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Digital-Droplet PCR zum Nachweis von Indel-Mutationen in gentechnisch veränderten Anopheline-Mückenpopulationen
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Digital-Droplet PCR to Detect Indels Mutations in Genetically Modified Anopheline Mosquito Populations
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Digital-Droplet PCR zum Nachweis von Indel-Mutationen in gentechnisch veränderten Anopheline-Mückenpopulationen

DOI:
10.3791/62607-v

•

05:51 min

•

June 28, 2021

•

, , , ,
1Department of Microbiology & Molecular Genetics,University of California, Irvine, 2Department of Molecular Biology & Biochemistry,University of California, Irvine

Chapters

  • 00:04Introduction
  • 00:48PCR Preparation and Droplet Generation
  • 02:18PCR
  • 03:03Droplet Reading
  • 03:31Analysis
  • 04:49Results: Implications of ddPCR for NHEJ Identification and Quantification in Transgenic Anopheline Mosquitoes
  • 05:27Conclusion

Summary

Automatic Translation

Automatic Translation

Dieses Protokoll bietet die Schritte von der DNA-Extraktion bis zum Versuchsaufbau für die digitale Tröpfchen-PCR (ddPCR), einschließlich der Analyse zur Identifizierung und Quantifizierung von nicht-homologen End-Joining-Ereignissen (NHEJ) an Zielorten nach gRNA-induzierter Cas9-Spaltung und DNA-Reparatur. Andere Anwendungen dieser Methode umfassen Anwendungen wie den Polymorphismus-Nachweis und die Verifizierung von Gen-Editing-Varianten.

Tags

Keywords: Digital Droplet PCRDdPCRNHEJ AnalysisIndel MutationsGene-edited MosquitoGenetic VariationHigh ThroughputFast TurnaroundField AnalysisGenetically Modified Organisms

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