Journal
/
Genetics
/
Generation av Cancer Cell kloner att visualisera Telomeric Repeat-innehållande RNA TERRA uttryckt från en enda telomeren i levande celler
JoVE Journal
Genetics
A subscription to JoVE is required to view this content.  Sign in or start your free trial.
JoVE Journal Genetics
Generation of Cancer Cell Clones to Visualize Telomeric Repeat-containing RNA TERRA Expressed from a Single Telomere in Living Cells
Please note that all translations are automatically generated. Click here for the English version.

Generation av Cancer Cell kloner att visualisera Telomeric Repeat-innehållande RNA TERRA uttryckt från en enda telomeren i levande celler

DOI:
10.3791/58790-v

•

09:13 min

•

January 17, 2019

•

, , ,
1Laboratory of Cell Biology and Molecular Genetics, Department of Cellular, Computational and Integrative Biology – CIBIO,University of Trento, 2Department of Life Sciences,University of Trieste

Chapters

  • 00:04Title
  • 00:37Selection of Neomycin Resistant Clones
  • 03:41Screening of Neomycin Resistant Clones
  • 05:34Elimination of the Neomycin Resistance Gene from the MS2 Cassette Integrated at Subtelomere 15q
  • 06:06Visualization of TERRA-MS2 Transcripts in Living Cells
  • 06:49Results: Cancer Cell Clones with MS2 Sequence Tag Created and Imaged
  • 08:17Conclusion

Summary

Automatic Translation

Automatic Translation

Här presenterar vi ett protokoll för att generera cancer cell kloner som innehåller en MS2 sekvens tagg på en enda subtelomere. Detta tillvägagångssätt, att förlita sig på MS2-GFP systemet, möjliggör visualisering av endogena avskrifter av telomeric repeat-innehållande RNA (TERRA) uttryckt från en enda telomeren i levande celler.

Tags

Keywords: Cancer Cell ClonesTelomeric Repeat-containing RNA (TERRA)Yeast Telomeric Noncoding RNATelomereCell VisualizationSingle TelomereCell CultureCRISPR-Cas9Cell CloningCell FreezingFluorescence Microscopy

Article

Embed

ADD TO PLAYLIST

Usage Statistics

Related Videos

check_url/58790?article_type=v

Engineering Artificiella Faktorer att specifikt Manipulera alternativ splitsning i humana celler
check_url/58790?article_type=v

Uppfödning och dubbelsträngade RNA-medierad Gene Knockdown i Hide Beetle,<em> Rävänger</em
check_url/58790?article_type=v

Detektion av Copy Number Ändringar Använda Single Cell Sequencing
check_url/58790?article_type=v

Encelliga profilering av genuttryck med FACS och qPCR med interna standarder
check_url/58790?article_type=v

Kartläggning av RNA-RNA-interaktioner globalt med användning av biotinylerad psoralen
check_url/58790?article_type=v

Med hjälp av en fluorescerande PCR-kapillärgelelektrofores Technique att genotypa CRISPR / Cas9-medierad Knockout mutanter i en hög kapacitet Format
check_url/58790?article_type=v

Urval-beroende och oberoende generering av CRISPR / Cas9-medierade genknockouts i däggdjursceller
check_url/58790?article_type=v

Halvkvantitativ detektion av RNA-beroende RNA-polymeras aktivitet av mänskliga telomeras omvänt transkriptas Protein
check_url/58790?article_type=v

Genteknik Dictyostelium discoideum celler baserat på urval och tillväxt på bakterier
check_url/58790?article_type=v

Generering av tumör Organoider från genetiskt modifierade musmodeller av prostata cancer

Read Article