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NF-κB-dependent Luciferase Activation and Quantification of Gene Expression in Salmonella Infected Tissue Culture Cells
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Activation et quantification de l'expression génique dans les cellules de culture tissulaire infectées par Salmonella

DOI:
10.3791/60567-v

•

10:57 min

•

January 12, 2020

•

,
1Department of Immunology and Microbiology,University of Colorado Anschutz Medical Campus

Chapters

  • 00:04Title
  • 01:13Cell Passaging and Seeding
  • 02:51Preparation of Bacteria
  • 06:23Infection of Cells
  • 08:00Luciferase Analysis
  • 09:18Results: Luminescence Assay and RT-qPCR Analysis
  • 10:10Conclusion

Summary

Automatic Translation

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Ici, nous présentons un protocole pour mesurer rapidement et facilement le facteur nucléaire kappa-light-chain-enhancer des cellules B activées (NF-B) activation dans les lignées cellulaires exprimant NF-B::luciferase reporter construit, via des mesures de la luminescence dans le lysate cellulaire. En outre, l'expression génique est déterminée par RT-qPCR isolé à partir de cellules infectées par Salmonella Typhimurium.

Tags

NF-κBLuciferaseGene ExpressionSalmonellaCell CultureTranscription FactorInflammatory ResponseCytokinesChemokinesHeLa CellsReporter PlasmidCell StimulationCell CountingCell Suspension48-Well PlateBacterial CultureLB Agar Plates

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