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CRISPR/Cas9 Dpy-10 공동 CRISPR 스크리닝 마커 및 조립된 리보뉴클레오단백질 복합체를 사용하여 C. elegans rbm-3.2 유전자의 편집.
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JoVE Journal Genetics
CRISPR/Cas9 Editing of the C. elegans rbm-3.2 Gene using the dpy-10 Co-CRISPR Screening Marker and Assembled Ribonucleoprotein Complexes.
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CRISPR/Cas9 Dpy-10 공동 CRISPR 스크리닝 마커 및 조립된 리보뉴클레오단백질 복합체를 사용하여 C. elegans rbm-3.2 유전자의 편집.

DOI:
10.3791/62001-v

•

07:46 min

•

December 11, 2020

•

, , , ,
1Department of Chemistry and Biochemistry,The University of Tulsa

Chapters

  • 00:04Introduction
  • 00:53C. elegans Gonad Preparation and Microinjection
  • 01:56Injected Worm Recovery and Transfer
  • 02:37PickingC. elegans for Screening
  • 03:17Single Worm Lysis and PCR
  • 04:22Restriction Digestion and Agarose Gel Electrophoresis
  • 05:08Identification of Positively Edited and Homozygous Edited Worms
  • 06:01Results: Representative C. elegans rbm-3.2 Gene Editing and Screening
  • 07:10Conclusion

Summary

Automatic Translation

Automatic Translation

이 프로토콜의 목표는 조립된 리보뉴클레오단백질 복합체와 스크리닝을 위한 dpy-10 공동 CRISPR 마커를 사용하여 C. elegans 게놈의 원활한 CRISPR/Cas9 편집을 가능하게 하는 것입니다. 이 프로토콜은 삽입, 삭제, 유전자 대체 및 코돈 대체를 포함하여 C. elegans에 있는 유전 수정의 각종을 만들기 위하여 이용될 수 있습니다.

Tags

CRISPR/Cas9C. ElegansRbm-3.2 GeneDpy-10 Co-CRISPRRibonucleoprotein ComplexesGenome EditingMicroinjectionRoller PhenotypeDumpy Phenotype

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