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Gleichzeitige Quantifizierung ausgewählter Kynurenine, analysiert durch Flüssigchromatographie-Massenspektrometrie in Medium Collected from Cancer Cell Cultures
JoVE Journal
Bioengineering
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JoVE Journal Bioengineering
Simultaneous Quantification of Selected Kynurenines Analyzed by Liquid Chromatography-Mass Spectrometry in Medium Collected from Cancer Cell Cultures
DOI:

10:38 min

May 09, 2020

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Chapters

  • 00:04Introduction
  • 00:573-Nitrotyrosine (3NT), Kynurenine (Kyn), 3-Hydroxykynurenine (3HKyn), 3-Hydroxyanthranilic Acid (3HAA), Xanthurenic Acid (XA) and Charcoal Treated Culture Medium Preparation
  • 01:58Calibration Solution Preparation
  • 03:42Liquid Chromatography-Mass Spectrometry (LC-MS) System Setu
  • 04:20Calibration Curve Construction
  • 04:55Sample Collection
  • 05:33Sample Preparation for LC-MS Analysis
  • 06:30Protein Content Assessment and Data Normalization
  • 08:12Results: Representative LC-MS Data of Selected KYNURENINES Determination
  • 09:57Conclusion

Summary

Automatic Translation

Beschrieben wird hier ein Protokoll zur Bestimmung von vier verschiedenen Tryptophan-Metaboliten, die im Kynurenin-Signalweg (Kynurenin, 3-Hydroxykynurenin, Xanthurensäure, 3-Hydroxyanthranilsäure) in dem Medium erzeugt werden, das aus Krebszellkulturen gesammelt wird, die durch flüssige Chromatographie in Verbindung mit einer einzigen Quadrupol-Massenspektrometrie analysiert werden.

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