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Identificazione delle proteine leganti di piccoli ligandi con l'azione capillare radiale differenziale del ligando Assay (DRaCALA)
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Identifying the Binding Proteins of Small Ligands with the Differential Radial Capillary Action of Ligand Assay (DRaCALA)
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Identificazione delle proteine leganti di piccoli ligandi con l'azione capillare radiale differenziale del ligando Assay (DRaCALA)

DOI:
10.3791/62331-v

•

09:26 min

•

March 19, 2021

•

, ,
1Department of Biology,University of Copenhagen

Chapters

  • 00:05Introduction
  • 00:42Preparation of Whole Cell Lysates
  • 01:43Nickel-Nitrilotriacetic Acid (Ni-NTA) Affinity Purification of Relseq and GppA
  • 02:55Gel Filtration
  • 03:33Synthesis of 32P-Labeled Guanosine Pentaphosphate (pppGpp) and Guanosine Tetraphosphate (ppGpp)
  • 05:08DRaCALA Screening of the Target Proteins of (p)ppGpp
  • 06:37Quantification and Identification of Potential Target Proteins
  • 07:46Results: DRaCALA Plate Screening and Quantification
  • 08:39Conclusion

Summary

Automatic Translation

Automatic Translation

Il Differential Radial Capillary Action of Ligand Assay (DRaCALA) può essere utilizzato per identificare piccole proteine leganti il ligando di un organismo utilizzando una libreria ORFeome.

Tags

DRaCALASmall Signaling MoleculesEffector ProteinsOVium LibraryE. ColiIPTGLysis BufferNickel-NTA ResinWashing BufferElution BufferGel Filtration

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