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Toeprinting Analysis of Translation Initiation Complex Formation on Mammalian mRNAs
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Toeprinting analisi di traduzione Iniziazione formazione complessa su mRNAs mammiferi

DOI:
10.3791/57519-v

•

10:37 min

•

May 10, 2018

•

,
1Department of Chemistry and Biochemistry, Alberta RNA Research and Training Institute,University of Lethbridge, 2Department of Neuroscience and the Canadian Centre for Behavioral Neuroscience (CCBN),University of Lethbridge, 3Arnie Charbonneau Cancer Institute,University of Calgary

Chapters

  • 00:04Title
  • 00:34Preparation of mRNA
  • 02:59Toeprinting Assay
  • 06:32Sequencing Reactions and Gel Electrophoresis
  • 07:53Results: Importance of IRES Secondary Structure in the Formation of Translation Initiation Complexes on an Uncapped XIAP IRES RNA
  • 09:35Conclusion

Summary

Automatic Translation

Automatic Translation

Toeprinting mira a misurare la capacità in vitro di trascritti di RNA per formare complessi di inizio di traduzione con i ribosomi in una varietà di condizioni. Questo protocollo descrive un metodo per toeprinting RNA dei mammiferi e può essere usato per studiare traduzione cap-dipendente sia IRES-driven.

Tags

Keywords: Toeprinting AnalysisTranslation Initiation ComplexMammalian MRNAsIRESRNA PurificationRabbit Reticulocyte LysateRNase InhibitorATPGMP-PNPDTTSpermidine

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