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Privo di calibrazione In Vitro quantificazione delle proteine omo-oligomerizzazione utilizzando Strumentazione commerciale e libero, Open Source Software di analisi di luminosità
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Calibration-free In Vitro Quantification of Protein Homo-oligomerization Using Commercial Instrumentation and Free, Open Source Brightness Analysis Software
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Privo di calibrazione In Vitro quantificazione delle proteine omo-oligomerizzazione utilizzando Strumentazione commerciale e libero, Open Source Software di analisi di luminosità

DOI:
10.3791/58157-v

•

08:22 min

•

July 17, 2018

•

, , , , ,
1Cellular Imaging Group, Wellcome Centre Human Genetics,University of Oxford, 2Division of Structural Biology, Wellcome Centre Human Genetics,University of Oxford, 3Dynamic Structural Virology Group,Biocruces Health Research Centre, 4IKERBASQUE,Basque Foundation for Science

Chapters

  • 00:04Title
  • 00:50FKBP12F36V-mVenus Purification
  • 03:24Preparation of Multiwell Plate Array
  • 04:19Calibration-free Confocal Acquisition
  • 06:26Results: FKBP12 Dimerizes upon Addition of BB Dimerizer Drug
  • 07:23Conclusion

Summary

Automatic Translation

Automatic Translation

Questo protocollo descrive un approccio privo di calibrazione per la quantificazione della proteina omo-oligomerizzazione in vitro basati sulla spettroscopia di fluorescenza fluttuazione mediante microscopia a scansione di luce commerciale. Le impostazioni di acquisizione corretta e i metodi di analisi sono mostrati.

Tags

Keywords: Protein Homo-oligomerizationIn Vitro QuantificationCalibration-freeConfocal MicroscopyBrightness AnalysisProtein-protein InteractionsDrug ScreeningCancer DrugsSmall-molecule InhibitorsFusion InhibitorsProtein DynamicsCell-cell InteractionsFKBP12His6 TagMVenus TagIMACSize-exclusion Chromatography

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