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1Department of Pathology, Hershey Medical Center,Pennsylvania State University, 2Department of Chemistry,Pennsylvania State University, 3Departments of Pathology, and Biochemistry and Molecular Biology, Hershey Medical Center,Pennsylvania State University, 4Materials Research Institute,Pennsylvania State University
Chapters
- 00:04Title
- 00:12Introduction
- 01:39Preparation of PF Library-DNA Fragments
- 03:26Preparation of S100B-bound Beads
- 04:55Selection & Recovery of Aptamers
- 06:40TOPO Cloning and Sequencing
- 07:17Sandwich Binding Assays
- 09:11Representative Results
- 10:35Conclusion
SELEX protocolos comprenden múltiples rondas de selección, cada uno de los cuales requieren la regeneración de ligandos unidos, que a su vez requieren secuencias fijas de imprimación que flanquean las regiones de la biblioteca al azar. Estas secuencias de los cebadores fija puede interferir con el proceso de selección (falsos positivos y negativos). Aquí presentamos una cartilla sin protocolo.
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Primer-Free Aptamer SelectionRandom DNA LibraryAptamersOligonucleotidesDNARNAAffinitiesAntibodiesIn Vitro Selection ProcessSystematic Evolution Of Ligands By EXponential Enrichment (SELEX)TargetsSmall MoleculesProteinsMacromoleculesIn Vivo Diagnostic ApplicationsTherapeutic ApplicationsSpecificitySynthesizedProcessing ConditionsImmunogenicitySizeNucleotides (nt)Nucleic Acid LibrariesRandomized RegionsPrimer SitesSelection Process ComplicationsBioinformatics Approaches
