Journal
/
Biochemistry
/
Høy presisjon FRET ved enkeltmolekylivå for biomolekylstrukturbestemmelse
JoVE Journal
Biochemistry
A subscription to JoVE is required to view this content.  Sign in or start your free trial.
JoVE Journal Biochemistry
High Precision FRET at Single-molecule Level for Biomolecule Structure Determination

Høy presisjon FRET ved enkeltmolekylivå for biomolekylstrukturbestemmelse

DOI:
10.3791/55623-v

•

11:24 min

•

May 13, 2017

•

, , , , ,
1Department of Chemistry,Clemson University, 2Department of Physics and Astronomy,Clemson University, 3Department of Biochemistry and Molecular Biology, Center for Membrane Biology, Graduate School for Biomedical Sciences,University of Texas Health Science Center

Chapters

  • 00:05Title
  • 01:07Preparation of Materials
  • 02:57Pulsed Interleaved Excitation-Multiparameter Fluorescence Detection (PIE-MFD) Instrument Setup
  • 06:14Burst Integration Fluorescence Lifetime Analysis of Standards
  • 07:34dsDNA and Protein Sample Measurements and Analysis
  • 09:28Results: Inter-dye Distance Determination in Single Molecules
  • 10:54Conclusion

Summary

Automatic Translation

Automatic Translation

En protokol for høy presisjon FRET-eksperimenter på enkeltmolekylnivå presenteres her. I tillegg kan denne metoden brukes til å identifisere tre konformasjonelle tilstande i det ligandbindende domenet til N-metyl-D-aspartat (NMDA) reseptoren. Fastsettelse av nøyaktige avstander er det første skrittet mot bygging av strukturelle modeller basert på FRET-eksperimenter.

Tags

Keywords: High Precision FRETSingle-moleculeBiomolecule Structure DeterminationFörster Resonance Energy TransferMultiparameter Fluorescence DetectionInterdye Distance MeasurementNMDA ReceptorConformational StatesStructural ModelDynamic Biomolecules

Article

Embed

ADD TO PLAYLIST

Usage Statistics

Related Videos

check_url/55623?article_type=v

Strukturell Informasjon fra Single-molekyl FRET Eksperimenter Bruke Fast Nano-posisjonering System
check_url/55623?article_type=v

En enkel, Robust og høy gjennomstrømning ett molekyl flyte strekker analysen implementering for å studere Transport av molekyler langs DNA
check_url/55623?article_type=v

Single-molekylet manipulering av G-quadruplexes av magnetiske pinsett
check_url/55623?article_type=v

Høy gjennomstrømning, absolutt vilje av innholdet i et valgt Protein på vev nivåer ved hjelp av kvantitative Dot Blot analyse (QDB)
check_url/55623?article_type=v

Bruker tre farger Single-molekylet bånd å studere sammenhengen av Protein interaksjoner
check_url/55623?article_type=v

Kovalente immobilisering av proteiner for ett molekyl Force spektroskopi
check_url/55623?article_type=v

Proteom hele kvantifisering av merking homogenitet på ett molekyl nivå
check_url/55623?article_type=v

Enkeltcelleanalyse av transkripsjonsaktive alleler av enkeltmolekyl fisk
check_url/55623?article_type=v

Single-Molecule Dwell-Time Analysis of Restriction Endonuclease-Mediated DNA Cleavage
check_url/55623?article_type=v

Foreta presise og nøyaktige FRET-målinger med ett molekyl ved hjelp av åpen kildekode-smfBox

Read Article