A subscription to JoVE is required to view this content. Sign in or start your free trial.
Chapters
- 00:05Title
- 02:14Preparation of Cells for Labeling with ReAsH/FlAsH
- 04:38Imaging the Cells on a Confocal Microscope
- 05:45Data Analysis
- 10:54Representative Assessment of the ReAsH Reactivity of TC Tagged Kinase Src in live HEK293 Cells
- 11:46Conclusion
El biarsenical FlAsH tintes y ReAsH se unen específicamente a los motivos tetracysteine en proteínas y selectiva puede etiquetar las proteínas en células vivas. Recientemente, esta estrategia de etiquetado se ha utilizado para desarrollar sensores para diferentes conformaciones de las proteínas o los estados oligoméricos. Se describe el mecanismo de etiquetado y métodos para analizar cuantitativamente vinculante.
Tags
ReAsHFlAsHLabelingImage AnalysisTetracysteine Sensor ProteinsCellsFluorescent ProteinsProtein TraffickingProtein LocalizationProtein FunctionFusion PartnersConformational ChangeProtein-associationSmall Tag SystemBiarsenical DyesSpecificityLive CellsSteric ConstraintsHost ProteinConformational Change MeasurementProtein-protein InteractionsOligomerization SensorsMutant HuntingtinAggregatesNeuronsHuntington Disease
