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इन विट्रो ने अधिक कठोर विशिष्टता के साथ प्रतिबंध एंनोटुकलीज के विकास का निर्देश दिया
JoVE Journal
Genetics
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JoVE Journal Genetics
In Vitro Directed Evolution of a Restriction Endonuclease with More Stringent Specificity
DOI:

09:16 min

March 25, 2020

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Chapters

  • 00:05Introduction
  • 00:49Split-and-Mix Synthesis of Mutagenic Primers
  • 02:34Performing Compartmentalized In Vitro Transcription-translation Reaction
  • 05:07Continued Processing of Libraries and Selection
  • 07:20Results: Examples of Screening of NlaIV Variants for Sequence Specificity Alteration
  • 08:16Conclusion

Summary

Automatic Translation

नई अनुक्रम विशिष्टता के साथ प्रतिबंध एंनोन्यूकपट्ट्स को आंशिक रूप से पतित अनुक्रम को पहचानने वाले एंजाइमों से विकसित किया जा सकता है। यहां हम एक विस्तृत प्रोटोकॉल प्रदान करते हैं जिसका उपयोग हम सफलतापूर्वक एनएलएआईवी एंजाइम की अनुक्रम विशिष्टता को बदलने के लिए करते थे। प्रोटोकॉल के प्रमुख तत्व प्रतिलेखन/अनुवाद प्रतिक्रिया और नए अनुक्रम विशिष्टताओं के साथ वेरिएंट के चयन के इन विट्रो विभाजक हैं ।

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