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Usando Seqüência de Detenção SECM como uma ferramenta para isolar Ribossomos Polipeptídeos encadernados
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Using SecM Arrest Sequence as a Tool to Isolate Ribosome Bound Polypeptides

Usando Seqüência de Detenção SECM como uma ferramenta para isolar Ribossomos Polipeptídeos encadernados

DOI:
10.3791/4027-v

•

09:42 min

•

June 19, 2012

•

,
1Center for Gene Regulation in Health and Disease, Department of Biological, Geological and Environmental Sciences,Cleveland State University

Chapters

  • 00:05Title
  • 03:31DNA Template Preparation, In vitro Transcription and Translation
  • 05:34Isolation of Nascent Polypeptides and Analysis by Tris-tricine SDS PAGE
  • 07:17Representative RNC Results
  • 07:57Conclusion

Summary

Automatic Translation

Automatic Translation

Descrevemos aqui uma técnica que é rotineiramente usado para isolar estavelmente ligados ribossomo complexos da cadeia nascente (RNC). Esta técnica aproveita a descoberta de que um jovem de 17 aminoácidos longo SECM "seqüência de prisão" pode parar de alongamento de tradução em uma procariótica (<em> E. coli</em>) Do sistema, quando inseridos em (ou fundido com o terminal C) de virtualmente qualquer proteína.

Tags

SecM Arrest SequenceRibosome Bound PolypeptidesCo-translational FoldingIsolation TechniqueRNCs (ribosome-nascent Chain Complexes)Protein Folding PathwayConformational AnalysisSecM ProteinSecretion MonitorSecA ATPaseStalling SequencePeptidyl-glycyl-tRNAC-terminal RegionPolypeptide Chain ElongationIn Vivo Studies

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