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Chapters
- 00:00Title
- 00:55Introduction
- 01:42Preparing Lectin-Conjugated POROS Columns
- 05:15Packing the Lectin-POROS Beads into a PEEK Column
- 08:11HPLC of Samples
- 11:49Desalting the Collected Fractions and PNGase F-digestion
- 14:50Ziptip Desalting of PNGaseF Samples
- 16:34Glycopeptide Analysis Representative Results
- 19:45Conclusion
Lectin-konjugierten POROS Perlen wurden für die HPLC eingesetzt. Glycopeptid-Normen diente als positive und negative Kontrollen. MARS-14 aufgebraucht wurde trypsinverdauten Humanplasma chromatographiert und Flow-Through-(FT) und gebundenen Fraktionen für ESI-LC-MS/MS Analysen gesammelt. Glykopeptide wurden in der gebundenen Fraktion angereichert, um FT verglichen.
Tags
Lectin HPLC MethodSelectively-glycosylated PeptidesComplex Biological SamplesGlycansPost-translational ModificationsTumor CellsCancer-associated Glycan VariantsBiomarker DevelopmentLectinsSambucus Nigra (SNA)Aleuria Aurantia (AAL)Affinity MatricesPOROS BeadsPEEK ColumnsHigh Pressure Liquid Chromatography (HPLC)Plasma DepletionMultiple Affinity Removal System (MARS-14)Trypsin-digestionFlow-through FractionBound FractionPNGaseFN-linked GlycansLC-MS/MS AnalysisQStar EliteMascot SoftwarePositive ControlsNegative Controls
