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Eine Fluoreszenz Fluktuation Spektroskopie Assay von Protein-Protein-Wechselwirkungen an den Zell-Zell-Kontakten
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Chapters
- 00:04Title
- 00:49Sample Preparation: Cell-Cell Mixing Assay
- 02:37Scanning Fluorescence Cross-Correlation Spectroscopy (sFCCS): Acquisition
- 04:07Scanning Fluorescence Cross-Correlation Spectroscopy (sFCCS): Data Analysis
- 06:03Results: Investigation of Protein-Protein Interactions at Cell-Cell Contacts by sFCCS
- 08:09Conclusion
Dieses Protokoll beschreibt einen Fluoreszenz Fluktuation Spektroskopie basierende Ansatz zur Untersuchung von Interaktionen zwischen den Proteinen, die Vermittlung von Zell-Zell-Interaktionen, d.h. Proteine in der Zelle Verzweigungen direkt in lebenden Zellen lokalisiert. Wir bieten detaillierte Richtlinien auf Kalibrierung, Datenerfassung und -Analyse, einschließlich Korrekturen möglich Artefakt Quellen.
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Keywords:
Fluorescence Fluctuation SpectroscopyProtein-protein InteractionsCell-cell ContactsCell AdhesionCell RecognitionLiving CellsMono-membrane VesiclesModel OrganismsCell TransfectionGreen Fluorescent ProteinYellow Fluorescent ProteinRed Fluorescent ProteinEDTACell DetachmentCell ResuspensionLaser Scanning Confocal MicroscopeSpectral CrosstalkMEGFPMEYFPMCherryMCardinal
