JoVE Science Education
Basic Methods in Cellular and Molecular Biology
A subscription to JoVE is required to view this content.  Sign in or start your free trial.
JoVE Science Education Basic Methods in Cellular and Molecular Biology
An Introduction to Transfection
  • 00:00An Introduction to Transfection
  • 01:26Principal Components of Transfection
  • 04:26The Transfection Procedure
  • 05:36Applications
  • 07:17Summary

מבוא לתעתיק

English

Share

Overview

טרנספקטיון הוא תהליך של החדרת חומר גנטי, כגון DNA ורנ”א נטוש כפול, לתאי יונקים. החדרת DNA לתא מאפשרת ביטוי, או ייצור, של חלבונים המשתמשים במכונות של התאים עצמם, ואילו החדרת RNA לתא משמשת לווסת את הייצור של חלבון מסוים על ידי הפסקת התרגום. בעוד אתר הפעולה עבור RNA transfected הוא ציטופלסמה, DNA חייב להיות מועבר לגרעין עבור transfection יעיל. שם, הדנ”א יכול להתבטא באופן ארעי לפרק זמן קצר, או להשתלב בדנ”א הגנומי, שם השינוי מועבר מתא לתא כשהוא מתחלק.

וידאו זה מתאר את היסודות מאחורי transfections כימי בתיווך ומציג כמה ריאגנטים הנפוצים ביותר, כולל שומנים טעונים, פולימרים, סידן פוספט. כל שלב מתואר מהכנת תאים לתזוזה באמצעות ניתוח של יעילות טרנספקטי. בנוסף, סעיף היישומים במאמר וידאו זה מתאר את השימוש באלקטרופורציה ובתמרה ביולית כשיטות חלופיות להכנסת חומצת גרעין לתאי יונקים. הוא גם מתאר שימוש מתקדם בטרנס-זיהום שבו שיתוף פעולה של הפרעה RNA ו- DNA מוצגים כדרך למטה-לווסת חלבון המתרחש באופן טבעי בעת ובעונה אחת לייצר גרסה מוטנטית שלו בתוך אותו תא.

Procedure

טרנספקטיון הוא תהליך של החדרת חומר גנטי, כגון DNA ורנ”א נטוש כפול, לתאי יונקים. החדרת דנ”א מאפשרת ביטוי, או ייצור, של חלבונים המשתמשים במכונות של התאים עצמם. בעוד החדרת RNA כפול נטוש משמשת לכיבוי הייצור של חלבון מסוים על ידי הפסקת התרגום. כלי רב עוצמה זה איפשר לחוקרים לחקור טוב יותר את תפקוד הג?…

Disclosures

No conflicts of interest declared.

Transcript

Tags

Cite This
JoVE Science Education Database. JoVE Science Education. An Introduction to Transfection. JoVE, Cambridge, MA, (2023).

Related Videos