية ، ودونالد وباء ديليا E. مؤسسة باكستر ، وصندوق الوقف وKlingenstein ماكنايت علم الأعصاب.

Materials

Material Name Type Company Catalogue Number Comment
Micropipette Puller Instrument Sutter Instruments P-97 Or similar instrument (e.g. Sutter P-87 or P-2000)
Glass Capillaries Reagent Sutter Instruments BF150-86-10 Or, similar capillary glass. To make filling the pipette easier, use a capillary with a glass filament.

References

check_url/939?article_type=t

Play Video

Cite This Article
L. Brown, A., E. Johnson, B., B. Goodman, M. Making Patch-pipettes and Sharp Electrodes with a Programmable Puller. J. Vis. Exp. (20), e939, doi:10.3791/939 (2008).

View Video