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Perfil de metiltransferases e Outros S-Adenosil- L Homocisteína-Proteínas de Ligação de captura por Espectrometria de Massa Compound (CCMS)
JoVE Journal
Biology
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JoVE Journal Biology
Profiling of Methyltransferases and Other S-adenosyl-L-homocysteine-binding Proteins by Capture Compound Mass Spectrometry (CCMS)
DOI:

17:12 min

December 20, 2010

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Chapters

  • 00:05Title
  • 02:23Performing the Capture Assay and Controls
  • 08:26Tryptic Digest of Captured Proteins and Preparation of Peptides for LC-MS/MS
  • 09:50Peptide and Protein Identification via Automated Sequence Database Search
  • 12:33Representative Results of CCMS Experiments
  • 16:00Conclusion

Summary

Automatic Translation

Compostos de captura são trifuncional pequenas moléculas para reduzir a complexidade do proteoma por funcionais reversíveis interação molécula de proteína pequena seguido por foto-reticulação e purificação. Aqui usamos um Composto de captura com<em> S</em>-Adenosil-<sub> L</sub>-Homocisteína vinculativo, como função de seletividade para isolar metiltransferases a partir de um<em> Escherichia coli</em> Lisado de células inteiras e identificá-los pelo MS.

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