Journal
/
Biochemistry
/
Benchtop geïmmobiliseerd Metal affiniteitchromatografie, reconstitutie en kwantitatieve analyse van een Polyhistidine gecodeerde Metalloenzyme voor de Undergraduate laboratorium
JoVE Journal
Biochemistry
This content is Free Access.
JoVE Journal Biochemistry
Benchtop Immobilized Metal Affinity Chromatography, Reconstitution and Assay of a Polyhistidine Tagged Metalloenzyme for the Undergraduate Laboratory
Please note that all translations are automatically generated. Click here for the English version.

Benchtop geïmmobiliseerd Metal affiniteitchromatografie, reconstitutie en kwantitatieve analyse van een Polyhistidine gecodeerde Metalloenzyme voor de Undergraduate laboratorium

DOI:
10.3791/58012-v

•

08:02 min

•

August 23, 2018

•

,
1Department of Chemistry,Muhlenberg College

Chapters

  • 00:04Title
  • 00:34Preparation of the IMAC Column
  • 01:42Purification of Polyhistidine-tagged Target by IMAC
  • 04:32Reconstitution of Target Protein with Fe2+
  • 06:43Results: Undergraduate Performed Assay of a Polyhistidine Tagged Metalloenzyme
  • 07:28Conclusion

Summary

Automatic Translation

Automatic Translation

Hier presenteren we een protocol voor de benchtop geïmmobiliseerd metal affinity chromatografie zuivering en verdere reconstructie van een polyhistidine gelabeld, non-Heem ijzer bindende dioxygenase geschikt voor het undergraduate onderwijs-laboratorium.

Tags

Keywords: Benchtop Immobilized Metal Affinity ChromatographyPolyhistidine Tagged MetalloenzymeUndergraduate LaboratoryNon-heme Iron-binding EnzymesNickel-bound Nitriloacetic Acid ResinLysis Bind BufferCell-free Crude ExtractsFlow-throughEluent

Article

Embed

ADD TO PLAYLIST

Usage Statistics

Related Videos

check_url/58012?article_type=v

Eiwitcomplex Affiniteit Capture uit Cryomilled zoogdiercellen
check_url/58012?article_type=v

Semi-automatische Biopanning van bacteriële Display bibliotheken voor Peptide affiniteit reagens detectie en analyse van de resulterende isolaten
check_url/58012?article_type=v

Vertering van eiwitten, ultrafiltratie en Size Exclusion Chromatography voor het optimaliseren van het isolement van Exosomes uit menselijk bloed Plasma en Serum
check_url/58012?article_type=v

Analyse van intrinsieke wanorde van de AtHIRD11 en bindende naar metaalionen door capillaire gelelektroforese en affiniteit capillaire elektroforese
check_url/58012?article_type=v

Zuivering en reconstructie van TRPV1 spectroscopische p.a.
check_url/58012?article_type=v

Enkele stap verrijking van een TAP-Tagged histone deacetylase van de gloeiende schimmel Aspergillus nidulans voor enzymatische activiteit assay
check_url/58012?article_type=v

Een semi-kwantitatieve drug affiniteit responsieve doel stabiliteit (DARTS) assay voor het bestuderen van Rapamycine/mTOR interactie
check_url/58012?article_type=v

Reinigingsmiddel-bijgestaan reconstitutie van recombinant fruit vliegje Atlastin in liposomen voor lipide-mengt analyses
check_url/58012?article_type=v

Geactiveerde kruisgebonden agarose voor de snelle ontwikkeling van Affiniteits chromatografie harsen-antilichamen vangen als een casestudy
check_url/58012?article_type=v

Een semi-High-throughput adaptatie van de NADH-gekoppelde ATPase-assay voor het screenen van kleine molecuul remmers

Read Article