A subscription to JoVE is required to view this content. Sign in or start your free trial.
Chapters
- 00:05Title
- 01:35Expression of Recombinant APP Intracellular Domain
- 02:55Purification of GST-AICD
- 05:23Thrombin Cleavage of GST-AICD and Purification of AICD
- 06:54AICD Aggregation for Atomic Force Microscopy
- 07:56Representative AICD Aggregation Results
- 09:32Conclusion
En fremgangsmåde til stor skala oprensning af APP intracellulære domæne (AICD) er beskrevet. Vi beskriver også metoder til at fremkalde<em> In vitro</em> AICD sammenlægning og visualisering ved atomic force mikroskopi. De beskrevne fremgangsmåder er nyttige til biokemiske / strukturel karakterisering af AICD og virkningerne af molekylære chaperoner på dens aggregering.
Tags
Amyloid Precursor ProteinAPPAlzheimer’s DiseaseAICDProteasesα-secretaseβ-secretaseγ-secretaseAβ PeptideSenile PlaquesFe65Tip60Transcription RegulationProtein-protein InteractionsHolo-APPC-terminal FragmentsAggregationMolecular Chaperone Ubiquilin-1Hydrophobic DomainsIntrinsically DisorderedStable Secondary Structure
