Journal
/
Biochemistry
/
Produzione di Dynein e Kinesin Motor Ensemble su nanostrutture DNA Origami per l'osservazione a singola molecola
JoVE Journal
Biochemistry
A subscription to JoVE is required to view this content.  Sign in or start your free trial.
JoVE Journal Biochemistry
Production of Dynein and Kinesin Motor Ensembles on DNA Origami Nanostructures for Single Molecule Observation
Please note that all translations are automatically generated. Click here for the English version.

Produzione di Dynein e Kinesin Motor Ensemble su nanostrutture DNA Origami per l'osservazione a singola molecola

DOI:
10.3791/60369-v

•

08:09 min

•

October 15, 2019

•

,
1Department of Biological Sciences,Smith College, 2Center for Microscopy and Imaging,Smith College

Chapters

  • 00:04Title
  • 00:46Galactose-Induced Motor Protein Growth, Expression, and Harvesting
  • 01:39Cell Lysis and Soluble Protein Extraction
  • 02:36IgG Affinity Purification
  • 03:17DNA Oligonucleotide Labeling and TEV Cleavage
  • 04:50Chassis Purification
  • 05:56Results: Representative Motor Ensemble Production
  • 07:26Conclusion

Summary

Automatic Translation

Automatic Translation

L'obiettivo di questo protocollo è quello di formare insiemi di motori molecolari sulle nanostrutture di origami del DNA e osservare la motilità dell'insieme utilizzando la microscopia a fluorescenza totale della riflessione interna.

Tags

DNA OrigamiCytoskeletal Motor ProteinsDyneinKinesinMyosinCargo TransportSingle Molecule ObservationYeast ExpressionProtein PurificationIgG Affinity Purification

Article

Embed

ADD TO PLAYLIST

Usage Statistics

Related Videos

FRET di alta precisione a singolo livello molecolare per la determinazione della struttura biomolecola

Una singola molecola semplice, robusta e alta velocità di trasmissione del flusso Stretching Assay implementazione per studiare il trasporto di molecole lungo DNA

Manipolazione di singola molecola di G-quadruplex di pinzette magnetiche

Immobilizzazione covalente di proteine per la spettroscopia di forza di singola molecola

Quantificazione di tutto il proteoma di etichettatura omogeneità a livello di singola molecola

Sintesi enzimatica mediata OaAEP1 e immobilizzazione delle proteine polimerizzate per la spettroscopia a singola molecola

Convenzionale BODIPY Coniugato per la microscopia a super-risoluzione a celle vive e il tracciamento a singola molecola

Analisi a singola cellula di alleli trascrizionalmente attivi mediante FISH a singola molecola

Single-Molecule Dwell-Time Analysis of Restriction Endonuclease-Mediated DNA Cleavage

Effettuare misurazioni FRET a singola molecola precise e accurate utilizzando l'smfBox open source

Read Article