Journal
/
/
Membran Proteinlerinin Önceden Oluşturulmuş Nanodisklere Ko-Translasyonel Olarak Yerleştirilmesi
JoVE Journal
Biochemistry
A subscription to JoVE is required to view this content.  Sign in or start your free trial.
JoVE Journal Biochemistry
Co-Translational Insertion of Membrane Proteins into Preformed Nanodiscs
DOI:

08:24 min

November 19, 2020

, , ,

Chapters

  • 00:05Introduction
  • 00:45S30 Ribosomal Protein Lysate Preparation
  • 02:17Membrane Scaffold Protein 1E3D1 (MSP1E3D1) Nanodisc Assembly
  • 03:243-mL Continuous Exchange Cell-Free (CECF) Reaction Setup
  • 04:1060-Microliter CECF Reaction Setup
  • 06:07Results: Representative Preformed Nanodisc-Modified Membrane Protein Characterization
  • 07:40Conclusion

Summary

Automatic Translation

Önceden oluşturulmuş nanodisklere birlikte translasyonel yerleştirme, tanımlanmış lipit ortamlarında deterjanlarla temas etmeden hücresiz sentezlenmiş membran proteinlerinin incelenmesini mümkün kılar. Bu protokol, temel sistem bileşenlerinin hazırlanmasını ve ifade verimliliğini ve numune kalitesini artırmak için kritik parametreleri açıklar.

Related Videos

Read Article