Journal
/
Genetics
/
Прямой ген knock-out аксолотла спинного мозга нейронных стволовых клеток через Электропорации CAS9 Белковые-gRNA комплексов
JoVE Journal
Genetics
A subscription to JoVE is required to view this content.  Sign in or start your free trial.
JoVE Journal Genetics
Direct Gene Knock-out of Axolotl Spinal Cord Neural Stem Cells via Electroporation of CAS9 Protein-gRNA Complexes
Please note that all translations are automatically generated. Click here for the English version.

Прямой ген knock-out аксолотла спинного мозга нейронных стволовых клеток через Электропорации CAS9 Белковые-gRNA комплексов

DOI:
10.3791/59850-v

•

09:10 min

•

July 09, 2019

•

, , , ,
1School of Life Sciences,South China Normal University, 2The Research Institute of Molecular Pathology (IMP),Vienna Biocenter (VBC), 3Institute for Brain Research and Rehabilitation (IBRR),South China Normal University

Chapters

  • 00:04Title
  • 01:16CAS9-gRNA Ribonucleoprotein Mixture and Agarose Plate Preparation
  • 02:33Electroporator Configuration and Glass Microinjection Capillary Loading
  • 04:09Pneumatic Pump Configuration
  • 04:37CAS9-gRNA Ribonucleoprotein Mixture Injection
  • 06:05Electroporation
  • 06:45Knock-Out Efficiency Assessment
  • 07:25Results: Representative Knock-Out Effects in Axolotl Spinal Cord Neural Stem Cells
  • 08:33Conclusion

Summary

Automatic Translation

Automatic Translation

Представлено здесь протокол для выполнения времени и пространства ограниченного гена нокаут в аксолотль спинного мозга путем введения CAS9-gRNA комплекса в спинной мозг центрального канала с последующим электропорированием.

Tags

AxolotlSpinal CordNeural Stem CellsGene Knock-outElectroporationCAS9GRNARegenerationMolecular MechanismsNeural Stem Cell FunctionSpinal Cord InjuryAgarose Electroporation PlatePoring PulseTransfer Pulse

Article

Embed

ADD TO PLAYLIST

Usage Statistics

Related Videos

Отборочное и независимое генерирование CRISPR / Cas9-опосредованных генов-нокаутов в клетках млекопитающих

Стандартная методология для изучения на месте мутагенность как функция Точечная мутация ремонта, катализируемые ТРИФОСФАТЫ/Cas9 и SsODN в клетках человека

Микроинъекции ТРИФОСФАТЫ/Cas9 белка в канал сома, сомик punctatus, эмбрионы для редактирования гена

Протокол для производства интеграза недостаточным лентивирусные векторы для ТРИФОСФАТЫ/Cas9-опосредованной нокаут генов в делящихся клетках

Высокоэффективные гена срыв мышиных и человека гемопоэтических предшественников клеток ТРИФОСФАТЫ/Cas9

Эндогенного белка, пометки в человека индуцированных плюрипотентных стволовых клеток с использованием ТРИФОСФАТЫ/Cas9

Подготовка и генной модификации нечеловеческих приматов гемопоэтических стволовых и прогениторных клеток

С помощью снайпера Cas9 для сведения к минимуму последствий пробить ТРИФОСФАТЫ Cas9 без потери на цель деятельности через направленной эволюции

CRISPR/Cas9 Рибонуклеопротеин-опосредовано Точное редактирование генов трубэлектрогенерации

Поколение определенных геномных модификаций с использованием CRISPR-CAS9 в стволовых клетках человека

Read Article