Ex Vivo intestinale Sacs per valutare mucosa Permeabilità in modelli di malattia gastrointestinale
February 9th, 2016
Questo protocollo descrive l'uso di preparati di tessuto intestinale asportati o "sacche intestinali" come modello ex vivo della funzione della barriera intestinale. Questo modello può essere utilizzato per valutare l'integrità sia della barriera epiteliale che dello strato di gel mucoso in specifici siti intestinali in modelli animali di malattia digestiva.
L'obiettivo generale di questa procedura è valutare l'integrità intestinale localizzata in modelli animali di malattia gastrointestinale. Questo metodo può aiutare a rispondere a domande chiave sulla malattia gastrointestinale, ad esempio se l'integrità mussusale è persa o se c'è un aumento dell'assorbimento di una specifica molecola o batterio durante la malattia. Il vantaggio principale di questa tecnica è che può essere utilizzata per valutare aree specifiche all'interno del tratto gastrointestinale. Per preparare il tratto gastrointestinale, inizia spruzzando l'addome e il torace del topo con il 70% di etanolo e usa le forbici per praticare un'incisione orizzontale al centro dell'addome, per esporre il peritoneo. Quindi, tagliare l'intestino tenue superiore dallo stomaco in corrispondenza dello sfintere pilorico e l'intestino crasso in corrispondenza del bordo anale. Quindi utilizzare una pinza per rimuovere delicatamente il mesentere e posizionare il tratto intestinale in un mezzo preriscaldato e ossiginato. Identificare l'area da valutare per la permeabilità, misurando le sezioni del duodeno e del digiuno rispetto allo stomaco nelle sezioni del colon e ileo rispetto al cieco per mantenere la coerenza tra gli animali da esperimento. Si noti la presenza di tessuti linfoidi associati alla mucosa come le chiazze di Peyer, che possono essere identificate come piccoli noduli sul lato sarosale del lume. Quindi, tagliare la sezione selezionata e utilizzare una siringa da 1 ml per sciacquare delicatamente il contenuto lumenale del segmento in una capsula di Petri contenente 37
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Panoramica
Questo protocollo descrive l'uso di preparazioni di tessuto intestinale asportato o "sacchi intestinali" come modello ex vivo della funzione di barriera intestinale. Questo modello può essere utilizzato per valutare l'integrità sia della barriera epiteliale che dello strato di gel mucoso in specifici siti intestinali in modelli animali di malattie digestive.
Componenti principali dello studio
Area della scienza
- Neuroscienza
- Biologia
- Salute digestiva
Sfondo
- La funzione della barriera intestinale è cruciale per mantenere la salute dell'intestino.
- I modelli ex vivo forniscono informazioni sulla fisiologia intestinale.
- Comprendere l'integrità della barriera può aiutare nella ricerca sulle malattie digestive.
- I sacchi intestinali permettono studi mirati di specifici siti intestinali.
Obiettivo dello studio
- Valutare l'integrità della barriera epiteliale.
- Valutare il ruolo dello strato di gel mucoso nella funzione di barriera.
- Fornire un modello affidabile per lo studio delle malattie digestive.
Metodi utilizzati
- Preparazione di tessuto intestinale asportato.
- Creazione di sacchi intestinali per l'analisi ex vivo.
- Valutazione dell'integrità della barriera in vari siti intestinali.
- Utilizzo di modelli animali per simulare malattie digestive.
Risultati principali
- Dimostrazione della funzionalità dei sacchi intestinali negli studi sulla barriera.
- Identificazione di variazioni nell'integrità della barriera in diversi siti intestinali.
- Evidenziazione dell'importanza dello strato di gel mucoso nel mantenimento della funzione di barriera.
- Fornitura di un quadro per future ricerche sulle malattie digestive.
Conclusioni
- I sacchi intestinali sono efficaci per studiare la funzione di barriera intestinale.
- I risultati contribuiscono alla comprensione della salute digestiva.
- Questo modello può facilitare la ricerca su varie malattie digestive.
