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Pantalla de péptido sinábicos para la selección de nuevas enzimas biotinylantantes
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Chapters
- 00:04Title
- 00:29Insertion of Peptide Coding Sequencing Sequence in pBAD BirA-eCPX-AP
- 01:32Generation of a BirA Library
- 03:16Selection of Bacteria Expressing Biotinylated Peptide
- 07:18Quantification of Enrichment
- 08:26Results: Model Selection with pBAD-BirA-eCPX-AP and pBAD-BirA-eCPX-AP(K10A)
- 10:00Conclusion
Aquí presentamos un método para seleccionar nuevas variantes de la E. coli biotin-protein ligase BirA que biotinyla un péptido objetivo específico. El protocolo describe la construcción de un plásmido para la visualización bacteriana del péptido objetivo, la generación de una biblioteca BirA, la selección y caracterización de variantes BirA.
