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Generazione di cloni delle cellule di cancro per visualizzare Telomeric Repeat-contenente RNA TERRA espresso da un singolo dei telomeri nelle cellule viventi
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Generation of Cancer Cell Clones to Visualize Telomeric Repeat-containing RNA TERRA Expressed from a Single Telomere in Living Cells
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Generazione di cloni delle cellule di cancro per visualizzare Telomeric Repeat-contenente RNA TERRA espresso da un singolo dei telomeri nelle cellule viventi

DOI:
10.3791/58790-v

•

09:13 min

•

January 17, 2019

•

, , ,
1Laboratory of Cell Biology and Molecular Genetics, Department of Cellular, Computational and Integrative Biology – CIBIO,University of Trento, 2Department of Life Sciences,University of Trieste

Chapters

  • 00:04Title
  • 00:37Selection of Neomycin Resistant Clones
  • 03:41Screening of Neomycin Resistant Clones
  • 05:34Elimination of the Neomycin Resistance Gene from the MS2 Cassette Integrated at Subtelomere 15q
  • 06:06Visualization of TERRA-MS2 Transcripts in Living Cells
  • 06:49Results: Cancer Cell Clones with MS2 Sequence Tag Created and Imaged
  • 08:17Conclusion

Summary

Automatic Translation

Automatic Translation

Qui, presentiamo un protocollo per generare cloni delle cellule di cancro che contiene un tag di sequenza MS2 presso un singolo subtelomeriche. Questo approccio, basandosi sul sistema MS2-GFP, permette la visualizzazione delle trascrizioni endogene di telomerica ripetizione-contenente RNA (TERRA) espresso da un singolo telomero in cellule viventi.

Tags

Keywords: Cancer Cell ClonesTelomeric Repeat-containing RNA (TERRA)Yeast Telomeric Noncoding RNATelomereCell VisualizationSingle TelomereCell CultureCRISPR-Cas9Cell CloningCell FreezingFluorescence Microscopy

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