Encyclopedia of Experiments: Biology
A subscription to JoVE is required to view this content. Sign in or start your free trial.
Transcript
Please note that all translations are automatically generated.
- Для начала, обеспечить плодовой мухи куколки спинной, или обратно, вверх. Удалить оперкула или передний конец куколки подвергать голову животного. Продолжайте открывать куколку путем резки и пилинг от корпуса. После освобождения, покрыть вскрытые куколки с PBS, чтобы избежать высыхания.
Чтобы разоблачить глазно-мозговой комплекс, который включает в себя две сетчатки, прикрепленные к зрительным долям, начните отрывать эпителий от разрезанного края грудной клетки и продолжайте постепенно открывать головную капсулу.
В примере протокола мы увидим демонстрацию вскрытия пупок глазного мозга, используемого для изоляции тканей для различных анализов ниже по течению.
- После размещения куколки Drosophila на черное рассечение блюдо, заложить свежий кусок двусторонний ленты на рассечение блюдо от куколки и использовать пару типсов, чтобы тщательно поместить куколки спинной стороне вверх на ленту.
Поместите блюдо под стерео микроскопом и использовать щипцы, чтобы удалить оперкулу каждого куколки. Используйте ножницы микродиссекции, чтобы нарезать каждый корпус куколки, позволяя ему быть хлопнул открытым, чтобы выявить голову, грудную клетку, и передний сегмент брюшной полости, и обеспечить края куколки случае двусторонняя лента.
Пирс брюшной полости каждой куколки с острыми типсами и удалить куколку из его куколки случае. Поместите куколку на блюдо вскрытия от ленты, и покрыть куколку с 400 микролитров ледяной PBS. Используйте типсы, чтобы схватить каждого из них за живот, и использовать микродиссекции ножницы, чтобы сделать один чистый поперечный разрез через грудную клетку, разрезая куколку в половине.
Используя две пары тонких типсов, схватьте разрезанные края каждого эпителия грудной клетки и постепенно рвите грудную клетку и головную капсулу, обнажая глазно-мозговой комплекс в окружающей жировой ткани. Затем, не хватаясь за ткань, используйте типсы, чтобы направлять каждый полупрозрачный, небелый, гантельообразный глазно-мозговой комплекс от остатков головной капсулы.
