Journal
/
Genetics
/
Hoogefficiënte Gene verstoring van lymfkliertest en menselijke hematopoïetische voorlopercellen door CRISPR/Cas9
JoVE Journal
Genetics
This content is Free Access.
JoVE Journal Genetics
Highly Efficient Gene Disruption of Murine and Human Hematopoietic Progenitor Cells by CRISPR/Cas9
Please note that all translations are automatically generated. Click here for the English version.

Hoogefficiënte Gene verstoring van lymfkliertest en menselijke hematopoïetische voorlopercellen door CRISPR/Cas9

DOI:
10.3791/57278-v

•

08:27 min

•

April 10, 2018

•

, , , ,
1Stem Cells & Regenerative Medicine Center,Baylor College of Medicine, 2Center for Cell and Gene Therapy,Baylor College of Medicine, 3Centro di Ricerca Emato-Oncologica (CREO),University of Perugia, 4Department of Molecular & Human Genetics,Baylor College of Medicine, 5Texas Children’s Hospital & Houston Methodist Hospital

Chapters

  • 00:05Title
  • 01:05sgRNA Fwd Primer Design, DNA Template Synthesis, and ln Vitro Transcription of sgRNA
  • 03:38Cas9-sgRNA Complexing and Electroporation
  • 05:45Results: Use of Cas9-sgRNA Electroporation Protocol to Study Efficient Knockout of Target Gene
  • 07:48Conclusion

Summary

Automatic Translation

Automatic Translation

Een protocol voor snelle CRISPR/Cas9-gemedieerde gene verstoring van muis en mens primaire hematopoietische cellen wordt beschreven in dit artikel. Cas9-sgRNA ribonucleoproteins worden ingevoerd via electroporation met sgRNAs gegenereerd via in vitro transcriptie en commerciële Cas9. Hoge bewerken rendementen worden bereikt met beperkte tijd en de financiële kosten.

Tags

Keywords: CRISPR/Cas9Gene DisruptionHematopoietic Progenitor CellsRibonucleoproteinSingle-guide RNAPCRT7 RNA PolymeraseGene KnockoutPrimary CellsHigh EfficiencyFast TurnaroundCost-effectiveNormal And Malignant HematopoiesisPrimary T-cellsHematopoietic Cell LinesPrimary Leukemia Samples

Article

Embed

ADD TO PLAYLIST

Usage Statistics

Related Videos

check_url/57278?article_type=v

QTL Mapping en CRISPR / Cas9 Editing om een ​​Drug Resistance Gene te identificeren<em> Toxoplasma gondii</em
check_url/57278?article_type=v

Selectieafhankelijke en onafhankelijke generatie van CRISPR / Cas9-gemedieerde Gene Knockouts in zoogdiercellen
check_url/57278?article_type=v

Een standaard methodiek te onderzoeken ter plaatse mutageniteit als een functie van punt mutatie reparatie gekatalyseerd door CRISPR/Cas9 en SsODN in menselijke cellen
check_url/57278?article_type=v

Microinjection van CRISPR/Cas9 eiwit in Channel Catfish, Ictalurus punctatus, embryo's voor Gene Editing
check_url/57278?article_type=v

Een Protocol voor de productie van Integrase-deficiënte lentivirale vectoren voor CRISPR/Cas9-gemedieerde Gene knock-out in cellen verdelen
check_url/57278?article_type=v

Efficiënte productie en identificatie van CRISPR/Cas9-gegenereerd Gene uitsparingen in de modelsysteem Danio rerio
check_url/57278?article_type=v

CRISPR/Cas9 Gene bewerken te maken voorwaardelijke mutanten van menselijke malariaparasiet P. falciparum
check_url/57278?article_type=v

Endogene eiwit Tagging in mens geïnduceerde pluripotente stamcellen met behulp van CRISPR/Cas9
check_url/57278?article_type=v

Voorbereiding en genetische modificatie van Nonhuman primaat hematopoietische stamcellen en voorlopercellen
check_url/57278?article_type=v

SCHERPEr/Cas9 Ribonucleoproteã-gemedieerde nauwkeurige Gene bewerking door buis Electroporation

Read Article