A subscription to JoVE is required to view this content. Sign in or start your free trial.
1Greenebaum Cancer Center,University of Maryland School of Medicine, 2Program in Molecular Medicine,University of Maryland School of Medicine, 3Department of Biochemistry & Molecular Biology,University of Maryland School of Medicine, 4Department of Pharmacology & Experimental Therapeutics,University of Maryland School of Medicine, 5Department of Pathology and Biochemistry & Molecular Biology,University of Maryland School of Medicine
Chapters
- 00:05Title
- 01:49Cell Culture and Nuclear Protein Isolation
- 02:46Preparation of 96-well Plates by Incubation with Nuclear Extracts
- 03:58Measurement of RUNX2 DNA Binding
- 05:36Results: Inhibition of RUNX2 DNA Binding
- 06:22Conclusion
Nous avons développé, un dosage quantitatif liaison à l'ADN à base d'ELISA pour mesurer les interactions de facteurs de transcription à l'ADN. Une spécificité élevée pour la protéine de RUNX2 a été obtenue avec un consensus de l'ADN-oligonucléotide reconnaissance et l'anticorps monoclonal spécifique. Détection colorimétrique avec un substrat de réaction de l'anticorps couplé à une enzyme a été suivie en temps réel.
