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General Laboratory Techniques
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JoVE Science Education General Laboratory Techniques
Histological Sample Preparation for Light Microscopy
  • 00:00Overview
  • 01:05Fixation of Tissue Samples
  • 04:19Embedding and Sectioning
  • 06:12Applications
  • 09:01Summary

Preparazione del campione istologico per microscopia ottica

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Overview

L’istologia è lo studio di cellule e tessuti, che è tipicamente aiutato dall’uso di un microscopio ottico. La preparazione dei campioni istologici può variare notevolmente in base alle proprietà intrinseche dei campioni come dimensioni e durezza, nonché alla post-elaborazione prevista che include tecniche di colorazione pianificate o altre applicazioni a valle. Come descritto in questo video, la preparazione del campione inizia in genere con una procedura di fissazione per prevenire la degradazione del campione da parte di enzimi naturali che vengono rilasciati dalle cellule alla morte. Una volta fissati, i campioni vengono inseriti in un supporto di incorporamento in grado di supportare sufficientemente il campione. Più comunemente si tratta di cera di paraffina, ma altri materiali come un mezzo di congelamento a base di glicerina e agar vengono utilizzati anche per circondare il campione durante il sezionamento. Il sezionamento avviene poi su un microtomo o altro dispositivo di taglio che permette all’utente di radere il campione in fette sottili che vanno da pochi micron a pochi millimetri di spessore. Una volta tagliate, le sezioni vengono montate su un vetrino e colorate per far emergere caratteristiche specifiche del campione prima di essere riprese al microscopio.

Procedure

L’istologia è un termine che si riferisce allo studio dell’anatomia microscopica di tessuti e cellule. Una corretta preparazione istologica del campione per la microscopia ottica è essenziale per ottenere risultati di qualità da campioni di tessuto. Ci sono 3 passaggi principali comuni a quasi tutte le procedure istologiche. In primo luogo, il campione viene fissato, al fine di preservare il tessuto e rallentare la degradazione dei tessuti. Successivamente, il campione viene immerso in un materiale, o supporto d…

Disclosures

No conflicts of interest declared.

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JoVE Science Education Database. JoVE Science Education. Histological Sample Preparation for Light Microscopy. JoVE, Cambridge, MA, (2023).

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