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新たに単離したヒト絨毛細胞栄養芽層に対するsiRNAトランスフェクションおよびEMSA分析
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Genetics
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JoVE Journal Genetics
siRNA Transfection and EMSA Analyses on Freshly Isolated Human Villous Cytotrophoblasts
DOI:

09:57 min

September 20, 2016

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Chapters

  • 00:05Title
  • 01:00Evaluation of the Purity of Isolated Primary Villous Cytotrophoblasts
  • 03:13siRNA Transfection of Human Primary Villous Cytotrophoblasts
  • 04:55Preparation of Nuclear Extracts from Cultured Cells
  • 05:52Radiolabeling of Single Stranded Oligonucleotide
  • 06:50DNA Binding Reaction
  • 08:07Results: Syncytin-2 Knowckdown and Visualization of Syncytin-2 DNA-protein Complexes
  • 09:14Conclusion

Summary

Automatic Translation

このプロトコルは、効率的に新たに単離されたヒト絨毛細胞栄養芽層でのsiRNAのトランスフェクションマイクロポを使用して、これらの細胞におけるDNA-タンパク質複合体を同定するための方法が記載されています。トランスフェクトされた細胞は、ウェスタンブロットによりモニターすることができ、EMSAは、4日間の培養期間中に分析します。

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